一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡，该载底物纳米微泡由核心模板和外壳构成，核心模板为CdSe/ZnS量子点‑腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素；外壳为叶酸交联聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸聚合物。本发明专利技术还公开了该载底物纳米微泡的制备方法。本发明专利技术的载底物纳米微泡具有靶向释放、延缓降解、保持CdSe/ZnS量子点‑腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素在体内的活性的优点。

A nanometer microbubble targeted by folic acid receptor and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡及其制备方法
本专利技术涉及药物活性保护剂领域及靶向药物载体合成领域，具体涉及一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡及其制备方法。
技术介绍
光动力治疗(PhotodynamicTherapy，PDT)是继手术、化疗、放疗后治疗肿瘤的一种新方法。在皮肤癌、乳腺癌等浅表组织肿瘤取得良好的治疗效果。目前，光动力治疗主要使用激光发射器作为外部光源，激发由静脉注入并分布于肿瘤组织的光敏剂(Photosensitizer，PS)从而引发光动力反应(PhotodaynamicReaction，PDR)产生细胞毒剂-活性氧(ReactiveOxygenSpecies，ROS)，导致肿瘤细胞坏死和/或凋亡，并破坏肿瘤周围新生血管，进而杀伤肿瘤组织由于光动力治疗中所使用的外源性激光穿透力较弱，无法作用于深部组织引发光动力反应，因此，光动力治疗在肝癌等深部组织的治疗中受到限制。在生物系统中的酶催化发光被称为生物发光。这是一个在细菌，藻类、昆虫等均普遍存在的现象。生物发光通常来源于酶(如荧光素酶)催化底物(如荧光素)发生氧化反应，释放光量子。基于这一原理，近年来，研究者们开始了生物发光系统在光动力治疗肝癌等深部组织中的研究，也就是通过将酶与底物递送至肿瘤处，进行发光，提供光源。然而，底物进入体内后容易被迅速降解，无法保证活性。另外，光动力治疗在肝癌的靶向性也是亟待解决的一难题，由于现有的光动力治疗鲜有涉及肝脏等深部组织的研究，借鉴于光动力治疗运用于其他浅表组织，其靶向性主要依靠于肿瘤组织对光敏剂的滞留效应这一被动靶向效应，以及操控光源的靶向照射。这种特异性较低的被动靶向，易造成正常组织的损伤，阻碍了光动力治疗的进一步运用，因此，如何保证底物的靶向性，也是一个难题。
技术实现思路
针对现有技术中存在的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡，该载底物纳米微泡具有靶向释放和延缓降解的优点，保持CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素在体内的活性。为达到以上目的，本专利技术采取的技术方案是：一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡，所述载底物纳米微泡由核心模板和外壳构成，所述核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素；所述外壳为叶酸交联聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸聚合物。进一步地，当所述核心模板含有CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时，所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物由CdSe/ZnS量子点与肠腔荧光素共价偶联而成。本专利技术还提供了一种如上所述的叶酸受体靶向的载底物纳米微泡的制备方法，其包括如下步骤：S1：制备所述叶酸交联聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸聚合物，并使其形成所述外壳；S2：当所述核心模板为腔肠荧光素时，将所述核心模板载入所述外壳中，完成所述载底物纳米微泡的制备；当所述核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时，制备所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物，并使其形成所述核心模板，将所述核心模板载入所述外壳中，完成所述载底物纳米微泡的制备；当所述核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和腔肠荧光素时，制备所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物，并使所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和所述腔肠荧光素形成所述核心模板，将所述核心模板载入所述外壳中，完成所述载底物纳米微泡的制备。进一步地，S2中，当所述核心模板含有CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时，所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物的制备方法如下：在戊二醛中加入1～3ml的缓冲溶液，并加入8～12μlCdSe/ZnS量子点，在氩气环境中搅拌1.5～2.5h后，分离提纯并除去戊二醛；加入1～3mg腔肠荧光素，继续在氩气环境中搅拌反应9～11h后，分离提纯除去腔肠荧光素，得到所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物。进一步地，所述缓冲溶液为硼酸盐缓冲溶液或柠檬酸盐缓冲溶液。进一步地，所述缓冲溶液的pH值为7.2～7.6。进一步地，S2中将所述核心模板载入所述外壳的制备方法如下：S21：将所述核心模板与水混合形成内水相，将内水相加入到所述外壳浓度为0～0.050g/ml的二氯甲烷中，得到初乳液；S22：将所述外壳与水混合形成外水相，利用SPG膜乳化器将初乳液分散到外水相中，得到复乳液；S23：将复乳液转移至磁力搅拌器中，搅拌使二氯甲烷挥发，搅拌速率为80～120rpm/min，搅拌温度为30～50℃，搅拌时间为8～10h；S24：将复乳液转移至离心机中，在3～5℃、2500～3500g条件下离心收集沉淀，干燥。进一步地，内水相采用注射器匀速加入到二氯甲烷中。进一步地，SPG膜乳化器压力舱内压力为45～55kPa,初乳液匀速通过SPG膜分散到外水相中。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：(1)本专利技术为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素包裹了一层外壳，可以提高对CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素的保护，防止其在达到肝脏等深部组织前被降解，保证了生物活性和稳定性。(2)本专利技术外壳表面修饰有叶酸，可与肝癌细胞高表达的叶酸受体实现主动靶向，定位准确；同时，该外壳可以起到待CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素富集后，进行集中激发和释放的作用，该外壳作为一层脂质膜，更易于穿透组织及细胞膜。(3)本专利技术制备的载底物纳米微泡具有包封率稳定，粒径均一，产率高，合成加工方法简单，无生物毒性。附图说明图1为本专利技术实施例提供的核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时的载底物纳米微泡结构示意图。具体实施方式以下结合附图及实施例对本专利技术作进一步详细说明。载底物纳米微泡实施例1：参见图1所示，本专利技术提供一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡，所述载底物纳米微泡由核心模板和外壳构成，所述核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素，当所述核心模板含有CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时，所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物由CdSe/ZnS量子点与肠腔荧光素共价偶联而成；所述外壳为叶酸交联聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸聚合物。采用CdSe/ZnS量子点与腔肠荧光素偶联复合，CdSe/ZnS量子点可以起到起到转换波长的作用，吸收波长450～480nm左右的蓝光并立即转化为650nm左右的红光，也即生物发光共振能量转移效应(BioluminescenceResonanceEnergyTransfer)。。本专利技术为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素包裹了一层外壳，可以提高对CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素活性的保护，防止其在达到肝脏等深部组织前被降解，保证了生物活性和稳定性；同时，该外壳可以起到待CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素富集后，进行集中激发和释放的作用；外壳表面修饰有叶酸，可与肝癌细胞高表达的叶酸受体实现主动靶向，定位准确，然后通过超声靶向爆破技术集中释放，可产生足够强度的生物光用于激发光敏剂，实现药物靶向递送；该外壳作为一层脂质膜，无生物毒性，更易于穿透组织及细胞膜。制备方法实施例1：本专利技术提供了叶酸受体靶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡，所述载底物纳米微泡由核心模板和外壳构成，其特征在于：所述核心模板为CdSe/ZnS量子点‑腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素；所述外壳为叶酸交联聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸聚合物。

【技术特征摘要】
1.一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡，所述载底物纳米微泡由核心模板和外壳构成，其特征在于：所述核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和/或腔肠荧光素；所述外壳为叶酸交联聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸聚合物。2.如权利要求1所述的一种叶酸受体靶向的载底物纳米微泡，其特征在于：当所述核心模板含有CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时，所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物由CdSe/ZnS量子点与肠腔荧光素共价偶联而成。3.一种如权利要求1所述的叶酸受体靶向的载底物纳米微泡的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1：制备所述叶酸交联聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸聚合物，并使其形成所述外壳；S2：当所述核心模板为腔肠荧光素时，将所述核心模板载入所述外壳中，完成所述载底物纳米微泡的制备；当所述核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时，制备所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物，并使其形成所述核心模板，将所述核心模板载入所述外壳中，完成所述载底物纳米微泡的制备；当所述核心模板为CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和腔肠荧光素时，制备所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物，并使所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物和所述腔肠荧光素形成所述核心模板，将所述核心模板载入所述外壳中，完成所述载底物纳米微泡的制备。4.如权利要求3所述的叶酸受体靶向的载底物纳米微泡的制备方法，其特征在于，S2中，当所述核心模板含有CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物时，所述CdSe/ZnS量子点-腔肠荧光素复合物的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：王立宇，程翔，宋祥铭，李加欢，周星，郑启昌，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：湖北,42