绵马贯众中间苯三酚类化合物的新用途制造技术

本发明专利技术提供绵马贯众中间苯三酚类化合物抗H1N1流感病毒的用途。绵马贯众提取物和多种间苯三酚类单体化合物均具有抗流感病毒H1N1(NA)的作用。其中，绵马贯众素ABBA活性最强。

New use of Dryopteris crassirhizoma metaphenylene three phenolic compounds

The invention also provides an application of Dryopteris crassirhizoma intermediate benzene three phenol compounds against the H1N1 influenza virus. Dryopteris crassirhizoma extract and various benzene three phenol compounds have anti influenza virus H1N1 (NA) function. Among them, DRYOCRASSINE ABBA was the strongest.

【技术实现步骤摘要】
绵马贯众中间苯三酚类化合物的新用途
本专利技术涉及一种绵马贯众中间苯三酚类化合物的新用途，具体涉及绵马贯众中间苯三酚类化合物抗H1N1流感病毒的新用途。
技术介绍
绵马贯众为鳞毛蕨科(Dryopteridaceae)鳞毛蕨属(Dryopteris)植物粗茎鳞毛蕨(D.crassirhizoma)的干燥根茎及叶柄残基，味苦，微寒，有小毒，归肝、胃经，具有清热解毒、驱虫等功效。现代药理研究表明，具有抗病毒、驱虫、抗肿瘤、兴奋子宫、雌激素样作用等，临床用于治疗肺炎、乙型肝炎、肠道寄生虫病、妇产科出血、带状疱疹等。神经氨酸酶(Nueraminidase，NA)具有唾液酸酶活性，在A、B型流感病毒的复制、感染和致病过程中起重要的作用；抑制流感病毒神经氨酸酶的活性，可以有效地控制A、B型流感病毒引起的流感症状和疾病的传播。因此，以流感病毒NA为靶点，筛选具有抗病毒活性的神经氨酸酶抑制剂，是研究和开发抗流感病毒药物的一个重要途径。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供绵马贯众素ABBA在制备抗H1N1流感病毒药物中的应用。所述绵马贯众素ABBA(DryocrassinABBA)，又名东北贯众素，是一种四环间苯三酚衍生物，分子式为C43H48O16。本专利技术所述绵马贯众素ABBA为已知化合物，可以从市场购买，也可以按现有技术公开的方法从绵马贯众中提取得到(如第CN101732365A号中国专利公开的方法)，也可以通过化学合成或生物合成方法得到。本专利技术的另一个目的在于提供绵马酸ABA在制备抗H1N1流感病毒药物中的应用。所述绵马酸ABA(FilixicacidABA)，是一种三环间苯三酚衍生物，分子式为C32H36O12。本专利技术所述绵马酸ABA为已知化合物，可以从市场购买，也可以按现有技术公开的方法从绵马贯众中提取得到(如刘钊等在《绵马贯众的活性成分研究》[J].西部医学，2011，23(12)：2300-2306中公开的方法)，也可以通过化学合成或生物合成方法得到。本专利技术的另一个目的在于提供一种绵马贯众提取物在制备抗H1N1流感病毒药物中的应用，所述绵马贯众提取物中绵马贯众素ABBA的含量大于75％。优选的，所述绵马贯众素含量大于80％；进一步优选的，所述绵马贯众素含量大于85％；更进一步优选的，所述绵马贯众素含量大于90％。所述绵马贯众提取物以绵马贯众为原料，经水或有机溶剂提取，并按常规纯化工艺精制得到。其中，所述有机溶剂选自石油醚、乙醚、环己烷、正己烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇、正丁醇中的任意一种或几种的组合；所述提取方法选自煎煮提取、浸渍提取、回流提取、渗漉提取、微波提取和超声提取中的任意一种；所述常规纯化工艺包括加压薄层色谱法、重结晶法、高速逆流色谱法、反相硅胶柱分离法，减压正相硅胶柱分离法、正相硅胶柱分离法以及薄层色谱等。本专利技术所述的绵马贯众素ABBA、绵马酸ABA和绵马贯众提取物可按照常规工艺加入常规辅料制成药剂学可接受的任何制剂，如胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、口服液、滴丸剂或纳米制剂；也可与其他相关药物配伍使用，制成相应的制剂。所述“辅料”是药物制剂在制备或调配过程中所必需的、除主药以外的物质，一般无生理活性，不影响药物制剂中药物疗效、含量测定和稳定性。包括填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等。本专利技术采用经典荧光法，以4-MUNANA(神经氨酸酶的特异性底物)为底物的对绵马贯众中的间苯三酚类化合物抑制神经氨酸酶的活性进行了测定，结果表明，绵马贯众素ABBA对H1N1流感病毒神经氨酸酶具有明显的抑制作用，显著优于其他间苯三酚类化合物。附图说明图1为本专利技术化合物结构式；其中，图1A为绵马贯众素ABBA的结构式；图1B为绵马酸ABA的结构式；图1C为白绵马素AA的结构式；图1D为绵马酸ABP的结构式；图1E为绵马酸ABB的结构式；图1F为黄绵马酸AB的结构式。具体实施方式实施例1绵马贯众提取物的制备取绵马贯众药材，用95％的乙醇回流提取3次，提取液合并，减压回收溶剂，得乙醇提取物，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取石油醚萃取部位，经硅胶柱层析，收集正己烷-氯仿-甲醇(30∶15∶1)洗脱物，得绵马贯众提取物。绵马贯众素ABBA的含量测定：1仪器与试药Waters公司UPLCACQUITYI-CLASS&PAD；SK7210HPKUDOS超声波清洗仪；METTLERTOLEDOXS205DualRang型十万分之一分析天平。甲醇(质谱纯，Fisher公司)；甲酸(色谱纯，DikmaPure)；高纯水(Milli-Q超纯水系统制备)；0.22μm微孔滤膜(津腾公司)。绵马贯众素ABBA，市售，纯度≥98％(HPLC)。2方法2.1供试品溶液的制备取本实施例制备的绵马贯众提取物粉末精密称定，置于10mL容量瓶中，加入乙酸乙酯溶解，用甲醇稀释至刻度做为储备液。取储备液加甲醇稀释作为供试品溶液。2.2对照品溶液的制备精密称定绵马贯众素ABBA对照品适量，用乙酸乙酯溶解，加甲醇稀释制成浓度为0.6348mg/mL的储备液。分别精密量取绵马贯众素ABBA对照品储备液加甲醇等比稀释，得绵马贯众素ABBA的浓度分别为9.92μg/mL，19.84μg/mL，39.68μg/mL，79.35μg/mL，158.7μg/mL，317.4μg/mL，634.8μg/mL。2.3色谱条件色谱柱：ZorbaxSB-C18column(50×2.1mm，1.8μm)流动相：甲醇-0.1％的甲酸流速：0.5mL/min柱温：35℃进样量：1μL检测波长：298nm2.4测定方法精密吸取634.8μg/mL绵马贯众素ABBA对照品溶液和供试品溶液各1μL进样，以外标一点法计算样品中绵马贯众素ABBA的含量。以对照品溶液浓度为横坐标(x)，以色谱峰峰面积为纵坐标(y)绘制标准曲线，并进行相关性分析得到线性方程和相关系数(r)，得y＝4701x-5759.9，r＝0.9999，线性范围(μg/mL)：9.919～634.8。该含量测定方法经方法学考察，精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合要求。3结果分别取绵马贯众提取物粉末6份，每份7mg，精密称定，制备供试品溶液，并按照2.4项下测定法测定，记录各色谱峰峰面积，计算绵马贯众素ABBA含量为79.83％。实施例2绵马贯众提取物的制备取绵马贯众药材，粉碎成粗粉，用90％的乙醇加热回流提取3次，提取液合并，减压回收溶剂，得乙醇提取物，然后经硅胶柱层析，收集石油醚-乙酸乙酯(15∶1)洗脱物，即得绵马贯众提取物。按实施例1含量测定方法测定绵马贯众素ABBA含量为77.6％。实施例3绵马贯众提取物的制备取绵马贯众药材，粉碎成粗粉，用75％的乙醇超声提取3次，提取液合并，本文档来自技高网...

【技术保护点】
绵马贯众素ABBA在制备抗H1N1流感病毒药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.绵马贯众素ABBA在制备抗H1N1流感病毒药物中的应用。2.绵马贯众提取物在制备抗H1N1流感病毒药物中的应用，其特征在于，所述绵马贯众提取物中绵马贯众素的含量大于75％。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述绵马贯众素含量大于80％。4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述绵马贯众素含量大于85％。5.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述绵马贯众素含量大于90％。6.如权利要求2-5任一项所述的应用，其特征在于，所述绵马贯众提取物以绵马贯众为原料，经水或有...

【专利技术属性】
技术研发人员：高增平，王娟，付深振，彭冰，曾祖平，闫艳韬，李菲，
申请(专利权)人：北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：北京,11