在不同的实施方案中，本发明专利技术关注于结合脊椎动物高迁移率族匣（ＨＭＧＢ）多肽的抗体或其抗原片段，测定和／或鉴定结合ＨＭＧＢ多肽的药剂的方法，对以炎症因子级联放大活性为特征的病人情况给予治疗的方法和测定样本中ＨＭＧＢ多肽的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关应用本申请主张2003年11月11日提交的美国临时申请No.60/502568的利益。通过在此引述将上述申请的全部教导都合并于本文。
技术介绍
炎症通常是由促炎症细胞因子诱导的，例如肿瘤凋亡因子(TNF)，白细胞介素(IL)-α，IL-1β，IL-6，巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)，和其他化合物。这些促炎症细胞因子是由许多不同类型的细胞产生的，特别是免疫细胞(例如，单核细胞，巨噬细胞和嗜中性粒细胞)，但也有非-免疫细胞如纤维原细胞，造骨细胞，平滑肌细胞，上皮细胞，和神经细胞。这些促炎症细胞因子导致在促炎症细胞因子级联的早期阶段的多种失调。早期的促炎症细胞因子(例如TNF，IN-1，等)介导炎症，并导致高迁移率族匣蛋白B1(HMGB1；也称为HMG-1和HMG1)的释放，该蛋白聚集于血清中并介导滞后的致命性及早期促炎症细胞因子的进一步诱导。HMGB1最初被认为是DNA-结合蛋白家族中的一员，定义为高迁移率族匣(HMGB)蛋白，其对于DNA的结构和稳定性是必要的。其被认为是一种普遍存在的非序列特异性结合双链DNA的核蛋白。HMGB1分子具有三个域两个DNA结合基，定义为HMGB A匣和HMGB B匣，及一个酸性羧基末端。两个HMGB匣是高度保守的80氨基酸，L-型域。HMG匣在其他转录因子中也有表达，包括RNA聚合酶I转录因子，人下游-结合因子和淋巴-特异因子。最近的证据已经暗示HMG1是一种引发内毒素血症中滞后毁坏性的细胞因子介导者(Andersson，U.，et al.，J.Exp.Med.192(4)565-570(2000))。该工作显示细菌内毒素(脂多糖(LPS))激活单核细胞/巨噬细胞释放HMG1作为活化作用的随后应答反应，并导致具毒性的血清HMG1水平的升高。即使在早期细胞因子应答反应之后再给予随后的抗体治疗，针对HMG1的抗体仍可以防止内毒素的致命性。与其他促炎症细胞因子类似，HMG1是一种单核细胞的蛋白质催化剂。HMG1在气管内的应用导致急性肺损害，而抗-HMG1抗体可保护内毒素-引发的肺水肿(Abraham，E.，et al.，J.Immunol.1652950-2954(2000))。血清HMG1水平在脓血病或出血性休克的急性病人中升高，并且其在非生还者中的水平要远高于生还者。HMG1已经被认为是RAGE的一个配基，它是一种免疫球蛋白超家族的多-配基受体。RAGE在内皮细胞，平滑肌细胞，单核细胞，神经中表达，并且配基交互作用在MAP激酶，P21ras，NF-kB中转换信号。HMG1在内毒素血症中显示的滞后动力学特性使其成为一种潜在的良好治疗目标，但对于HMG1信号传导和毒性的分子基础了解得很少。因此，基于HMG1蛋白在介导炎症中的重要性，确定用于诊断和治疗的结合HMGB的抗体显得十分有益。专利技术概述在不同的实施方案中，本专利技术关注于结合脊椎动物高迁移率族匣蛋白(HMGB)多肽的抗体或其抗原-结合片段，检定并且/或者鉴别结合HMGB多肽的药剂的方法，对促炎症细胞因子级联活化作用特征化的病人情况给予治疗的方法和测定样品中HMGB多肽的方法。在某一实施方案中，本专利技术指特异地结合脊椎动物HMGBAbox，但并不特异地结合非-A boxHMGB表位的抗体或其抗原-结合片段，结合的抗体或抗原-结合片段可抑制HMGB蛋白处理的脊椎动物细胞中促炎症细胞因子的释放。在某些实施方案中，本专利技术指鼠科杂交瘤6E6 HMGB1 mAb，鼠科杂交瘤6H9 HMGB1 mAb，鼠科杂交瘤2G7 HMGB1 mAb，鼠科杂交瘤2E11 HMGB1 mAb，或鼠科杂交瘤10D4 HMGB1mAb产生的抗体。在其他实施方案中，本专利技术指抗体或其抗原结合片段，其与脊髓动物HMGB1多肽的结合可以被6E6 HMGB1mAb，6H9 HMGB1 mAb，2G7 HMGB1 mAb，2E11 HMGB1 mAb和/或10D4 HMGB1 mAb抑制。在另一方面，本专利技术指含有6E6HMGB1 mAb，6H9 HMGB1 mAb，2G7 HMGB1 mAb，2E11 HMGB1mAb和/或10D4 HMGB1 mAB特定表位的抗体或其抗原结合片段。在某些实施方案中，本专利技术指抗体或抗原结合片段，其可结合由SEQ ID NO1中46至63氨基酸残基，SEQ ID NO1中61至78氨基酸残基和/或SEQ ID NO1中151至168氨基酸残基组成的多肽。在某一实施方案中，本专利技术指抗体或抗原结合片段，其可结合由SEQ ID NO1中46至63氨基酸残基组成的多肽，该结合可被2G7 HMGB1 mAb抑制。在另一实施方案中，本专利技术指抗体或抗原结合片段，其可结合由SEQ ID NO1中61至78氨基酸残基组成的多肽，该结合能被6E6 HMGB1 mAb和/或6H9HMGB1 mAb抑制。在另一实施方案中，本专利技术指抗体或抗原结合片段，其可结合由SEQ ID NO1中151至168氨基酸残基组成的多肽，该结合能被2E11 HMGB1 mAb抑制。在某些实施方案中，本专利技术指从6E6 HMGB1 mAb，6H9HMGB1 mAb，2G7 HMGB1 mAb，10D4 HMGB1 mAb和2E11HMGB1 mAb组选取的，包括抗体的CDRs(CDR1，CDR2和CDR3)轻链和CDRs(CDR1，CDR2，CDR3)重链的抗体或抗原结合片段。在其它实施方案中，本专利技术指鼠科杂交瘤6E6 HMGB1 mAb，鼠科杂交瘤6H9 HMGB1 mAb，鼠科杂交瘤2G7 HMGB1 mAb，鼠科杂交瘤2E11 HMGB1 mAb，或鼠科杂交瘤10D4 HMGB1mAb。在另一实施方案中，本专利技术指一种分离细胞，其可产生特异结合脊髓动物HMGB A box但不特异结合非-A box HMGB表位的抗体或抗原结合片段。在其它实施方案中，本专利技术指一种分离细胞，可制备6E6 HMGB1 mAb，6H9 HMGB1 mAb，2G7 HMGB1mAb，2E11 HMGB1 mAb或10D4 HMGB1 mAb。在另一实施方案中，本专利技术指一种分离细胞，产生抗体或其抗原结合片段，其与脊髓动物HMGB1多肽的结合可被6E6 HMGB1 mAb，6H9HMGB1 mAb，2G7 HMGB1 mAb，2E11 HMGB1 mAb和/或10D4HMGB1 mAb抑制。在另一实施方案中，本专利技术指一种分离细胞，产生有6E6 HMGB1 mAb，6H9 HMGB1 mAb，2G7 HMGB1mAb，2E11 HMGB1 mAb和/或10D4 HMGB1 mAb特定表位的抗体或其抗原结合片段。在其他实施方案中，本专利技术指一种组合物，包括本专利技术的抗体或抗原结合片段和制药学上可接受的赋形剂。在另一实施方案中，本专利技术是一种检测和/或鉴定结合脊髓动物HMGB多肽的，包括结合本专利技术的抗体或抗原结合片段的制剂的方法，一种检测试剂，以及包括脊髓动物HMGB多肽的组合物。在该方法中，抗体或抗原结合片段与HMGB多肽之间的联合体形式能被检测或测量，并且当与合适的对照相比，联合体形式的减少表示测试药剂结合了HMGB多肽。在另一实施方案中，本专利技术指对以促炎症细胞因子级联活化作用为特征的病人情况给予治疗的方法本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种特异地结合脊椎动物高迁移率族匣（ＨＭＧＢ）Ａ匣，但并不特异地结合非－Ａ匣ＨＭＧＢ表位的抗体或其抗原－结合片段，其中所述的抗体或抗原－结合片段抑制经高迁移率族蛋白处理的脊椎动物细胞中促炎症细胞因子的释放。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：沃特纽曼，秦世欣，特丽萨奥基夫，罗伯特奥巴，
申请(专利权)人：鉴定医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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