高产盐屋霉素及其类似物的产生菌、盐屋霉素及其类似物的制法及其用途制造技术

本发明专利技术提供了高产盐屋霉素及其类似物的产生菌、盐屋霉素及其类似物的制法及其用途，具体地，本发明专利技术提供了一种新的盐屋霉素类似物以及一种高产盐屋霉素及其类似物的工程菌株。本发明专利技术提供的工程菌株中的tsrH基因(硫链丝菌素前体肽基因)被失活或敲除，并且携带产生盐屋霉素及其类似物的表达载体。本发明专利技术提供的工程菌株可高产量的生产盐屋霉素及其类似物，具有很高的应用价值。

Preparation and use of the producing strains of hydamycin and its analogues and their analogues

The invention provides a high-yielding salt yamomycin and its analogues, a method for the preparation and application of the salt house fungus and its analogues. In particular, the invention provides a new salt house fungus analogues and an engineering strain producing high salt salt house mycin and its analogues. The tsrH gene (sulfur chain streptozocin precursor peptide gene) in the engineering strain is inactivated or knocked out, and carries the expression vector producing yamomycin and its analogues. The engineering strain provided by the invention can produce high yield of the production of hydencomycin and its analogues, and has high application value.

【技术实现步骤摘要】
高产盐屋霉素及其类似物的产生菌、盐屋霉素及其类似物的制法及其用途
本专利技术涉及药物领域和生物技术工程领域，具体地，高产盐屋霉素及其类似物的产生菌、盐屋霉素及其类似物的制法及其用途。
技术介绍
硫肽类抗生素是一类富含硫元素、结构被高度修饰的大环聚肽类天然产物，迄今已有大约100个天然成员被发现[Chem.Rev.,2005,105,685；PlosOne2012,7,e45878]。这类抗生素选择性的作用于细菌的核糖体，从而抑制其蛋白质的合成[Bioorg.Med.Chem.Lett.,2004,14,5573；J.Nat.Prod.,2009,72,841；J.Am.Chem.Soc.,2008,130,12102]；此外，其强烈的抗疟、抗肿瘤以及免疫抑制等活性也被陆续报到[Angew.Chem.Int.Ed.,2012,51,12414]。盐屋霉素(Siomycin)是一种由革兰氏阳性菌盐屋链霉菌(Streptomycessioyaensis)产生的一类硫肽类抗生素。盐屋霉素作为硫链丝菌素(Thiostrepton)的天然类似物，其化学结构与硫链丝菌素相差不大，但是在生物活性方面，Siomycin却表现出优于TSR的抗肿瘤效果。另外还有研究发现Siomycin具有良好的免疫抑制活性、抑制反刍动物瘤胃中的寄生菌Streptococcusbovis从而避免乳酸中毒的活性。目前盐屋霉素产生菌Streptomycessioyaensis在发酵第10天的产素量只达到每升毫克级的水平且发酵条件苛刻。此外，为了提高盐屋霉素的抗菌活性以及其他特性，本领域一直在尝试开发盐屋霉素的各类衍生物或类似物，然而迄今为止尚未成功开发出具有活性更高等优点的盐屋霉素类似物。因此，本领域迫切需要开发各类新型的盐屋霉素类似物。因此，本领域迫切需要开发各类新型的盐屋霉素类似物以及高产且发酵条件温和的盐屋霉素产生菌。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供各类新型的盐屋霉素类似物以及高产且发酵条件温和的盐屋霉素产生菌。本专利技术第一方面提供了一种盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐，所述盐屋霉素类似物具有式I所示的结构：式中，R1选自下组：H、-R3-O-R4、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C2-C6链烯基、取代或未取代的C2-C6链炔基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的C3-C6环烷基、或其组合；其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个取代基取代：卤素、-NH2、-OH、-NO2、或CF3；R3为取代或未取代的C1-C2亚烷基而R4为H、取代或未取代的C1-C3烷基；和R2选自下组：H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C2-C6链烯基、取代或未取代的C2-C6链炔基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的C3-C6环烷基、或其组合；其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个取代基取代：卤素、-NH2、-OH、-NO2、或CF3。在另一优选例中，所述R1选自下组：H、-R3-O-R4、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C2-C4链烯基、取代或未取代的C2-C4链炔基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C3-C4环烷基、或其组合，其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个取代基取代：卤素、-NH2、-OH、-NO2、或CF3；R3为C1-C2亚烷基而R4为H、C1-C3烷基。在另一优选例中，所述R2选自下组：H、取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C2-C4链烯基、取代或未取代的C2-C4链炔基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C3-C4环烷基、或其组合，其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个取代基取代：卤素、-NH2、-OH、-NO2、或CF3。在另一优选例中，所述R1为-CH2-OH。在另一优选例中，所述R2为C3烷基、C3链烯基、或C3链炔基。在另一优选例中，所述R2为异丙基。在另一优选例中，所述卤素包括F、Cl、Br或I。在另一优选例中，所述盐屋霉素类似物为光学异构体或外消旋体。在另一优选例中，所述盐屋霉素类似物具有式Ia结构：在另一优选例中，所述盐屋霉素类似物为2-丝氨酸-盐屋霉素。本专利技术第二方面提供了一种药物组合物，包括：(a)本专利技术第一方面所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐；和(b)药学上可接受的载体。在另一优选例中，所述药物组合物还包括盐屋霉素。在另一优选例中，所述盐屋霉素的结构式如式II所示：在另一优选例中，组分(a)在药物组合物中的含量为0.0001-99wt％，较佳地，0.01-95wt％，更佳地，0.1-90wt％。在另一优选例中，所述药物组合物还包括其他具有抗菌活性的化合物。在另一优选例中，所述其他具有抗菌活性的化合物选自下组：万古霉素、氯霉素、林可霉素、或其组合。本专利技术第三方面提供了一种盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐的用途，所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐被(a)用于制备抗菌的组合物；(b)用于抑制微生物生长的组合物；(c)用于制备治疗微生物或细菌感染的组合物；和/或(d)用作饲料添加剂。在另一优选例中，所述组合物选自下组：药物组合物、饲料组合物、或其组合。在另一优选例中，所述的饲料添加剂是抗菌剂。在另一优选例中，所述的微生物或细菌包括革兰氏阳性菌。本专利技术第四方面提供了一种体外非治疗性地抑制微生物生长或者杀灭微生物的方法，包括步骤：在需要处理的场所使用本专利技术第一方面所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐。本专利技术第五方面提供了一种制备药物组合物的方法，包括步骤：将本专利技术第一方面所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐；和药学上可接受的载体进行混合，从而形成药物组合物。本专利技术第六方面提供了一种治疗动物细菌感染的方法，包括步骤：给需要治疗的动物使用本专利技术第一方面所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐或本专利技术第二方面所述的药物组合物。在另一优选例中，所述的动物包括：哺乳动物、家畜(如牛、猪、羊等)、家禽(如鸡、鸭、鹅等)、水产养殖的动物。本专利技术第七方面提供了一种制备饲料组合物的方法，包括步骤：将本专利技术第一方面所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐作为饲料添加剂和饲料原料进行混合，从而形成含有盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐的饲料组合物。在另一优选例中，所述饲料组合物用于家畜(如牛、猪、羊等)养殖、家禽(如鸡、鸭、鹅等)养殖或水产养殖中。本专利技术第八方面提供了一种产生盐屋霉素及其类似物的工程菌株，所述菌株为劳伦链霉菌(Streptomyceslaurentii)，其中，所述菌株中的tsrH基因(硫链丝菌素前体肽基因)被失活或敲除，并且携带产生盐屋霉素及其类似物的表达载体。在另一优选例中，所述劳伦链霉菌(Streptomyceslaurentii)为突变的劳伦链霉菌(Streptomyceslaurentii)，较佳地为劳伦链霉菌(Streptomyceslaurentii)SL-11V-A2S。在另一优选例中，所述劳伦链霉菌(Streptomyceslaurentii)SL-11V-A2S的保藏号为CGMCC12736。在另一优选例中，所述盐屋霉素的结构式如式II所示：在另一优选例中，所述盐屋霉素类似物的结构式如本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述盐屋霉素类似物具有式I所示的结构：

【技术特征摘要】
1.一种盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述盐屋霉素类似物具有式I所示的结构：式中，R1选自下组：H、-R3-O-R4、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C2-C6链烯基、取代或未取代的C2-C6链炔基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的C3-C6环烷基、或其组合；其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个取代基取代：卤素、-NH2、-OH、-NO2、或CF3；R3为取代或未取代的C1-C2亚烷基而R4为H、取代或未取代的C1-C3烷基；和R2选自下组：H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C2-C6链烯基、取代或未取代的C2-C6链炔基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的C3-C6环烷基、或其组合；其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个取代基取代：卤素、-NH2、-OH、-NO2、或CF3。2.一种药物组合物，其特征在于，包括：(a)权利要求1所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐；和(b)药学上可接受的载体。3.一种盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，所述的盐屋霉素类似物或其药学上可接受的盐被(a)用于制备抗菌的组合物；(b)用于抑制微生物生长的组合物；(c)用于制备治疗微生物或细菌感染的组合物；和/或(d)用作饲料添加剂。4.一种体外非...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文，段盼盼，
申请(专利权)人：中国科学院上海有机化学研究所，
类型：发明
国别省市：上海,31