【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种人端粒酶基因转导骨髓间充质干细胞的方法，其特征是通过以下方案实现：（１）构建ｐＬＸＳＮ－ｈＴＥＲＴ重组表达载体，将ｐＧＲＮ１４５质粒用ＨｐａⅠ和ＮｏｔⅠ限制性内切酶酶切，经琼脂凝胶电泳分离提纯得到ｈＴＥＲＴｃＤＮＡ片段，并与采用相同限制性内切酶酶切的ｐＬＸＳＮ载体相连，构建成ｐＬＸＳＮ－ｈＴＥＲＴ重组表达载体；（２）构建高效表达外源ｈＴＥＲＴ基因的人骨髓间充质干细胞，依据ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ脂质体转导试剂盒指导说明书，通过兼噬性包装细胞系ＰＡ３１７制备ｐＬＸＳＮ－ｈＴＥＲＴ重组表达载体悬浮液后，在１，５－二甲基－１，５－二氮十一亚甲基聚甲溴化物辅助下对人骨髓间充质干细胞进行８小时的ｐＬＸＳＮ－ｈＴＥＲＴ表达载体转导，构建高效表达外源ｈＴＥＲＴ基因的人骨髓间充质干细胞；（３）采用低浓度的潮霉素进行双重筛选转导外源ｈＴＥＲＴ基因的人骨髓间充质干细胞。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王金福，黄国平，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。