一种秸秆就地还田腐熟剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种秸秆就地还田腐熟剂的制备方法：将枯草芽孢杆菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到枯草芽孢杆菌剂发酵液；将黑曲霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到黑曲霉菌剂发酵液；将里氏木霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到里氏木霉菌剂发酵液；将酿酒酵母菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到酿酒酵母菌发酵液；将枯草芽孢杆菌剂发酵液、黑曲霉菌剂发酵液、里氏木霉菌剂发酵液及酿酒酵母菌发酵液混合，得到秸秆就地还田腐熟剂。利用发明专利技术的制备方法得到的腐熟剂腐解效率高、降解时间短。

Preparation method of a kind of straw returning field decomposing agent

The invention discloses a straw returning in situ decomposition agent preparation method: Bacillus subtilis by using test tube strain slant culture flask, activating cultivation and seed tank and fermentor. The obtained liquid fermentation of Bacillus subtilis agent; Aspergillus niger by in vitro bacteria in slant culture flask, activated culture seed tank fermentation and fermentation, liquid fermentation by Aspergillus niger agent; the Trichoderma reesei sequentially through the test tube strain slant culture, shake flask culture, the fermentation and activation of the seed fermentor, liquid fermentation by Trichoderma reesei agent; Saccharomyces cerevisiae strains will be sequentially through the test tube slant culture, shake flask culture, activation seed fermentation and fermentation by Saccharomyces cerevisiae, fermentation; Bacillus subtilis fermentation liquid, Aspergillus niger fermentation agent, Trichoderma reesei fermentation liquid and The fermentation broth of Saccharomyces cerevisiae is mixed, and the rotten agent for returning the field to the field is obtained. The decomposing efficiency of the decomposing agent obtained by the preparation method is high and the degradation time is short.

【技术实现步骤摘要】
一种秸秆就地还田腐熟剂的制备方法
本专利技术属于秸杆腐熟剂
，具体涉及一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法。
技术介绍
秸秆还田是把作为农作物副产品的秸秆直接或经过堆积腐熟后施入土壤中的一种方法。秸秆中含有大量的新鲜有机物料，在归还于农田之后，经过一段时间的腐解作用，就可以转化成有机质和速效养分，既可改善土壤理化性状，也可供应一定养分。秸秆还田可促进农业节水、节成本、增产、增效，在环保和农业可持续发展中受到了充分的重视。秸秆还田有很多的好处。秸秆还田能增加土壤新鲜有机质，提高土壤肥力；农作物秸秆的成分主要是纤维素、半纤维素、一定数量的木质素、蛋白质和糖类物质，这些物质经过发酵、腐解，转化为土壤重要的组成成分-有机质。有机质是衡量土壤肥力的重要指标，因为它不仅是植物主要和次要营养元素的来源，同时在防止土壤侵蚀、增加透水性和提高水分利用率方面都具有重要的作用。也就是说，土壤有机质含量越高，土地越肥沃，耕性越好，丰产性能越持久。秸秆还田就是增加土壤有机质最为有效的措施。黑龙江农垦总局公布的数据显示，长期连续农作物秸秆还田使土壤有机质有逐渐回升的趋势。特别是麦秸还田后，土壤中细菌数量增加了16倍，纤维分解菌提高了8.5倍，放线菌提高了3.6倍。微生物数量增加，活动增强，加速了土壤有机质的分解转化，使土壤供肥能力得到加强。现有的腐熟剂存在着发酵时间过长的问题。在自然条件下，由于秸秆结构的稳定性，秸秆分解腐熟的速度相当慢，旱田中的秸秆一年的腐解率只有不到50％。堆腐式秸秆还田则指的是将秸秆收集后，施加腐解剂，通过一段时间的堆沤发酵使秸秆软化分解成肥料，再返回农田。这种腐熟方式消耗人力太大，不适合大规模作业的农田。所以现在越来越多的人开始关注秸秆就地腐熟还田的技术，即直接将秸秆腐熟剂喷洒在联合收割机收割过的农田中，使秸秆快速腐熟。然而，就地还田面临的最大问题是秸秆腐熟剂中微生物的存活问题。暴露在农田中的微生物往往会因为温度和营养问题而失活甚至死亡，无法实现秸秆还田的目的。能够耐低温的微生物选种以及其他辅助底料的配比问题是秸秆腐熟还田面临的最大问题。中国专利CN101139561公开了一种腐熟秸秆的腐熟剂，配比为枯草芽孢杆菌20％、地衣芽孢杆菌10％、黄曲霉20％、毛壳20％、伞枝梨头霉20％、酵母10％，其工艺为：将有益分解菌分别进行纯化、复壮、扩繁和培养；再把培养好的各单个菌株按比例接入经过灭菌处理过的固体培养基中，在25～50℃的温度范围内，经4-5天发酵后晾干备用；然后把各个菌株晾干水分达到25％，将晾干的单个固体菌株按上述配方配比、搅拌均匀、包装制成固体腐熟剂。利用该腐熟剂虽然腐解效率高，然而菌株需要利用紫外线辐射进行复壮性培养，制备工艺复杂且成本过高，不适合商业化。中国专利CN101306961公开了一种园林植物废弃物堆肥菌剂的生产方法及其应用，其将枯草芽孢杆菌、緑色木霉、植物乳杆菌、脱氮副球菌、米曲霉和酿酒酵母各10-～20份质量接种于固态发酵培养基中，在25～30℃和黑暗密封下培养发酵约3周；一周后添加250份质量锯末，搅匀，继续培养发酵；两周后放干草吸收多余水分后移除干草，阴干即得粉状菌剂。然而，利用该菌剂促使秸秆完全腐熟的周期太长，约一个月左右，不适合在茬口紧的多熟农区应用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，制备出的腐熟剂具有腐解效率高、降解时间短的特点，特别是常温甚至低温下仍具有良好的分解效果。本专利技术所采用的技术方案是，一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，具体按照以下步骤实施：步骤1、将枯草芽孢杆菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到枯草芽孢杆菌剂发酵液；步骤2、将黑曲霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到黑曲霉菌剂发酵液；步骤3、将里氏木霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到里氏木霉菌剂发酵液；步骤4、将酿酒酵母菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到酿酒酵母菌发酵液；步骤5、将经步骤1得到的枯草芽孢杆菌剂发酵液、步骤2得到的黑曲霉菌剂发酵液、步骤3得到的里氏木霉菌剂发酵液以及步骤4得到的酿酒酵母菌发酵液混合均匀，得到秸杆就地还田腐熟剂。本专利技术的特点还在于：步骤1具体按照以下步骤实施：步骤1.1、将枯草芽孢杆菌接种于LB斜面培养基A中，温度控制为35℃～37℃，培养时间为1天～2天，完成试管菌种斜面培养，得到活化菌种A；步骤1.2、将经步骤1.1得到的活化菌种A接种到LB液体培养基A中，于35℃～37℃、160rpm/min～200rpm/min条件下培养17h～19h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成摇瓶活化培养，得到培养菌液A；步骤1.3、将经步骤1.2得到的培养菌液A按1％～2％接种量接种到种子培养基A中，再于35℃～37℃、180rpm/min～220rpm/min条件下培养23h～25h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成种子罐发酵，得到种子培养液A；步骤1.4、将经步骤1.3得到的种子培养液A按1％～2％接种量接种到发酵培养基A中，于35℃～37℃、180rpm/min～220rpm/min条件下培养35h～37h，直至其中含有的有效活菌数达到有效活菌数达到2～4亿/ml，完成发酵罐发酵，得到枯草芽孢杆菌剂发酵液。LB斜面培养基A的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏、氯化钠和琼月旨添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠、14g～16g琼月旨；LB液体培养基A的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏和氯化钠添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠；种子培养基A的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏和氯化钠添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠；发酵培养基A的配制方法为：将玉米粉、豆柏粉、葡萄糖、磷酸钾、硫酸锰和碳酸钙添加到水中，混合均匀后即得，每升水中含有19g～21g玉米粉、29g～31g豆柏粉、4g～6g葡萄糖、0.9g～1.1g磷酸钾、0.19g～0.21g硫酸锰、0.29～0.31g碳酸钙。步骤2具体按照以下步骤实施：步骤2.1、将黑曲霉菌接种于LB斜面培养基B中，温度控制为35℃～37℃，培养时间为1天～2天，完成试管菌种斜面培养，得到活化菌种B；步骤2.2、将经步骤2.1得到的活化菌种B接种到LB液体培养基B中，于35℃～37℃、160rpm/min～200rpm/min条件下培养17h～19h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成摇瓶活化培养，得到培养菌液B；步骤2.3、将经步骤2.2得到的培养菌液B按1％～2％接种量接种到种子培养基B中，于35℃～37℃、180rpm/min～220rpm/min条件下培养23h～25h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成种子罐发酵，得到种子培养液B；步骤2.4、将经步骤2.3得到的种子培养液B按1％～2％接种量接种到发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1、将枯草芽孢杆菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到枯草芽孢杆菌剂发酵液；步骤2、将黑曲霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到黑曲霉菌剂发酵液；步骤3、将里氏木霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到里氏木霉菌剂发酵液；步骤4、将酿酒酵母菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到酿酒酵母菌发酵液；步骤5、将经步骤1得到的枯草芽孢杆菌剂发酵液、步骤2得到的黑曲霉菌剂发酵液、步骤3得到的里氏木霉菌剂发酵液以及步骤4得到的酿酒酵母菌发酵液混合均匀，得到秸杆就地还田腐熟剂。

【技术特征摘要】
1.一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1、将枯草芽孢杆菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到枯草芽孢杆菌剂发酵液；步骤2、将黑曲霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵及发酵罐发酵，得到黑曲霉菌剂发酵液；步骤3、将里氏木霉菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到里氏木霉菌剂发酵液；步骤4、将酿酒酵母菌依次经试管菌种斜面培养、摇瓶活化培养、种子罐发酵、发酵罐发酵，得到酿酒酵母菌发酵液；步骤5、将经步骤1得到的枯草芽孢杆菌剂发酵液、步骤2得到的黑曲霉菌剂发酵液、步骤3得到的里氏木霉菌剂发酵液以及步骤4得到的酿酒酵母菌发酵液混合均匀，得到秸杆就地还田腐熟剂。2.根据权利要求1所述的一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1具体按照以下步骤实施：步骤1.1、将枯草芽孢杆菌接种于LB斜面培养基A中，温度控制为35℃～37℃，培养时间为1天～2天，完成试管菌种斜面培养，得到活化菌种A；步骤1.2、将经步骤1.1得到的活化菌种A接种到LB液体培养基A中，于35℃～37℃、160rpm/min～200rpm/min条件下培养17h～19h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成摇瓶活化培养，得到培养菌液A；步骤1.3、将经步骤1.2得到的培养菌液A按1％～2％接种量接种到种子培养基A中，再于35℃～37℃、180rpm/min～220rpm/min条件下培养23h～25h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成种子罐发酵，得到种子培养液A；步骤1.4、将经步骤1.3得到的种子培养液A按1％～2％接种量接种到发酵培养基A中，于35℃～37℃、180rpm/min～220rpm/min条件下培养35h～37h，直至其中含有的有效活菌数达到有效活菌数达到2～4亿/ml，完成发酵罐发酵，得到枯草芽孢杆菌剂发酵液。3.根据权利要求2所述的一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，其特征在于，所述LB斜面培养基A的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏、氯化钠和琼月旨添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠、14g～16g琼月旨；所述LB液体培养基A的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏和氯化钠添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠；所述种子培养基A的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏和氯化钠添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠；所述发酵培养基A的配制方法为：将玉米粉、豆柏粉、葡萄糖、磷酸钾、硫酸锰和碳酸钙添加到水中，混合均匀后即得，每升水中含有19g～21g玉米粉、29g～31g豆柏粉、4g～6g葡萄糖、0.9g～1.1g磷酸钾、0.19g～0.21g硫酸锰、0.29～0.31g碳酸钙。4.根据权利要求1所述的一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2具体按照以下步骤实施：步骤2.1、将黑曲霉菌接种于LB斜面培养基B中，温度控制为35℃～37℃，培养时间为1天～2天，完成试管菌种斜面培养，得到活化菌种B；步骤2.2、将经步骤2.1得到的活化菌种B接种到LB液体培养基B中，于35℃～37℃、160rpm/min～200rpm/min条件下培养17h～19h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成摇瓶活化培养，得到培养菌液B；步骤2.3、将经步骤2.2得到的培养菌液B按1％～2％接种量接种到种子培养基B中，于35℃～37℃、180rpm/min～220rpm/min条件下培养23h～25h，直至其中含有的有效活菌数达到1～2亿/ml，完成种子罐发酵，得到种子培养液B；步骤2.4、将经步骤2.3得到的种子培养液B按1％～2％接种量接种到发酵培养基B中，于35℃～37℃、180rpm/min～220rpm/min条件下培养35h～37h，直至其中含有的有效活菌数达到有效活菌数达到2～4亿/ml，完成发酵罐发酵，得到黑曲霉菌剂发酵液。5.根据权利要求4所述的一种秸杆就地还田腐熟剂的制备方法，其特征在于，所述LB斜面培养基B的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏、氯化钠和琼月旨添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠、14g～16g琼月旨；所述LB液体培养基B的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏和氯化钠添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为7.2，每升水中含有9g～11g蛋白胨、4g～6g酵母膏、9g～11g氯化钠；所述种子培养基B的配制方法为：将蛋白胨、酵母膏和氯化钠添加到水中，混合均匀后即得，其pH值为...

【专利技术属性】
技术研发人员：李琳，
申请(专利权)人：李琳，
类型：发明
国别省市：陕西,61