The purpose of the invention is to provide a method of microfluidic chip and exosome capture and detection, which is characterized in that the microfluidic chip consists of a glass substrate and PDMS film composition; the diaphragm is provided with two curved mixing channel, two collection pool, five connecting channel, four inlet and a liquid outlet. The invention of the microfluidic chip combined with immunomagnetic nanoparticles method can capture the exosome trace in the liquid, and the microfluidic chip makes the exosome capture and detection can be done in a technology platform, and has the advantages of small size, short detection time.
【技术实现步骤摘要】
一种微流控芯片及外泌体捕获和检测的研究方法
本专利技术涉及将微流控芯片技术应用于生物检测领域,特别提供了一种研究外泌体捕获并检测的微流控芯片及研究方法。
技术介绍
外泌体(Exosomes)是细胞分泌的直径为30~200纳米左右、由脂质双分子膜包裹的小囊泡,既可以转运蛋白质(膜蛋白、细胞因子、生长因子等)又可以转运核酸,是细胞间信息传递的重要媒介。外泌体的外膜是脂质双分子层,其内包裹着细胞浆中的各种分子成分,包括蛋白、DNA、mRNA、microRNA、lncRNA等。外泌体作为转运各种生物分子的重要载体,能以介导受体-配体结合的方式,或以磷脂酰丝氨酸依赖性方式与细胞膜融合,从而传递各类信息。其内含的蛋白质和核酸物质可作用于受体细胞,通过改变受体细胞蛋白表达谱、基因调控等方式,影响细胞间的通讯和正常生理过程。外泌体表面具有多种抗原,如CD63、CD82、MHCI、MHCⅡ、EpCAM等。正常细胞产生外泌体后,以自分泌、旁分泌和内分泌三种方式进行细胞间信息的交换和传递,一般通过表面信号分子的直接接触,或外泌体内活性成分的胞外释放,或者膜融合的过程,引起受体细胞基因表达和细胞功能的改变,对受体细胞的生理活动进行调节,参与多种病理生理反应。目前常用的外泌体分离方法有超高速离心法、商品化试剂盒法(如ExoQuickexosomeprecipitationsolutiou试剂盒)、流式细胞仪分离法等。传统的外泌体捕获方法有一个共同的缺点,就是消耗样品量大,而且捕获和检测不能同时进行。为解决上述难题,本专利技术采用微流控芯片技术提供了一个新的研究平台,构建基于免疫磁性 ...
【技术保护点】
一种用于外泌体捕获和检测的微流控芯片,该微流控芯片由基片和膜片组成,其特征在于:所述膜片上设有曲形混合通道、收集池、连接通道、进样口和出液口;其中,第一进样口(6a)和第二进样口(6b)通过连接通道(5)与第一曲形混合通道(3a)相连;第一曲形混合通道(3a)通过连接通道(5)与第一收集池(4a)相连,且在第一曲形混合通道(3a)与第一收集池(4a)之间设有第三进样口(6c);第一收集池(4a)通过连接通道(5)与第二曲形混合通道(3b)相连;第二曲形混合通道(3b)通过连接通道(5)与第二收集池(4b)相连,且在第二曲形混合通道(3b)与第二收集池(4b)之间设有第四进样口(6d);第二收集池(4b)与出液口(7)相连。
【技术特征摘要】
1.一种用于外泌体捕获和检测的微流控芯片,该微流控芯片由基片和膜片组成,其特征在于:所述膜片上设有曲形混合通道、收集池、连接通道、进样口和出液口;其中,第一进样口(6a)和第二进样口(6b)通过连接通道(5)与第一曲形混合通道(3a)相连;第一曲形混合通道(3a)通过连接通道(5)与第一收集池(4a)相连,且在第一曲形混合通道(3a)与第一收集池(4a)之间设有第三进样口(6c);第一收集池(4a)通过连接通道(5)与第二曲形混合通道(3b)相连;第二曲形混合通道(3b)通过连接通道(5)与第二收集池(4b)相连,且在第二曲形混合通道(3b)与第二收集池(4b)之间设有第四进样口(6d);第二收集池(4b)与出液口(7)相连。2.按照权利要求1所述用于外泌体捕获和检测的微流控芯片,其特征在于:第三进样口(6c)开口于连接通道(5)侧方。3.按照权利要求1所述用于外泌体捕获和检测的微流控芯片,其特征在于:第四进样口(6d)开口于连接通道(5)侧方。4.按照权利要求1所述用于外泌体捕获和检测的微流控芯片,其特征在于:所述基片为玻璃;所述膜片为聚二甲基硅氧烷;玻璃基片和膜片为不可逆封接。5.按照权利要求1-4任一所述用于外泌体捕获和检测的微流控芯片,其特征在于:第一曲形混合通道(3a)和第二曲形混合通道(3b)的长度、宽度和深度相同;长度为10~100毫米;宽度为10~1000微米;深度为10~1000微米。6.按照权利要求1-4任一所述用于外泌体捕获和检测的微流控芯片,其特征在于:第一收集池(4a)和第二收集池(4b)的长度、宽度和深度相同;长度为0.1~10毫米;宽度为0.1~10毫米;深度为10~1000微米。7.一种采用权利要求1所述微流控芯片进行外泌体捕获和检测的方法,其特征在于:在微流控芯片的第一进样口(6a)加入第...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘婷姣,方诗萌,田鸿竹,金冬,
申请(专利权)人:大连医科大学,
类型:发明
国别省市:辽宁,21
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