豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用。该豆芋花乙醇提取物的制备方法为包括以下步骤：1)、将豆芋花和含0.1mol/L盐酸的乙醇混合后打浆、超声浸提、离心，得上清液；2)、将上清液旋转蒸发浓缩直至为原体积的10～20％；3)、将浓缩液采用大孔树脂进行分离纯化；以体积浓度1％甲酸水溶液作为淋洗剂，以含有0.1％甲酸的甲醇水溶液作为洗脱剂，收集洗脱液；4)、将洗脱液旋转蒸发浓缩成至为原体积的10～20％，得浆状浓缩液；5)、将浆状浓缩液先预冻，然后用真空冷冻干燥机将其干燥成粉末状，得到豆芋花乙醇提取物。

Application of ethanol extract of taro flower in reducing liver cell lipid deposition

The invention discloses the application of a kind of ethanol extract of taro flower in reducing the lipid deposition of liver cells. A method for the preparation of the ethanol extract of the bean dasheen comprises the following steps: 1), bean dasheen and 0.1mol/L containing hydrochloric acid ethanol after beating, ultrasonic extraction, centrifugation, supernatant; 2), and the supernatant was concentrated with a rotary evaporator until the original volume of 10 ~ 20%; 3), separation and purification the concentrated liquid by macroporous resin; the volume concentration of 1% formic acid aqueous solution as the eluent, using methanol water solution containing 0.1% formic acid as eluent, the elution liquid; 4), the eluent is condensed into rotary evaporation of the original volume from 10 to 20%, to concentrate slurry; 5), the slurry concentration pre frozen, and then use the vacuum freeze dryer drying into powder, get beans dasheen ethanol extract.

【技术实现步骤摘要】
豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用
本专利技术涉及医药领域，具体涉及豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用。
技术介绍
豆芋(ApiosamericanaMedikus)原产于北美洲东部的加拿大至美国佛罗里达州的南部地区，属多年生豆科植物(蝶形花科亚科)。其可食用部分为地下块茎，且其蛋白质含量高于其他植物块茎，是一种既营养又有经济价值的作物，因而常被印第安人作为主食。豆芋自2009年国内引种成功，并被逐渐在富阳、金华、龙游、温州等地推广种植。研究表明豆芋不同部位(花、藤、叶、块茎)均含有丰富的游离氨基酸、可溶性蛋白、多糖、皂苷、黄酮、异黄酮、维生素C、维生素E和矿物质等成分。其中，豆芋花的维生素C含量最高，同时还含有较高含量的维生素E、总皂苷和异黄酮，具有极大的开发潜力。美国豆芋对高血压、糖尿病和高血脂症等现代生活习惯病具有明显的改善效果。随着现代社会经济的高速发展，人民的生活水平显著提高，肥胖(obesity)及其并发症的发病率和死亡率呈逐年上升的趋势，一般来说脂肪肝会伴随着肥胖发生。据世界卫生组织在2011年3月报道表明，2008年全球有超过15亿成年人处于超重水平，其中至少5亿是肥胖和脂肪肝或者。预计到2030年，美国42％的人口将存在肥胖和脂肪肝问题。将超出美国现在人口3000万。与此相关的医疗成本增加将达近5500亿美元。而在国内据2010年发表的研究报告称，中国目前肥胖和脂肪肝人口达3.25亿人，增幅超过美国、英国和澳大利亚，这个数字在未来20年还可能增加一倍。脂肪肝和肥胖引起的常见并发症有高血压、糖尿病、冠心病、脑卒中等。由此可见，肥胖和脂肪肝已成为全球普遍的健康问题，预防和治疗肥胖症、脂肪肝已经成为21世纪的首要健康问题。当前预防和治疗脂肪肝的手段主要包括：⑴控制总热能摄入量；⑵运动法；⑶手术疗法；⑷药物疗法；⑸非药物疗法：针刺疗法、耳穴贴压法、针灸疗法、指针减肥法、推拿按摩法。其中以药物治疗为主要有效的治疗手段。目前临床上应用的众多降脂药物都存有明显的心血管系统方面的副作用。迄今为止，人类还没有开发出一种十分满意的减肥降脂药品。其它减肥降脂方法也大都存在降低机体免疫力、易反弹等缺点。面对全球愈发严重的肥胖症和脂肪肝及其由引起的代谢性疾病的发病率的升高，探寻安全、有效的新的预防和治疗策略具有极其重要的意义。《美国豆芋不同部位生化特征成分分析》一文告知了：测量游离氨基酸、可溶性蛋白和总糖时：粉碎后过0.42mm筛，采用3:500(m/v)加入100℃的蒸馏水，于100℃进行恒温水浴提取。测量总皂苷、总黄酮和异黄酮含量时：采用1:100(m/v)加入无水乙醇，于60℃恒温水浴3h。测量VC时：取样品1g，用40ml0.01mol/L的HCL浸泡于60℃超声40min。测量VE时，取样品3g，用加入20ml无水乙醇，50℃恒温震荡50min。CN201210574017.9的专利技术《大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法及其用途》告知了以下内容：制备方法按以下步骤：1)采摘大越豆芋花，清洗，干燥，粉碎，过40目筛，得到大越豆芋花粉末；2)大越豆芋花粉末，按照料液比1:10～1:20，加入浓度为70％～90％乙醇，在50～80℃回流提取1～3次，每次时间1～3小时，过滤，得上清液和滤渣；3)上清液，挥干后用水溶解，石油醚脱脂，正丁醇萃取，取正丁醇部分经大孔吸附树脂吸附洗脱后，浓缩，干燥得到豆芋花皂苷粉；4)滤渣，挥干溶媒，用其重量10～20倍的蒸馏水，于70～90℃回流提取1～3次，每次时间2～3小时，过滤，收集合并滤过液；5)滤过液脱色、脱蛋白，浓缩，加入乙醇，静置过夜进行醇沉，收集沉淀，透析后，用DEAE～纤维素柱层析，分别用蒸馏水、0.1M，0.3M，0.5M～NaCl溶液洗脱液，收集0.3M～0.5M～NaCl洗脱液，透析，浓缩，干燥，得豆芋花多糖。本专利技术从大越豆芋花中同时制备得到的总皂苷和多糖，纯度高，活性强，可以在制备具有抗氧化、血糖调节作用的药物或功能食品中得到广泛应用。201310414063.7的《一种魔芋多肽提取物、制备方法及其用途》告知了以下内容：将魔芋飞粉加入纯水调节pH值至9.0进行浸提，然后经过2次酶解反应，再经超滤纯化，得魔芋多肽。该魔芋多肽能用于治疗糖尿病和糖尿病并发症，糖尿病并发症包括糖尿病并发症动脉粥样硬化、糖尿病视网膜病变、非酒精性脂肪肝和糖尿病肾病等。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用。为了解决上述技术问题，本专利技术提供豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用。即，用于制备能降低肝细胞脂质沉积的药物、保健食品。作为本专利技术的豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用的改进：豆芋花乙醇提取物的制备方法为包括以下步骤：1)、按照1g:8～12ml(较佳为1g:10ml)的料液比将豆芋花和含0.1mol/L盐酸的乙醇混合后打浆，所得浆液于45±5℃超声浸提90±10min后，提取液离心(3000g离心30min)，得上清液；2)、将上清液在旋转蒸发仪进行旋转蒸发浓缩直至为原体积的10～20％；3)、将步骤2)所得的浓缩液采用大孔树脂进行分离纯化；以体积浓度1％甲酸水溶液作为淋洗剂，以含有0.1％甲酸的甲醇水溶液作为洗脱剂，收集洗脱液；所述含有0.1％甲酸的甲醇水溶液的制备方法为：在100ml体积浓度80％甲醇水溶液中加入0.1ml的甲酸；4)、将步骤3)所得的洗脱液旋转蒸发浓缩成至为原体积的10～20％，得浆状浓缩液；5)、将步骤4)所得的浆状浓缩液先于-70～-90℃预冻5～7h，然后用真空冷冻干燥机将其干燥成粉末状，得到豆芋花乙醇提取物。作为本专利技术的豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用的进一步改进：步骤3)为：首先用两倍柱体积的甲醇活化大孔树脂，三倍柱体积的双蒸水进行平衡；然后以0.4～0.6mL/min(较佳为0.5mL/min)的流速上样(上样量为100～200ml，即约为柱体积的10～20％)，待提取液被充分吸附后，用体积浓度1％甲酸水溶液作为淋洗剂进行淋洗(淋洗的目的是为了除去蛋白质、糖、酸等物质)，所述淋洗剂的用量为两倍柱体积，流速为0.4～0.6mL/min(较佳为0.5mL/min)；最后用含有0.1％甲酸的甲醇水溶液作为洗脱剂进行洗脱，所述洗脱剂的用量三倍柱体积，流速为0.4～0.6mL/min(较佳为0.5mL/min)；收集洗脱液。作为本专利技术的豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用的进一步改进：所述步骤3)中的大孔树脂为大孔树脂X-5(天津兴南允能高分子技术有限公司)。作为本专利技术的豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用的进一步改进：将步骤1)离心所得的滤渣替代步骤1)中的豆芋花重复进行步骤1)的打浆、超声浸提和离心；重复次数为2～3；将所有离心所得的上清液合并后进行步骤2)。在本专利技术中：步骤2)和步骤4)的旋转蒸发均在38±2℃，-0.09MPa的真空度下进行。步骤5)的真空冷冻干燥为在-40±2℃，1.2Pa的真空度下进行，直至所得的豆芋花乙醇提取物含水率≤0.1％。本专利技术采用HepG2细胞(人肝癌细胞)进行实验，通过噻唑蓝(MTT)法测本文档来自技高网...

【技术保护点】
豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用。

【技术特征摘要】
1.豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用。2.根据权利要求1所述的豆芋花乙醇提取物在降低肝细胞脂质沉积中的应用，其特征是：豆芋花乙醇提取物的制备方法为包括以下步骤：1)、按照1g:8～12ml的料液比将豆芋花和含0.1mol/L盐酸的乙醇混合后打浆，所得浆液于45±5℃超声浸提90±10min后，提取液离心，得上清液；2)、将上清液在旋转蒸发仪进行旋转蒸发浓缩直至为原体积的10～20％；3)、将步骤2)所得的浓缩液采用大孔树脂进行分离纯化；以体积浓度1％甲酸水溶液作为淋洗剂，以含有0.1％甲酸的甲醇水溶液作为洗脱剂，收集洗脱液；所述含有0.1％甲酸的甲醇水溶液的制备方法为：在100ml体积浓度80％甲醇水溶液中加入0.1ml的甲酸；4)、将步骤3)所得的洗脱液旋转蒸发浓缩成至为原体积的10～20％，得浆状浓缩液；5)、将步骤4)所得的浆状浓缩液先于-70～-90℃预冻5～7h，然后用真空冷冻干燥机将其干燥成粉末状，...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓冬，楚强，郑子桓，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33