靶向Notch通路抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及新颖的式(I)的缀合物或其盐：S‑L‑A(I)，以及它们的制备方法、包含它们的药物组合物和它们作为特别是用于治疗肾病和肾组织损伤的药物的用途，其中A是γ‑分泌酶抑制剂，L是连接体，且S是肽酶特异性底物。

Targeted Notch pathway inhibitors

The present invention relates to a novel type (I) conjugates or salts thereof: S L A (I), and their preparation methods, pharmaceutical compositions containing them and their use as especially medicaments for treating kidney disease and renal tissue injury, where A is the gamma secretase inhibitor, L is the connection, and S is the specific substrate peptide enzyme.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】靶向Notch通路抑制剂本专利技术涉及式(I)的缀合物：S–L–A(I)或其药学上可接受的盐，以及它们的制备方法、包含它们的药物组合物及它们作为药物的用途，其中A是γ-分泌酶抑制剂，L是连接体，且S是肽酶特异性底物。
技术介绍
靶向治疗剂已脱颖而出，提供了改进的功效和降低的毒性。特异性靶向器官有两种可能性：第一种是通过在靶器官中特异性表达的受体，或者第二种是通过在该器官中具有更高表达或更高活性的酶。这些概念可以结合起来以更好地靶向。组织靶向是药物研究的关键主题，以便最大化期望的治疗效果，同时最小化毒副作用，即改善治疗指数。肾特异性药物靶向可为一个有吸引力的选择：·避免不必要的肾外效应；·对于器官内的靶细胞，药物的肾内输送可能不是最佳的；·一些药物在到达肾脏的作用部位之前，大部分已被灭活；·病理状况，诸如肾小球滤过、肾小管分泌的异常或者蛋白尿的发生可影响药物的正常肾分布。此外，肾脏内的细胞特异性药物靶向可以提供理解某些药物作用的机制并因此也可以操纵肾脏生理学的工具。在肾脏内，足细胞(podocyte)的损伤是许多肾脏疾病的起因，导致可能发展为终末期肾脏疾病的蛋白尿。足细胞在维持肾小球过滤屏障和肾小球结构完整性中起着关键作用。靶向于足细胞的药物具有两个重要挑战：(1)靶向正确的细胞(其中对足细胞解剖学的理解以及其与周围的细胞和结构如何相互作用是至关重要的)和(2)选择和解决正确的药理通路和哪些事件导致足细胞损伤。在导致肾小球硬化的足细胞损伤的同时，肾小管间质纤维化是急性肾损伤(AKI)的另一个标志，再次，通过减少施加不良副作用的药物的毒性和/或通过增加抗纤维化药物的肾功效，靶向于近端肾小管细胞的药物可为其治疗提供新的工具。最近，关于肾脏疾病的提高的了解已经产生了几种用于设计细胞靶向治疗剂的候选通路，其包括Notch通路。在肾脏内，肾小球或肾小管细胞的损伤是许多急性和慢性疾病的起因，导致进行性功能障碍和终末期肾脏疾病。肾小球是决定整体肾功能的主要过滤屏障。炎性和非炎性应激影响肾小球，并导致其结构的改变，从而导致其渗透性和功能的改变，并导致慢性肾脏疾病(CKD)。肾小管间质组织的损伤是急性肾损伤(AKI)的主要原因，特别是在虚弱的住院患者中。急性肾损伤(AKI)是进展至慢性肾脏疾病(CKD)的危险因素，慢性肾脏疾病是一种无有效治疗的严重临床症状，伴有包括心血管和代谢并发症的患者的高发病率。肾脏疾病可为原发的或作为多系统遗传、炎症、自身免疫、毒性或代谢病症的一部分发生。在肾脏、肾小球、肾小管间质组织或血管中三种主要结构可受到影响，导致疾病早期阶段的不同临床症状。然而，无论最初的发作如何，疾病进展将导致不可逆的肾小球硬化和肾小管间质纤维化，因此最后的终末期肾脏疾病需要透析或肾移植。目前的疗法主要是治疗原发疾病以限制CKD进展。早先的研究已发现，属于Notch通路的基因在来自患者的肾脏样本中和在肾脏疾病的动物模型中表达上调。Notch是膜插入蛋白，其活性部分朝向胞内空间。γ-分泌酶这个酶是由两个天冬氨酰蛋白酶催化亚基(早老素(presenilin)-1和-2)和三个支持亚基(Pen-2、Aph-1和呆蛋白(nicastrin))组成的大蛋白酶复合物，这些均为膜蛋白。γ-分泌酶的底物首先结合呆蛋白(nicastrin)，然后在两个早老素亚基之间转移到进行膜内水解的γ-分泌酶。γ-分泌酶复合物能够通过在膜内部位水解Notch蛋白的肽键来活化Notch，从而允许裂解的Notch细胞内结构域迁移到细胞核，在那其激活响应基因。γ-分泌酶的膜内活性也参与了涉及正常和病理过程的其他生物相关膜蛋白从膜的释放，所述其他生物相关膜蛋白包括胰岛素样生长因子或分选受体。因此，对于选择性疗法，必须仅实现对该活性的局部抑制，从而特别地保护该酶和Notch通路的其它功能。据报道，Notch通路参与肾脏中的肾脏疾病和组织损伤，因此是治疗肾脏疾病的潜在靶点。然而，由于γ-分泌酶和Notch通路对于控制包括正常细胞在内的其它细胞的功能也是重要的，因此有必要开发用于将Notch拮抗剂特异性靶向至患病肾细胞的工具。在具有条件表达活性Notch1蛋白的小鼠中进行的遗传研究显示，大量的肾小球硬化最终导致肾衰竭和动物死亡。Notch转录结合配偶体的遗传缺失以及γ-分泌酶抑制剂的治疗，因此抑制了γ-分泌酶介导的Notch活化和至细胞核的转运，保护动物免受肾病综合征。因此，Notch通路信号传导的靶向药理学抑制可以预防各种疾病中的肾损伤。Notch通路信号传导的调控主要发生在配体结合和γ-分泌酶复合物介导的裂解的水平上。然后，裂解的Notch(其包括Notch1本身)迁移到细胞核，在那其激活响应基因。γ-分泌酶抑制化合物及其制备已在例如WO2006/061136A2中描述。据报道，在其中公开了(6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-丙二酰胺衍生物可用于治疗阿尔茨海默病或常见癌症，包括但不限于宫颈癌和乳腺癌以及造血系统的恶性肿瘤。为了制备药物-载体缀合物，常用的方法是将药物共价偶联到载体上。药物和载体系统之间的键合特征极大地影响药物-载体缀合物的体内行为。缀合物需要在循环中稳定以防止游离药物的过早损失，即在载体已经在预定靶细胞中累积之前。但是在积累后，药物从载体的定量释放和母体药物的再生是理想的。在本文中，我们描述了一种新颖的治疗策略，旨在通过制备与底物偶联的γ-分泌酶抑制剂的前药以提供在受损肾脏中经特异细胞以高水平表达的特异性水解酶活性，来局部增加在肾脏中作为Notch拮抗剂的γ-分泌酶抑制剂的浓度。理想的前药将是i)在γ-分泌酶上无活性，且ii)仅在肾脏中释放以使血浆中没有母体暴露或具有极低的母体暴露，并且(例如在肝脏中)提高安全(边际)窗口。如本文中通过体外试验以及急性肾小管间质疾病的小鼠模型所证明的，抑制γ-分泌酶的有效载荷在肾脏中从前药中选择性地释放，起到对Notch通路的调节作用。我们的方法涉及γ-分泌酶抑制剂的Ac-γ-Glu前药，其靶向γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和/或肾脏中的特异性转运蛋白，以及细胞内N-酰胺酸脱酰酶(ACY1)和γ-谷氨酰环化转移酶(γ-GCT)，从而选择性控制在肾脏疾病背景下Notch通路的活化。我们可以表明，这种方法能够改善治疗剂的稳定性以及经设计的前药对患病肾脏的选择性，潜在地开辟了对于旨在控制具有急性和慢性肾脏病症的患者的Notch通路的疗法改善其治疗并减少其副作用的途径。专利技术详述除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。尽管与本文所述类似或等同的方法和材料可以用于本专利技术的实践或测试中，但是合适的方法和材料在下面描述。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献通过引用整体并入本文。本申请中使用的命名法是基于IUPAC系统命名法，除非另有说明。除非另有说明，本文结构中出现在碳、氧、硫或氮原子上的任何开放化合价均表示存在氢。术语“部分(moiety)”是指通过一个或多个化学键连接到另一个原子或分子从而形成分子的一部分的一个原子或一组化学键合的原子。例如，式(I)的变量R1、R2和R3是指通过共价键连接到式(I)的核心结构的部分。当本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种式(I)的缀合物S–L–A  (I)或其药学上可接受的盐，其中A是具有羟基部分的γ‑分泌酶抑制剂，L是可裂解的连接体，且S是肽酶特异性底物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.11 EP 15171592.71.一种式(I)的缀合物S–L–A(I)或其药学上可接受的盐，其中A是具有羟基部分的γ-分泌酶抑制剂，L是可裂解的连接体，且S是肽酶特异性底物。2.根据权利要求1所述的式(I)的缀合物，其中L是氨乙基-氨基甲酸酯连接体。3.根据权利要求1或2任一项所述的式(I)的缀合物，其中S是γ-谷氨酰转肽酶特异性底物和/或(谷氨酰)氨基肽酶A特异性底物。4.根据权利要求1至3中任一项所述的式(I)的缀合物，其中A是式(A1)的部分其中，X是-CR4R4’-或-CR4R4’-O-；R是卤素、C1-7烷基或经卤素取代的C1-7烷基；R1是氢、C1-7烷基、经卤素或羟基取代的C1-7烷基、C1-7烯基、-(CH2)m-C3-8环烷基、-(CH2)m-COR’、-(CH2)m-吗啉基、苄基或经卤素取代的苄基；R’是C1-7烷氧基、羟基或氨基；R2是氢、C1-7烷基、经卤素或羟基取代的C1-7烷基、或是苄基或C3-8环烷基；R3是C1-7烷基、经卤素取代的C1-7烷基，是苄基、经两个卤素取代的苄基，是-(CH2)m-C3-8环烷基或-(CH2)m-吡啶基；R4和R4’彼此独立地是氢、卤素、C1-7烷基、经羟基取代的C1-7烷基、C1-7烷氧基或羟基；n是0、1或2；m是0、1或2；条件是R1、R2、R4或R4’中的至少一个是羟基或经羟基取代的C1-7烷基；其中L在R1、R2、R4或R4’的羟基基团处与A结合。5.根据权利要求4所述的式(I)的缀合物，其中L在R1的羟基基团处与A结合。6.根据权利要求4或5任一项所述的式(I)的缀合物，其中X是-CH2-、-CHCH3-、-CH(CH2CH3)-、-C(CH3)2-、-C(CH3)(OH)-、-C(CH2CH3)(OH)-、-CH(OCH3)-或-C(CH3)2-O-。7.根据权利要求4至6中任一项所述的式(I)的缀合物，其中X是-C(CH3)2-、-C(CH3)(OH)-或-C(CH2CH3)(OH)-。8.根据权利要求4至7中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R是卤素。9.根据权利要求4至8中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R是氟。10.根据权利要求4至9中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R1是氢、经卤素取代的C1-7烷基或经羟基取代的C1-7烷基。11.根据权利要求4至10中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R1是经羟基取代的C1-7烷基。12.根据权利要求4至11中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R2是C1-7烷基、经羟基取代的C1-7烷基或C3-8环烷基。13.根据权利要求4至12中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R2是C1-7烷基。14.根据权利要求4至13中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R3是经卤素取代的C1-7烷基。15.根据权利要求4至14中任一项所述的式(I)的缀合物，其中R3是经3或5个氟取代的C1-7烷基。16.根据权利要求1至15中任一项所述的式(I)的缀合物，其中A是式(A2)的部分其中X、R、n、R2和R3如权利要求1-15中任一项中所述。17.根据权利要求1至16中任一项所述的式(I)的缀合物，其中A是式(A4)的部分18.根据权利要求1至16中任一项所述的式(I)的缀合物，其中部分A选自以下：N-[(6R,7S)-2-氟-9-(2-羟基-乙基)-6-甲基-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2,2-二甲基-N'-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；N-((6R,7S)-6-环丙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；N-((6R,7S)-6-环丙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(S)-N-[(6R,7S)-2-氟-9-(2-羟基-乙基)-6-甲基-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(R)-N-[(6R,7S)-2-氟-9-(2-羟基-乙基)-6-甲基-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(R或S)N-[(6R,7S)-2-氟-6-甲基-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(R或S)N-[(6R,7S)-2-氟-6-甲基-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(S)-N-[(6R,7S)-2-氟-6-甲基-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,2-三氟-乙基)-丙二酰胺；(R)-N-[(6R,7S)-2-氟-6-甲基-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(2,2,2-三氟-乙基)-丙二酰胺；(R或S)N-[(6R,7S)-2-氟-6-甲基-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(3,3,3-三氟-丙基)-丙二酰胺；(R或S)N-[(6R,7S)-2-氟-6-甲基-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-2-甲基-N'-(3,3,3-三氟-丙基)-丙二酰胺；N-[(6S,7R)-6-乙基-2-氟-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2,2-二甲基-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(R或S)-2-乙基-N-((6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-N-(2,2,2-三氟-乙基)-丙二酰胺；(S或R)-2-乙基-N-((6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-N-(2,2,2-三氟-乙基)-丙二酰胺；(R或S)-2-乙基-N-((6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(S或R)-2-乙基-N-((6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二酰胺；(R或S)-2-乙基-N-((6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-N-(3,3,3-三氟-丙基)-丙二酰胺；(S或R)-2-乙基-N-((6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-2-羟基-N-(3,3,3-三氟-丙基)-丙二酰胺；(R或S)-2-乙基-N-[(6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基]-2-羟基-N-(2,2,2-三氟-乙基)-丙二酰胺；(S或R)-2-乙基-N-[(6R,7S)-6-乙基-2-氟-8-氧代-9-(2,2,2-三氟-乙基)-6...

【专利技术属性】
技术研发人员：约翰尼斯·埃比，亚历山大·弗洛尔，吕西安娜·朱耶尔特让纳雷，德拉·戈尔谢恩，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH