一种菌藻合剂及其制备方法、应用技术

本发明专利技术公开了一种菌藻合剂及其制备方法、应用，所述菌藻合剂处于休眠状态，且为膏状，包括类球红细菌、多粘类芽孢杆菌和混合藻种。本发明专利技术实施例提供的菌藻合剂及其制备方法、应用可以减少养殖尾水氮磷富营养化对环境的污染。

【技术实现步骤摘要】
一种菌藻合剂及其制备方法、应用
本专利技术涉及微生物
，特别是一种菌藻合剂及其制备方法、应用。
技术介绍
水产养殖优良水体的首要条件就是塘水的溶氧含量，而提供水体溶解氧的贡献者就是优良的藻群，而维护这些优良藻的群生长代谢，除了光照和营养素之外，就是益生菌群。益生菌群将老藻、死藻分解为小分子营养源，再供新藻种转化吸收，使水体藻相平衡，水质稳定。因此，水产养殖领域的菌、藻发挥着及其重要的作用，为广大水产养殖者所喜爱。据统计，每年用于水产养殖各种益生菌剂交易量达到20万吨。而藻种属于植物，制造成为液体密封包装，短时期就会死亡，因此不适宜商品流通。但市场需求量数倍于益生菌剂，由于益生菌剂失活太快，无法规模化市场流通交易是水产养殖业的遗憾。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提出一种菌藻合剂及其制备方法、应用，以解决现有技术存在的问题。基于上述目的，本专利技术提供的了一种菌藻合剂，所述菌藻合剂处于休眠状态，且为膏状，包括类球红细菌、多粘类芽孢杆菌和混合藻种。在本专利技术的一些实施例中，所述混合藻种包括小球藻、卵囊藻和硅藻中的至少一种。在本专利技术的一些实施例中，所述类球红细菌的含量为1×108-10×108cfu/mL；所述多粘类芽孢杆菌的含量为1×108-10×109cfu/mL；所述混合藻种的含量为1×106-1×107个/ml。在本专利技术的一些实施例中，所述类球红细菌与多粘类芽孢杆菌的数量比为(1-5):(1-5)；所述小球藻、卵囊藻和硅藻的数量比为(1-5):(1-5):(1-5)。本专利技术还提供一种菌藻合剂的制备方法，包括以下步骤：将类球红细菌接入类球红菌种培养基中培养，得到类球红细菌；将类球红细菌接种到发酵罐中放大发酵，得到类球红细菌菌剂；将多粘类芽孢杆菌接入多粘类芽孢杆菌菌种培养基中培养，得到多粘类芽孢杆菌；将多粘类芽孢杆菌接种到发酵罐中放大发酵，得到多粘类芽孢杆菌菌剂；制备混合藻种；将类球红细菌菌剂、多粘类芽孢杆菌菌剂和混合藻种，再将混合液与黄腐酸钾混合，得到所述菌藻合剂。在本专利技术的一些实施例中，所述混合藻种包括小球藻、卵囊藻和硅藻中的至少一种。在本专利技术的一些实施例中，所述混合液与黄腐酸钾的重量比为1:(0.1-3)。在本专利技术的一些实施例中，所述类球红细菌与多粘类芽孢杆菌的数量比为(1-5):(1-5)；所述小球藻、卵囊藻和硅藻的数量比为(1-5):(1-5):(1-5)。本专利技术还提供一种菌藻合剂的应用，将所述菌藻合剂应用于水产养殖。在本专利技术的一些实施例中，将所述菌藻合剂用水稀释。本专利技术实施例提供的菌藻合剂及其制备方法、应用可以减少养殖尾水氮磷富营养化对环境的污染。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术进一步详细说明。实施例11)制备类球红菌种培养基以体积百分比计，所述菌种培养基包括：无机盐溶液10％；微量元素溶液1％；生长因子溶液1％；苹果酸溶液2％；硫酸铵溶液1％；磷酸缓冲液2％；水83％。其中，每1000mL无机盐溶液中包括：硫酸镁2克；氯化钙1克；硫酸亚铁0.15克；乙二胺四乙酸二钠0.2克；其余为水。每250mL微量元素溶液中包括：硼酸0.7克；硫酸锰0.4克；钼酸钠0.2克；硫酸锌0.06克；硫酸铜0.01克；其余为水。每250mL生长因子溶液中包括：硫胺素0.25克；烟酰胺0.25克；生物素4毫克；对氨基苯甲酸0.25克；其余为水。每1000mL苹果酸溶液中包括：苹果酸200克；其余为水。每1000mL硫酸铵溶液中包括：硫酸铵200克；其余为水。每1000mL磷酸缓冲液中包括：磷酸二氢钾40克；磷酸氢二钾60克；其余为水。2)制备类球红细菌菌剂在无菌操作台上将类球红细菌WD-2株单菌落取出，将其接入装有类球红细菌菌种培养基的三角烧瓶中，于32℃条件下光照培养，摇床转速120-150r/min，培养24小时，得到活菌含量大于3×108cfu/ml类球红细菌。然后按照10％接种量将类球红细菌菌种接种到装有发酵培养基的发酵罐中进行放大发酵，得到活菌数大于3×108cfu/mL的类球红细菌菌剂。其中，每100L发酵培养基包括乙酸钠800克；硫酸铵400克；硫酸镁10克；磷酸二氢钾30克；蛋白胨30克；磷酸氢二钾20克；氯化钠30克；氯化钙10克；对氨基苯甲酸50毫克；硫胺素10毫克；烟酰胺10毫克；硫酸锰10毫克；硫酸亚铁20毫克；硫酸铜5毫克；其余为水。3)制备多粘类芽孢杆菌菌种培养基取1000mL三角烧瓶，配制菌种培养基，包括：葡萄糖10克；尿素5克；硫酸铵1克；蛋白胨2克；氯化钙0.2克；磷酸二氢钾1克；磷酸氢二钾0.4克；硫酸镁0.5克；氯化钠1克；硫酸亚铁1.5毫克；硫酸锰2毫克；硫酸锌1毫克；硫酸铜0.5毫克；硼酸0.5毫克；钼酸钠0.2毫克；硫胺素0.5毫克；烟酰胺0.5毫克；对氨基苯甲酸10毫克；其余为水。4)制备多粘类芽孢杆菌菌剂在无菌操作台上将多粘类芽孢杆菌EBL-06株单菌落取出，将其接入装有多粘类芽孢杆菌菌种培养基的三角烧瓶中，于30-32℃条件下，摇床转速150-180r/min，培养24h，得到活菌含量大于10×108cfu/ml多粘类芽孢杆菌菌种。然后按照10％接种量将多粘类芽孢杆菌菌种接种到装有发酵培养基的发酵罐中进行放大发酵，得到活菌含量大于10×108cfu/ml多粘类芽孢杆菌菌剂。其中，每100L发酵培养基包括：葡萄糖900克；尿素500克；硫酸铵100克；蛋白胨200克；氯化钙20克；磷酸二氢钾100克；磷酸氢二钾40克；硫酸镁50克；氯化钠100克；硫酸亚铁150毫克；硫酸锰200毫克；硫酸锌100毫克；硫酸铜10毫克；硼酸50毫克；钼酸钠20毫克；硫胺素50毫克；烟酰胺50毫克；对氨基苯甲酸1克；其余为水。5)制备混合藻种营养液每100L营养液中包括：吡哆素100mg；硫胺素100mg；氯化胆碱5g；牛磺酸2g；钴胺素100mg；生物素100mg；硫酸铜10mg；氯化钴10mg；钼酸钠20mg；硼酸20mg；硫酸亚铁500mg；硫酸锌20mg；硫酸锰100mg；磷酸二氢钾25g；氯化钙10g；乙酸钠400g；硫酸镁40g；硫酸铵30g；尿素50g；碳酸氢铵40g；乙二胺四乙酸二钠5g；氯化钠300g；对氨基苯甲酸1g；其余为水。6)制备混合藻种选择小球藻、卵囊藻、硅藻的混合藻种，将小球藻、卵囊藻、硅藻的混合藻种按照20％接种量接入混合藻种营养液，于22-28℃、2000-3000Lux的光照条件下培养8-10天，得到600-700万/ml的混合藻种。其中，所述混合藻种可以从中科院武汉水生购买得到。7)制备菌藻合剂将类球红细菌菌剂、多粘类芽孢杆菌菌剂和混合藻种混合，得到混合液，再将所述混合液与黄腐酸钾按照1:1重量比例进行搅拌混匀，在几分钟内，混合液体密度增加、比重增大，得到休眠状态的菌藻合剂。其中，所述类球红细菌与多粘类芽孢杆菌的数量比为1:1；所述小球藻、卵囊藻和硅藻的数量比为1:1:1。使用时，将所述菌藻合剂用水稀释50倍以上，即可解除休眠泼洒入塘。根据专利技术人对益生藻群的研究发现，单一藻种在水体生长周期短；易老化死亡，混合藻种比单一藻种在水体生长周期长、更稳定，更适合生物多样性的水生态要求。发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种菌藻合剂，其特征在于，所述菌藻合剂处于休眠状态，且为膏状，包括类球红细菌、多粘类芽孢杆菌和混合藻种。

【技术特征摘要】
1.一种菌藻合剂，其特征在于，所述菌藻合剂处于休眠状态，且为膏状，包括类球红细菌、多粘类芽孢杆菌和混合藻种。2.根据权利要求1所述的菌藻合剂，其特征在于，所述混合藻种包括小球藻、卵囊藻和硅藻中的至少一种。3.根据权利要求2所述的菌藻合剂，其特征在于，所述类球红细菌的含量为1×108-10×108cfu/mL；所述多粘类芽孢杆菌的含量为1×108-10×109cfu/mL；所述混合藻种的含量为1×106-1×107个/ml。4.根据权利要求3所述的菌藻合剂，其特征在于，所述类球红细菌与多粘类芽孢杆菌的数量比为(1-5):(1-5)；所述小球藻、卵囊藻和硅藻的数量比为(1-5):(1-5):(1-5)。5.一种菌藻合剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将类球红细菌接入类球红菌种培养基中培养，得到类球红细菌；将类球红细菌接种到发酵罐中放大发酵，得到类球红细菌菌剂；将多粘类芽孢杆菌接...

【专利技术属性】
技术研发人员：王栋，
申请(专利权)人：王栋，
类型：发明
国别省市：山东,37