一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法技术

一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，步骤：将磷脂原料与萃取剂萃取，控制萃取温度和萃取时间，经过滤，得到萃取液；将得到的萃取液经氧化铝层析柱吸附纯化，控制氧化铝层析柱中的氧化铝的目数、控制氧化铝与磷脂原料的重量比以及控制吸附过程中的萃取液的流速，得到纯化液，纯化液经浓缩，得到浓缩物；由有机溶剂将得到的浓缩物溶解并且控制有机溶剂与磷脂原料的重量比，再依次经水洗液水洗、静置分层，得到有机相，有机相依次经浓缩和冷冻干燥，得到高纯度磷脂酰胆碱成品。产品纯度高，PI含量低，PE基本不溶，步骤简单，连续化操作、所需设备简单、成本低，容易实现工业化大批量生产；满足高纯度磷脂酰胆碱的要求。

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法
本专利技术属于磷脂酰胆碱分离
，具体涉及一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法。
技术介绍
磷脂酰胆碱是磷脂中起重要营养保健作用并且具有优异的生物学活性的主要成分，不仅能为人体生长发育提供必需的磷元素,而且还是胆碱和必需脂肪酸的主要来源,而胆碱对于人脑的发育形成和维持脑正常功能起着不可或缺的重要作用。由于胆碱含有亲水的磷脂基团和亲油的脂肪酸基团，是典型的两性化合物，因而有着良好的乳化功能。磷脂酰胆碱也是一类重要的药物，不仅可以预防脂肪肝，而且还能促进肝细胞再生，同时磷脂酰胆碱对心脏健康也有积极的作用，它能调节胆固醇在人体内的含量、有效降低胆固醇、高血脂及冠心病的发病率。由于磷脂酰胆碱具有前述突出的生理活性，因而得以作为功能性的食品添加剂或功能食品因子而被广泛应用于食品加工领域，主要作为乳化剂和抗氧化剂等。另外，磷脂酰胆碱作为一类新型保健食品越来越受青睐。磷脂酰胆碱主要来源于大豆或蛋黄，从大豆或蛋黄中提取得到的是磷脂混合物，如极性脂和非极性脂，极性脂如磷脂和糖脂，非极性脂如甘油三脂和游离脂肪酸。其中，前述的磷脂又有各种同系物如脂磷酰乙醇胺PE、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱，这些物质结构相似分离难度大。目前从磷脂混合物（也称“混合磷脂”）中提取磷脂酰胆碱的方法主要包括浸取法、萃取法、超临界流体萃取法、吸附法和膜分离法等。就前述的浸取法和萃取法而言，典型的文献报道如中国专利ZL02144835.3公开了以浓缩大豆磷脂为原料，以乙醇、丙酮为浸取剂，结合沉淀、离心等工艺制备磷脂酰胆碱的方法，但磷脂酰胆碱的含量只有50%。中国专利ZL200510026994.5公开了以乙醇为溶剂高剪切浸取制备磷脂酰胆碱的工艺，磷脂酰胆碱含量仅为55%，同时单釜萃取的操作方式磷脂酰胆碱收率很低。美国专利US4714571A4、US5084215A和US4814111A公开了采用乙腈为溶剂萃取磷脂酰胆碱的方法，获得较高纯度的磷脂酰胆碱，但萃取溶剂乙腈高温下易产生剧毒的杂质。中国专利ZL02121550.2和ZL02149601.3公开了一种采用乙腈和甲醇、乙醇等一元低碳醇的混合溶剂对磷脂原料进行多级逆流浸取制备磷脂酰胆碱的方法，磷脂酰胆碱的含量为80%左右，该方法所得产品纯度和品质仍然较低，而且逆流萃取技术存在产品纯度和收率难以兼顾的不足。国内外尚有其他大量关于有机溶剂萃取方法的报道，但大都均为釜式萃取或逆流萃取，萃取纯度较低，无法满足注射剂要求，萃取剂通常为乙腈或一元醇，萃取选择性低、收率低，物料损耗严重。就前述的超临界流体萃取法而言，公开文献如中国专利ZL200310123488.9和CN200810017149.5采用超临界CO2提取磷脂酰胆碱的方法，中国专利ZL200710067279.5将乙醇提取和超临界CO2萃取结合的方法，磷脂酰胆碱纯度为70%。超临界流体萃取法采用超临界CO2为萃取剂，过程绿色污染，但存在一次性设备投资大的不足，同时该方法通常为釜式操作，产品收率低，且纯度不高。就前述的吸附法和膜分离法而言，公开文献如中国专利ZL02147754.X和ZL201110054014.8利用吸附法得到含量为80%的大豆磷脂酰胆碱产品。中国专利ZL200710052284.9利用乙醇浸取和柱层析相结合的磷脂酰胆碱纯化方法，纯度可达90%以上。中国专利CN201210468185.X采用乙醇浸取和模拟移动床色谱制备高纯度卵磷脂的方法。中国专利ZL201010105688.1采用膜分离与柱层析相结合分离磷脂酰胆碱的方法，得到纯度为95%以上的磷脂酰胆碱产品。中国专利ZL200510086600.5利用无机陶瓷膜分离制备食品级大豆卵磷脂的方法。
技术实现思路
本专利技术的任务在于提供一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，该方法有助于显著提高磷脂酰胆碱的纯度并且该方法的工艺步骤简单、无需复杂的设备、制备成本低廉能满足工业化放大生产要求。本专利技术的任务是这样来完成的，一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，包括以下步骤：A)制备萃取液，将磷脂原料与萃取剂萃取，并且控制萃取温度和萃取时间，经过滤，得到萃取液；B)制备浓缩物，将由步骤A）中得到的萃取液经氧化铝层析柱吸附纯化，并且控制氧化铝层析柱中的氧化铝的目数、控制所述氧化铝与步骤A）中所述的磷脂原料的重量比以及控制吸附过程中的萃取液的流速，得到纯化液，纯化液经浓缩，得到浓缩物；C)制备成品，由有机溶剂将步骤B）得到的浓缩物溶解并且控制有机溶剂与步骤A）中所述的磷脂原料的重量比，再依次经水洗液水洗、静置分层，得到有机相，有机相依次经浓缩和冷冻干燥，得到高纯度磷脂酰胆碱成品。在本专利技术的一个具体的实施例中，步骤A)中所述的磷脂原料与所述萃取剂的重量比为1∶5-10，所述磷脂酰胆碱在磷脂原料中的质量%含量为15-75%。在本专利技术的另一个具体的实施例中，所述的萃取剂为正丁醇与水组成的二元混合溶剂、仲丁醇与水组成的二元混合溶剂、异丙醇与水组成的二元混合溶剂或正丙醇与水组成的二元混合溶剂，在所述二元混合溶剂中，所述的水的质量%含量为3-10%。在本专利技术的又一个具体的实施例中，步骤A）中所述的控制萃取温度和萃取时间是将萃取温度控制为5-25℃，将萃取时间控制为3-6h。在本专利技术的再一个具体的实施例中，步骤B）中所述的控制氧化铝层析柱中的氧化铝的目数是将氧化铝的目数控制为80-200目；所述的控制氧化铝与步骤A）中所述磷脂原料的重量比是将氧化铝与磷脂原料的重量比控制为1∶1-5。在本专利技术的还有一个具体的实施例中，步骤B）中所述的控制吸附过程中的萃取液的流速是将流速控制为所述氧化铝层析柱体积的0.5-4倍/h。在本专利技术的更而一个具体的实施例中，步骤B）中所述的浓缩为减压浓缩，减压压力为－0.06～－0.095MPa并且温度小于45℃。在本专利技术的进而一个具体的实施例中，步骤C)所述的控制有机溶剂与步骤A）中所述的磷脂原料的重量比是将有机溶剂与磷脂原料的重量比控制为0.5-2∶1；所述的水洗液为水与有机溶剂的混合物，并且水与有机溶剂的重量比为0.1-1∶1。在本专利技术的又更而一个具体的实施例中，所述的有机溶剂为非极性有机溶剂。在本专利技术的又进而一个具体的实施例中，所述的非极性有机溶剂为正己烷、正庚烷、氯仿、二氯甲烷或石油醚。本专利技术提供的技术方案具有如下有益效果：其一，由于由二元混合溶剂对磷脂原料萃取、氧化铝层析柱吸附纯化、有机溶剂对浓缩物溶解，再经水洗、静置分层和冷冻干燥因而工艺路线简单，易于工业化，并且为连续操作模式，可稳定地获得高纯度的磷脂酰胆碱产品，同时采用本专利技术方法得到的磷脂酰胆碱的纯度可达到96.0-99.5%，且有限量要求的杂质含量低（LPC含量低于0.5%，水含量低于2%，磷脂酰乙醇胺等磷脂同系物的杂质含量低于0.5%，过氧化值低于3.0，为淡黄色或近白色腊状固体）；其二，由于二元混合溶剂对混合磷脂中含有的磷脂酰胆碱具有较高的选择性分离能力，显著优于已有技术中以乙醇作为萃取溶剂，因而不仅产品纯度高，PI含量低，PE基本不溶等优点，而且操作步骤简单，连续化操作、所需设备简单、成本低，容易实现工业化大批量生产；其三，由于采用有机溶剂对浓缩物溶解并进行水洗，因而能有效控制溶血型磷脂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A)制备萃取液，将磷脂原料与萃取剂萃取，并且控制萃取温度和萃取时间，经过滤，得到萃取液；B)制备浓缩物，将由步骤A）中得到的萃取液经氧化铝层析柱吸附纯化，并且控制氧化铝层析柱中的氧化铝的目数、控制所述氧化铝与步骤A）中所述的磷脂原料的重量比以及控制吸附过程中的萃取液的流速，得到纯化液，纯化液经浓缩，得到浓缩物；C)制备成品，由有机溶剂将步骤B）得到的浓缩物溶解并且控制有机溶剂与步骤A）中所述的磷脂原料的重量比，再依次经水洗液水洗、静置分层，得到有机相，有机相依次经浓缩和冷冻干燥，得到高纯度磷脂酰胆碱成品。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A)制备萃取液，将磷脂原料与萃取剂萃取，并且控制萃取温度和萃取时间，经过滤，得到萃取液；B)制备浓缩物，将由步骤A）中得到的萃取液经氧化铝层析柱吸附纯化，并且控制氧化铝层析柱中的氧化铝的目数、控制所述氧化铝与步骤A）中所述的磷脂原料的重量比以及控制吸附过程中的萃取液的流速，得到纯化液，纯化液经浓缩，得到浓缩物；C)制备成品，由有机溶剂将步骤B）得到的浓缩物溶解并且控制有机溶剂与步骤A）中所述的磷脂原料的重量比，再依次经水洗液水洗、静置分层，得到有机相，有机相依次经浓缩和冷冻干燥，得到高纯度磷脂酰胆碱成品。2.根据权利要求1所述的高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于步骤A)中所述的磷脂原料与所述萃取剂的重量比为1∶5-10，所述磷脂酰胆碱在磷脂原料中的质量%含量为15-75%。3.根据权利要求1或2所述的高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于所述的萃取剂为正丁醇与水组成的二元混合溶剂、仲丁醇与水组成的二元混合溶剂、异丙醇与水组成的二元混合溶剂或正丙醇与水组成的二元混合溶剂，在所述二元混合溶剂中，所述的水的质量%含量为3-10%。4.根据权利要求1所述的高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于步骤A）中所述的控制萃取温度...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁建飞，浦佳春，陶柯，殷岳新，
申请(专利权)人：苏州富士莱医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32