一种枸杞糖肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种枸杞糖肽及其制备方法和应用。所述枸杞糖肽的分子量分布为1000-10000Da部分占50-85％，蛋白质含量为20-35％，中性多糖含量为20-35％，糖醛酸含量为5-20％。本发明专利技术的制备方法以升温絮凝的方法去除部分不溶杂质，代替了传统提取方法中大量使用乙醇沉淀的步骤，提高了生产安全性，避免了回收乙醇的生产步骤，降低了生产成本，并且所得枸杞糖肽活性未发生改变，具有较好的生产推广前景。

Lycium barbarum glycopeptide and preparation method and application thereof

The invention discloses a medlar glycopeptide and a preparation method and an application thereof. The molecular weight distribution of the wolfberry glycopeptide is 1000-10000Da, the part is 50-85%, the protein content is 20-35%, the content of the neutral polysaccharide is 20-35%, and the content of uronic acid is 5-20%. The preparation method of the invention to the heating flocculation method of removing a portion of insoluble impurities, instead of the traditional extraction method widely used in ethanol precipitation process, improve production safety, avoid production steps of ethanol recovery, reduce production costs, and the activity of Fructus Lycii Glucopeptide did not change, has a good prospect of production.

【技术实现步骤摘要】
一种枸杞糖肽及其制备方法和应用
本专利技术涉及医药科技领域，具体地，涉及一种枸杞糖肽及其制备方法和在制备免疫增强药物或保健品中的应用。
技术介绍
枸杞是茄科枸杞属植物枸杞的成熟果实，具有多种保健功效，是卫生部批准的药食两用食物。枸杞的主要活性成分是枸杞糖肽。它是一种水溶性糖蛋白，现在已有很多研究表明枸杞糖肽具有促进免疫、抗衰老、抗肿瘤、清除自由基、抗疲劳、抗辐射、保肝、生殖功能保护和改善等作用。传统的枸杞糖肽的提取方法多采用高温煮提，而且文献多以sevage法脱蛋白，所以枸杞中存在的糖肽类成分被破坏，因此较少见诸报道。在ZL98111644.2中，袁晓振等报道了“枸杞糖肽及其生产工艺”,生产工艺包括浸泡提取、醇沉收集沉淀等步骤。醇沉提取多糖是一个较为常用的方法，但是乙醇在生产中存在防爆和溶剂回收的问题，因此如果能有新的简便环保的提取生产方法来取代醇沉操作具有很大应用前景。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种新的简便环保的枸杞糖肽提取生产方法来取代醇沉操作。本专利技术的另一个目的是提供一种具有优异的药理活性的枸杞糖肽产品。本专利技术的第一方面，提供了一种枸杞糖肽的制备方法，所述方法包括以下步骤：(a).枸杞果实加水浸泡，离心去除沉淀，得到第一提取液；(b).将第一提取液升温，提取液中不溶物团聚成沉淀，离心去除絮状沉淀，得到第二提取液；(c).将第二提取液通过超滤膜分离，取截留溶液，并浓缩干燥，从而得到枸杞糖肽。在另一优选例中，所述枸杞果实包括枸杞干果和枸杞鲜果。在另一优选例中，枸杞果实浸泡前进行粉碎。在另一优选例中，在步骤(a)中，使用去离子水浸泡。在另一优选例中，所述第一提取液为浑浊的水提液。在另一优选例中，所述第二提取液为澄清溶液。在另一优选例中，所述第二提取液透光率大于60％。在另一优选例中，在步骤(c)中，干燥方法包括冷冻干燥和喷雾干燥。在另一优选例中，在步骤(c)中，用超滤膜分离时，不断向截留溶液中补入去离子水，当截留溶液的电导率降至1000us/cm以下，糖度降至1.2以下，收集截留溶液并浓缩干燥。在另一优选例中，在步骤(a)中，枸杞果实与加水量的质量比为1：1-15，浸泡温度为10-35℃，浸泡时间为2-10小时。在另一优选例中，枸杞干果与加水量的质量比为1：5～15。在另一优选例中，枸杞鲜果与加水量的质量比为1：1～3。在另一优选例中，在步骤(a)中，离心速度为1000-4000rpm，离心时间为10秒至1分钟。在另一优选例中，在步骤(b)中，将第一提取液升温至45-70℃，保持时间为0.5-5小时。在另一优选例中，在步骤(b)中，离心速度为6000-16000rpm，离心时间为5秒至5分钟。在另一优选例中，在步骤(c)中，超滤膜的截留分子量范围为1000-2000Da。本专利技术的第二方面，提供了一种枸杞糖肽，所述枸杞糖肽的分子量分布为1000-10000Da部分占50-85％；且所述枸杞糖肽中，蛋白质含量为20-35％，中性多糖含量为20-35％，糖醛酸含量为5-20％。在另一优选例中，所述枸杞糖肽是由权利要求1-6任一项所述的方法制备。本专利技术的第三方面，提供了一种如本专利技术第二方面所述的枸杞糖肽的用途，其特征在于，用于制备免疫增强药物或保健品。本专利技术的第四方面，提供了一种枸杞糖肽制品，所述枸杞糖肽制品含有如本专利技术第二方面所述的枸杞糖肽。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明附图1为实施例1制备的枸杞糖肽HPLC紫外图谱。附图2为实施例1制备的枸杞糖肽HPLC示差折光图谱。附图3为实施例2制备的枸杞糖肽HPLC紫外图谱。附图4为实施例2制备的枸杞糖肽HPLC示差折光图谱。附图5为实施例3制备的枸杞糖肽HPLC紫外图谱。附图6为实施例3制备的枸杞糖肽HPLC示差折光图谱。附图7为实施例4制备的枸杞糖肽HPLC紫外图谱。附图8为实施例4制备的枸杞糖肽HPLC示差折光图谱。附图9为实施例5制备的枸杞糖肽HPLC紫外图谱。附图10为实施例5制备的枸杞糖肽HPLC示差折光图谱。附图11为实施例6制备的枸杞糖肽HPLC紫外图谱。附图12为实施例6制备的枸杞糖肽HPLC示差折光图谱。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。具体实施方式本专利技术人经过长期广泛而深入的研究，通过大量筛选和测试，首次发现了一种提取分离枸杞糖肽的方法，该法在传统水提取方法的基础上，以升温法促成不溶物自身絮凝从而离心去除部分杂质，这样避免了大量使用乙醇带来的安全隐患和巨大的溶剂回收、环境污染等问题，大幅降低了生产成本，极大提高了生产安全性，提高了分子量1000-10000Da这部分的糖肽组分的占比，可提高最终糖肽产品的收率，而且获得的枸杞糖肽产品活性未发生改变。在此基础上完成了本专利技术。本专利技术的主要优点包括：1.本专利技术的生产方法以升温法促成不溶物自身絮凝从而离心去除部分杂质，这样避免了大量使用乙醇或其他有机溶剂带来的安全隐患和巨大的溶剂回收、环境污染等问题，大幅降低了生产成本，极大提高了生产安全性；2.本专利技术的生产方法提高了分子量1000-10000Da这部分的糖肽组分的占比，可提高最终糖肽产品的收率，而且获得的枸杞糖肽产品活性未发生改变，因此具有较好的市场推广和应用前景。下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。实施例1100g枸杞干果粉碎后加入15倍质量比的去离子水浸泡，浸泡温度10℃，浸泡时间10小时。浸泡液置于CR22G离心机中以1000rpm转速度离心1分钟，离心获得的上清液仍浑浊。将上清液置于水浴中升温至40℃并保持5小时，在上清液中残存的果肉果胶聚合成絮状沉淀，将此料液再置于CR22G离心机中以16000rpm转速度离心5秒钟，得到澄清溶液，透光率为83％。将所得澄清溶液置于超滤装置中超滤，超滤膜截留分子量1000Da，工作压力5公斤，不断向截留溶液中补入去离子水，当截留溶液的电导率降至500us/cm,糖度降至0.7，收集超滤膜截留的大分子部分的溶液，浓缩，冷冻干燥，获得枸杞糖肽0.85g。获得的枸杞糖肽经HPLC测定其中分子量1000-10000Da的部分占80％，凯氏定氮法测得蛋白含量35％，蒽酮硫酸法测得中性多糖含量20％，咔唑法测得糖醛酸含量20％，其HPLC图谱如附图1、2所示。实施例2100g枸杞干果粉碎加入10倍质量比的去离子水浸泡，浸泡温度20℃，浸泡时间5小时。浸泡液置于CR22G离心机中以4000rpm转速度离心10秒钟，离心获得的上清液仍浑浊。将上清液置于水浴中升温至60℃并保持2小时，上清液中残存的果肉果胶聚合成絮状沉淀，将此料液再置于CR22G离心机中以13000rpm速度离心5分钟，得到澄清溶液，透光率为78％。将所得澄本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种枸杞糖肽的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(a).枸杞果实加水浸泡，离心去除沉淀，得到第一提取液；(b).将第一提取液升温，提取液中不溶物团聚成沉淀，离心去除絮状沉淀，得到第二提取液；(c).将第二提取液通过超滤膜分离，取截留溶液，并浓缩干燥，从而得到枸杞糖肽。

【技术特征摘要】
1.一种枸杞糖肽的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(a).枸杞果实加水浸泡，离心去除沉淀，得到第一提取液；(b).将第一提取液升温，提取液中不溶物团聚成沉淀，离心去除絮状沉淀，得到第二提取液；(c).将第二提取液通过超滤膜分离，取截留溶液，并浓缩干燥，从而得到枸杞糖肽。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(a)中，枸杞果实与加水量的质量比为1：1-15，浸泡温度为10-35℃，浸泡时间为2-10小时。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(a)中，离心速度为1000-4000rpm，离心时间为10秒至1分钟。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(b)中，将第一提取液升温至45-70℃，保持时间为0.5-5小时。5...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕龙，江艳，项玉华，丁志刚，韩建林，智通卫，
申请(专利权)人：中国科学院上海有机化学研究所，
类型：发明
国别省市：上海,31