一种高纯度EGCG的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高纯度EGCG的制备方法，将茶多酚原料用乙醇溶解，得茶多酚溶液；再通过装填非极性大孔吸附树脂的层析柱，先用纯水洗脱预处理后，再用乙醇洗脱，收集洗脱液并浓缩，得浓缩洗脱液；最后通过三组分模拟移动床分离提纯，分离纯化后的EGCG通过低温真空减压浓缩的方式结晶，即得高纯度EGCG产品。本发明专利技术方法基于三组分模拟移动床分离技术，以价格低廉的非极性大孔吸附树脂为分离载体，可以实现EGCG和其他化合物的连续高效分离；分离得到的EGCG纯度达95%以上，得率为80%以上，结晶后产品纯度为99%以上，回收率为95%以上。

Method for preparing high purity EGCG

The invention discloses a preparation method of high purity EGCG, tea polyphenols raw materials dissolved in alcohol, tea polyphenol solution; and then through the column filled with nonpolar macroporous resin, eluting first with water after pretreatment with ethanol, eluent was collected and concentrated, concentrated eluate; finally, the three component simulated moving bed separation and purification, EGCG purified by low-temperature vacuum concentration of crystallization, namely high purity EGCG products. The three component simulated moving bed separation technique based on the method of the invention, the low price of non polar macroporous adsorption resin for the separation of the carrier, continuous and efficient separation can be achieved in EGCG and other compounds; isolated EGCG purity was more than 95%, the yield is above 80%, the crystallization product purity was more than 99%, recovery the rate is above 95%.

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度EGCG的制备方法
本专利技术属于天然产物提纯
，具体是一种高纯度EGCG的制备方法。
技术介绍
茶多酚（teapolyenohs）主要由儿茶素、黄酮、酚酸、花色素4大类物质组成。而儿茶素（catechins）占茶多酚总量的60%～80%。现代研究表明，儿茶素既是理想的天然抗氧化剂，又是一类极有价值的天然药物原料，它具有抗肿瘤、降血压、降血脂、抗氧化、抗衰老以及抑菌、抗艾滋病病毒等功效。茶多酚中儿茶素类单体化合物主要有表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）和表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）等，其中最具生物活性的是EGCG。近年来，世界发达国家积极推进儿茶素产品的开发应用，以其作为天然抗氧化剂和自由基清除剂，已广泛应用于食品加工、医药保健和日用化工等领域，尤其是FDA确认儿茶素具有药效功能后，国际市场对其需求量日增。研究各种儿茶素的药理活性和协同作用以及其在体内的代谢情况，开发儿茶素类新药，均需大量高纯度的各类儿茶素单体。尤其是酯型儿茶素EGCG，其功效远远大于其他儿茶素组分，成为儿茶素分离纯化与临床应用研究的焦点。EGCG纯品为白色粉末，味苦涩、无毒、极易溶于水，能溶于甲醇、乙醇、乙腈和乙酸乙酯，不溶于氯仿，在空气中易被氧化，变成微粉色，也容易随着温度的升高而被氧化。EGCG的提纯制备，主要是采用色谱法或色谱联用的方法。其中高效液相色谱法（HPLC）操作简便易行，分离效果好，如果选择合适的柱操作条件，儿茶素粗品可以不经过预处理就能得到较好的分离。但该法成本较高，且分离量小，难以进行工业化生产。高速逆流色谱法（HSCCC）尽管较HPLC法增大了制备量，但仍难满足工业化生产的要求。临界流体萃取法（SFE）用于制备EGCG。该方法无污染，分离量大，利于工业化。但是由于茶多酚在超临界CO2中溶解度较低，使得分离的产率很低。中国专利201410562697.1，200910273058.2公开了采用单柱色谱分离法来分离纯化EGCG，虽然单柱处理量大，但不能达到连续分离的目的，操作繁琐。且所使用的分离树脂均是反相硅胶C18，其价格昂贵，用乙醇洗脱死吸附大，树脂报废率高，不适用于工业化生产。此外，专利201410766716.2使用氢键型大孔吸附树脂作为分离树脂，其所选用的树脂具有吸附率高，解吸率低或者吸附率低，解吸率高的特点，用来制备EGCG树脂容易中毒、产品得率低。专利201110171485.7使用二组分模拟移动床分离纯化EGCG,由于EGCG为中间洗脱组分，前后均有其他组分的干扰，使用二组分模拟移动床必须分两步进行分离，该专利所使用的模拟移动床为小试级别且使用的分离树脂为反相硅胶C18，成本高，树脂报废率高，且所采用的浓缩方式为的旋转蒸发，浓缩效率差，低温不容易浓缩，长时间浓缩容易造成EGCG氧化；高温浓缩时间短，但EGCG更容易被氧化。因此，该工艺不适用于工业化生产。此外，吸附树脂均存在不同程度的死吸附，解吸率达不到100%，且经过两次分离前后组分均会带出部分EGCG，因此，EGCG的回收率较低。
技术实现思路
本专利技术针对现有EGCG分离制备存在的问题，提供一种以茶多酚为原料，基于三组分模拟移动床色谱分离技术，以非极性大孔吸附树脂为分离载体，实现EGCG的高效分离纯化。本方法分离得到的EGCG纯度95%以上，得率80%以上，结晶后产品纯度99%以上，回收率95%以上。为了实现以上目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种高纯度EGCG的制备方法，包括以下步骤：（1）将茶多酚原料用乙醇溶解至干物质含量为5-35%，得茶多酚溶液；（2）将茶多酚溶液通过装填非极性大孔吸附树脂的层析柱，先用纯水洗脱预处理后，再用乙醇洗脱，收集洗脱液并浓缩至干物质含量为10-40%，得浓缩洗脱液；（3）将浓缩洗脱液通过三组分模拟移动床分离提纯，分离纯化后的EGCG通过低温真空减压浓缩的方式结晶，即得高纯度EGCG产品。进一步地，以上步骤（1）所述的乙醇质量浓度为10%。进一步地，所述非极性大孔吸附树脂型号包括HZ-816、HZ-818、HZ-835、色谱3号和20SS中的一种。进一步地，步骤（2）所述的乙醇质量浓度为20-50%。进一步地，所述的三组分模拟移动床为10-25根色谱柱首尾顺序相连，内部填充非极性大孔吸附树脂，通过中央控制装置控制进洗脱剂端口、进料液端口、前杂出口端、EGCG出口端和后杂出口端五个端口的流量，实现三组分的分离。进一步地，所述的中央控制装置为计算机、PLC程序控制泵、电磁阀、流量计。进一步地，所述三组分模拟移动床分离提纯是在40-50℃柱温条件下连续进料和出料。进一步地，所述低温真空减压浓缩时在温度为20-40℃、压力为-0.098MPa下减压浓缩。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：1、本专利技术方法基于三组分模拟移动床分离技术，以价格低廉的非极性大孔吸附树脂为分离载体，可以实现EGCG和其他化合物的连续高效分离；分离得到的EGCG纯度95%以上，得率80%以上，结晶后产品纯度99%以上，回收率95%以上。2、本专利技术使用的三组分模拟移动床，使得EGCG含量由30-60%提高到95-99%，相比二组分模拟移动床具有能够一次性实现EGCG的连续有效分离，分离效率高，产品得率高，纯度高的优点。3、本专利技术所使用的非极性大孔吸附树脂，其吸附率、解吸率均在90%以上，样品回收率高，且具有价格低廉、可反复使用的特点。4、本专利技术使用低温真空减压浓缩方式结晶，避免了EGCG在浓缩过程中因高温而被氧化，保证成品品质。5、本专利技术方法工艺简单、无污染，杂质少，绿色环保、成本低廉、生产效率高、生产过程技术指标可控性强，容易实现工业化生产。附图说明图1是茶多酚原料经层析柱预处理后的各组分含量液相图；图2是三组分模拟移动床分离后前杂出口端各组分液相图；图3为三组分模拟移动床分离后EGCG出口端各组分液相图；图4是三组分模拟移动床分离后后杂出口端各组分液相图。具体实施方式下面将结合具体实施例对本专利技术进一步详细说明，但不限于本专利技术的保护范围。实施例1一种高纯度EGCG的制备方法，包括以下步骤：（1）以以市售茶多酚（EGCG含量为29.93%）为原料，用质量浓度为10%乙醇溶解至干物质含量为10%，得茶多酚溶液；（2）将茶多酚溶液通过装填HZ-818非极性大孔吸附树脂的层析柱，先用纯水洗脱预处理后，再用浓度为30%的乙醇洗脱，收集洗脱液并浓缩至干物质含量为40%，得浓缩洗脱液；（3）将浓缩洗脱液通过三组分模拟移动床分离，由15根色谱柱首尾顺序相连，以HZ-818大孔吸附树脂为分离载体，通过中央控制装置、计算机、PLC程序控制流量泵、流量计、电磁阀的切换来选择控制进洗脱剂端口、进料液端口、前杂出口端、EGCG出口端和后杂出口端五个端口的流量，在40℃柱温条件下连续分离，分离后得到的EGCG纯度为95.58%（见图3），得率为80.23%。分离纯化后的EGCG在温度为25℃、压力为-0.098MPa下低温真空减压浓缩的方式结晶，即得高纯度EGCG产品。结晶后产品纯度为99.32%，回收率为95.21%。图1为本实施例茶多酚原料经层析柱预处理后的各组分含量液相图本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度EGCG的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将茶多酚原料用乙醇溶解至干物质含量为5‑35%，得茶多酚溶液；（2）将茶多酚溶液通过装填非极性大孔吸附树脂的层析柱，先用纯水洗脱预处理后，再用乙醇洗脱，收集洗脱液并浓缩至干物质含量为10‑40%，得浓缩洗脱液；（3）将浓缩洗脱液通过三组分模拟移动床分离提纯，分离纯化后的EGCG通过低温真空减压浓缩的方式结晶，即得高纯度EGCG产品。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度EGCG的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将茶多酚原料用乙醇溶解至干物质含量为5-35%，得茶多酚溶液；（2）将茶多酚溶液通过装填非极性大孔吸附树脂的层析柱，先用纯水洗脱预处理后，再用乙醇洗脱，收集洗脱液并浓缩至干物质含量为10-40%，得浓缩洗脱液；（3）将浓缩洗脱液通过三组分模拟移动床分离提纯，分离纯化后的EGCG通过低温真空减压浓缩的方式结晶，即得高纯度EGCG产品。2.根据权利要求1所述高纯度EGCG的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述的乙醇质量浓度为10%。3.根据权利要求1所述高纯度EGCG的制备方法，其特征在于：所述非极性大孔吸附树脂型号包括HZ-816、HZ-818、HZ-835、色谱3号和20SS中的一种。4.根据权利要求1所述高纯度EGCG的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹敏，雷光鸿，王元春，黄忠华，盘柳萍，
申请(专利权)人：广西轻工业科学技术研究院，
类型：发明
国别省市：广西,45