The invention provides a method for determining the formation time of maize pollen tube pathway method, the method including bagging, open pollination, bract, bract and silk, remove restore original, every 1 removal of a filament for 3 hours, and make record of temperature and humidity, the harvest back ear, grain number and statistics according to the time, removal of filaments and the average grain number, determine the formation time of maize pollen tube. The method was carried out in the field, most close to the actual planting, the reliability is high; the steps of the method are simple, easy to master and technical personnel in the field operation; the feasibility of this method is high, good repeatability, and can be used in different materials; in addition, the method of the invention of operating conditions low cost.
【技术实现步骤摘要】
一种确定玉米花粉管通道形成时间的方法
本专利技术属于农业
,特别涉及一种确定玉米花粉管通道形成时间的方法。
技术介绍
花粉管通道法自我国科学家周光宇于1983年创立以来,因其无需组织培养和植株再生,且具有技术简单、易于掌握和对设备要求低等特点,在玉米转基因育种中得到了广泛应用。该方法的原理是授粉萌发形成的花粉管通道可将生殖细胞的DNA及外源DNA输入卵细胞并最终转化成合子或早期胚胎细胞。可见,花粉管通道只有完全打通,才能将携带的精子输送到卵细胞中完成受精并最终结实,因此,利用花粉管通道法的关键在于确定玉米花粉管通道在花丝中形成和打通的时间段。玉米雌穗从开始结实到结实稳定需要经历从中部、下部、顶部的一个过程,说明花粉管通道在此过程中形成和打通的数量也在逐渐上升,所以通过结实可以断定通道形成、打通、关闭的时段,花粉管通道法只有在完全打通且数量入高峰的时段进行外源DNA导入,转化效率才最高。目前利用花粉管通道法进行玉米转基因育种研究中,转化时间集中在8-30小时之间,时间跨度较大,而且材料间、年度间气象条件也有差异,这便造成了花粉管通道法转化效率不高、结果重复性差、不利于不同材料间参考等缺点。
技术实现思路
为解决上述问题,本专利技术提供了一种确定玉米花粉管通道形成时间的方法,通过所述方法能够了解不同材料间花粉管通道形成时间的规律,即使在客观条件改变的情况下,只要根据每个材料的通道形成规律做相应的调整即可。通过以下技术方案实现上述目的:一种确定玉米花粉管通道形成时间的方法,所述方法包括套袋、授粉、切开苞叶、去除花丝、恢复苞叶至原状,每隔1-3小时去除一次花丝, ...
【技术保护点】
一种确定玉米花粉管通道形成时间的方法,其特征在于,所述方法包括套袋、授粉、切开苞叶、去除花丝、恢复苞叶至原状,每隔1‑3小时去除一次花丝,并时时记录温湿度,收获时取回雌穗,并统计结实粒数,根据去除花丝的时间及平均结实粒数,确定玉米花粉管通道形成的时间。
【技术特征摘要】
1.一种确定玉米花粉管通道形成时间的方法,其特征在于,所述方法包括套袋、授粉、切开苞叶、去除花丝、恢复苞叶至原状,每隔1-3小时去除一次花丝,并时时记录温湿度,收获时取回雌穗,并统计结实粒数,根据去除花丝的时间及平均结实粒数,确定玉米花粉管通道形成的时间。2.根据权利要求1所述的确定玉米花粉管通道形成时间的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1)套袋:在花丝未露出苞叶时进行套袋;2)授粉:雌穗花丝露出苞叶达5-7cm时,开始授粉,并再次套袋,标注授粉时间,同时开始记录温湿度;3)将雌穗苞叶及花丝从距离穗轴顶部3-5cm水平剪掉;4)切开苞叶:根据雌穗粗细程度将...
【专利技术属性】
技术研发人员:李向龙,吴忠义,张中保,张春,张国栋,赵青叶,
申请(专利权)人:北京农业生物技术研究中心,
类型:发明
国别省市:北京,11
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