马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法技术

本发明专利技术公开了马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，包括：步骤一，基于荧光定量PCR技术检测待测马铃薯复配主食中是否含有马铃薯全粉或薯泥，若含有则进入步骤二；步骤二、基于近红外光谱技术测定待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量：2.1)取马铃薯全粉或薯泥含量已知的多个样品，利用近红外光谱仪扫描每个样品，处理得到每个样品的近红外光谱特征峰；2.2)利用建模软件将多个样品的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量之间进行分析，建立马铃薯的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量的定标方程；2.3)利用近红外扫描仪扫描待测马铃薯复配主食，处理得到待测马铃薯复配主食的近红外光谱特征峰，基于定标方程计算待检测马铃薯复配主食中马铃薯全粉或薯泥的含量。

Method for determination of potato content in potato compound staple food

The invention discloses a method for the determination of content of potato potatoes, the staple food of the compound comprises the steps of: detection, fluorescence quantitative PCR tested whether potato mixed staple food containing potato or mashed potato based, if there is to step two; step two, based on the determination of compound potato staple food in the potato or mashed potato content the measured near infrared spectroscopy: 2.1) multiple samples from known potato or mashed potato content, using near infrared spectroscopy scanning for each sample, processing of near infrared spectra were obtained for each sample; 2.2) using modeling software between multiple samples of near infrared spectrum characteristic peak and the potato powder or the analysis of the content of potato, potato based near infrared spectrum characteristic peak and the potato or mashed potato content calibration equation; 2.3) using near infrared scanner to scan In order to obtain the near infrared spectral characteristic peaks of potato compound staple food, the content of potato powder or mashed potato in compound staple food of potato was calculated based on scaling equation.

【技术实现步骤摘要】
马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法
本专利技术属于食品检测
，涉及一种马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法。
技术介绍
目前，马铃薯已成为我国第四大主粮，国家马铃薯主食化项目进程正在推进，一大批丰富多样的马铃薯主食应运而生，而马铃薯主食用复配粉是制作许多马铃薯主食产品必不可少的原料。由于马铃薯复配主食原料中常用的马铃薯全粉或薯泥包含了马铃薯除薯皮以外的全部干物质，营养丰富，且加工成本远高于马铃薯淀粉和小麦粉，因此市售的马铃薯复配原料或马铃薯主食中的马铃薯全粉或薯泥百分含量是否与产品标签所注一致，是否存在掺假、以少称多等情况。比如以马铃薯淀粉或者其他淀粉代替马铃薯全粉或薯泥，成为消费者和监管部门共同关注的问题。因此，马铃薯主食产品中马铃薯全粉或薯泥含量的检测方法的建立刻不容缓。目前，马铃薯全粉或薯泥含量的测定没有成熟的方法，且由于马铃薯全粉或薯泥的主成分物质与其他粮食相近，特征物质难以确定。为此，亟需建立一种准确测定马铃薯全粉或薯泥百分含量的方法，规范马铃薯复配粉的生产与市场流通，进而保证消费者的合法权益。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是提供一种马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法。为此，本专利技术提供的技术方案为：一种马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，包括：步骤一，基于荧光定量PCR技术检测待测马铃薯复配主食中是否含有如SEQIDNO：1所示的特异碱基序列中的部分序列，若含有，则判定所述待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥，若该待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉，则进入步骤二；步骤二，基于近红外光谱技术测定待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量：2.1)取多个样品，该多个样品中的马铃薯全粉或薯泥含量已知，利用近红外光谱仪于扫描范围890～1100nm内扫描每个样品，经过处理得到每个样品的近红外光谱特征峰；2.2)利用建模软件将该多个样品的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量之间进行分析，经过多元散射校正进行近红外光程的校正以消除光程差异，同时采用卷积平滑一阶导数对光谱进行平滑预处理，在全光谱850-1100nm范围内，采用偏最小二乘法合并交互验证的方法，建立马铃薯的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉含量的定标方程；2.3)利用近红外扫描仪于扫描范围890～1100nm内扫描待测马铃薯复配主食，经过处理得到待测马铃薯复配主食的近红外光谱特征峰，基于所述定标方程计算得到待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥的含量。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，所述马铃薯全粉包括马铃薯熟全粉和马玲薯生全粉。该专利技术中马铃薯含量包括马铃薯熟全粉、马铃薯生全粉和马铃薯薯泥的折干物质的量。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，步骤2.1)中，所述多个样品的马铃薯全粉或薯泥含量从0％至100％，且每个样品中的马铃薯全粉或薯泥的含量均不相同，其中任意两个样品的马铃薯全粉或薯泥的含量的差值不小于1％。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，步骤2.1)和2.3)中，利用近红外扫描仪扫描后得到某一样品的原始光谱，采用MSC和S-G-1st平滑处理分别对原始光谱进行预处理得到所述近红外光谱特征峰。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，步骤2.1)中，每个样品利用近红外光谱仪重复扫描3次。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，步骤2.2)中，所述建模软件为Grams，所述定标方程中，马铃薯全粉或薯泥的最佳主因子数为9。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，在所述步骤二中，基于近红外光谱技术测定待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量之前，首先将马铃薯复配主食根据主成份和加工工艺的不同而分成若干类，基于所述近红外光谱技术测定待测同一类马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，基于荧光定量PCR技术检测待测马铃薯复配主食中是否含有如SEQIDNO：1所示的碱基序列中的部分序列时，采用的荧光定量PCR的引物为如SEQIDNO：2和3所示的碱基序列。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，基于荧光定量PCR技术检测待测马铃薯复配主食中是否含有如SEQIDNO：1所示的碱基序列中的部分序列的具体步骤包括：1.1)取标准阳性样品，利用如SEQIDNO：2和3所示的碱基序列进行荧光定量PCR反应，并绘制标准阳性样品的马铃薯质量百分比的对数值与循环阈值Ct值之间的标准曲线和溶解曲线；1.2)取待检测马铃薯复配主食，利用如SEQIDNO：2和3所示的碱基序列进行荧光定量PCR反应，并绘制待测马铃薯复配主食的马铃薯质量百分比的对数值与循环阈值Ct之间的扩增曲线和溶解曲线；1.3)比较待测马铃薯复配主食的扩增曲线和溶解曲线各自分别与标准阳性样品的标准曲线和溶解曲线的相似性，若待测马铃薯复配主食的扩增曲线与标准阳性样品的标准曲线基本相同，且待检测马铃薯复配主食的溶解曲线与标准阳性样品的溶解曲线基本相同，则判定所述待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，在步骤1.3)中，比较待测马铃薯复配主食的扩增曲线和溶解曲线各自分别与标准阳性样品的标准曲线和溶解曲线的相似性时，若待测马铃薯复配主食的扩增曲线与标准阳性样品的标准曲线基本相同，且Ct≤34.5，同时，待检测马铃薯复配主食的溶解曲线与标准阳性样品的溶解曲线基本相同，且Tm值介于78.19℃～78.59℃之间，则判定所述待检测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥；在判定所述待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉之后，还包括将待测马铃薯复配主食的循环阈值Ct值带入所述标准阳性样品的标准曲线中，计算得到待测马铃薯复配主食中马铃薯全粉或薯泥的质量百分比。优选的是，所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法中，其特征在于，荧光定量PCR反应以样品的DNA作为模板，采用天恩泽植物DNA提取试剂盒柱式植物DNAout(20mL，50t，货号60602-50，北京天恩泽生物技术有限公司，下同)提取方法提取样品DNA，直至加入吸附柱前一步，用4/5体积异丙醇或2倍体积无水乙醇代替1.5倍体积试剂盒溶液LP3，与前一步得到上清液混合，然后于温度-20℃冷冻30min，再于12000rpm离心15min，取沉淀，清洗后，用洗脱液2.0溶解，得到样品DNA。本专利技术至少包括以下有益效果：本专利技术通过提供一对特异性引物，并利用所述特异性引物对待测样品及标准品中的DNA进行扩增，得到扩增曲线和溶解曲线，通过对扩增曲线和溶解曲线的分析，通过比较待检测样品及标准品的Ct和Tm值，能够方便、快捷、准确地检测马铃薯复配粉中是否含有马铃薯成分，克服了传统检测方法耗时长、操作步骤复杂、结果不够精确的缺点，使得检测方法更加快速、简单、高效、精准。本专利技术的结果表明，采用近红外法测定马铃薯复配粉中的马铃薯全粉或薯泥含量是可行的，所得模型相关性高，标准偏差较小，重复性高。利用近红外技术进行样品的无损分析，方法可靠、准确，对样品无需进行任何预本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，包括：步骤一，基于荧光定量PCR技术检测待检测马铃薯复配主食中是否含有如SEQ ID NO：1所示的特异碱基序列中的部分序列，若含有，则判定所述待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥，若该待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥，则进入步骤二；步骤二，基于近红外光谱技术测定待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量：2.1)取多个样品，该多个样品中的马铃薯全粉或薯泥含量已知，利用近红外光谱仪于扫描范围890～1100nm内扫描每个样品，经过处理得到每个样品的近红外光谱特征峰；2.2)利用建模软件将该多个样品的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量之间进行分析，经过多元散射校正进行近红外光程的校正以消除光程差异，同时采用卷积平滑一阶导数对光谱进行平滑预处理，在全光谱850‑1100nm范围内，采用偏最小二乘法合并交互验证的方法，建立马铃薯的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量的定标方程；2.3)利用近红外扫描仪于扫描范围890～1100nm内扫描待测马铃薯复配主食，经过处理得到待测马铃薯复配主食的近红外光谱特征峰，基于所述定标方程计算得到待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥的含量。...

【技术特征摘要】
1.一种马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，包括：步骤一，基于荧光定量PCR技术检测待检测马铃薯复配主食中是否含有如SEQIDNO：1所示的特异碱基序列中的部分序列，若含有，则判定所述待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥，若该待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥，则进入步骤二；步骤二，基于近红外光谱技术测定待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量：2.1)取多个样品，该多个样品中的马铃薯全粉或薯泥含量已知，利用近红外光谱仪于扫描范围890～1100nm内扫描每个样品，经过处理得到每个样品的近红外光谱特征峰；2.2)利用建模软件将该多个样品的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量之间进行分析，经过多元散射校正进行近红外光程的校正以消除光程差异，同时采用卷积平滑一阶导数对光谱进行平滑预处理，在全光谱850-1100nm范围内，采用偏最小二乘法合并交互验证的方法，建立马铃薯的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量的定标方程；2.3)利用近红外扫描仪于扫描范围890～1100nm内扫描待测马铃薯复配主食，经过处理得到待测马铃薯复配主食的近红外光谱特征峰，基于所述定标方程计算得到待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥的含量。2.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，所述马铃薯全粉包括马铃薯熟全粉和马玲薯生全粉。3.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.1)中，所述多个样品的马铃薯全粉或薯泥含量从0％至100％，且每个样品中的马铃薯全粉或薯泥的含量均不相同，其中任意两个样品的马铃薯全粉或薯泥的含量的差值不小于1％。4.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.1)和2.3)中，利用近红外扫描仪扫描后得到某一类样品的原始光谱，采用MSC和S-G-1st平滑处理分别对原始光谱进行预处理得到所述近红外光谱特征峰。5.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.1)中，每个样品利用近红外光谱仪重复扫描3次。6.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.2)中，所述建模软件为Grams，所述定标方程中，马铃薯全粉或薯泥的最佳主因子数为9。7.如权利要求1至5任一所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤二中，基于近红外光谱技术测定待检测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量之前，首先将马铃薯复配主食根据主成份和加工工艺的不同而分成若干类，基于所述近...

【专利技术属性】
技术研发人员：张泓，戴小枫，胡宏海，张春江，姚晓静，黄艳杰，徐芬，张良，刘倩楠，黄峰，张雪，张荣，吴娱，谭瑶瑶，赵悦，田芳，
申请(专利权)人：中国农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11