The invention discloses a method for determining the serum urea nitrogen content of near infrared spectroscopy, a preparation of a number of steps, with different content of serum urea nitrogen calibration solution; two, using near infrared spectroscopy for each serum calibration liquid spectra were collected; step three, according to the NIR calibration serum solution, identification model was established; step four, serum samples using near infrared spectroscopy to detect spectral acquisition, comparing the spectra and the identification model of serum samples obtained, urea nitrogen content in serum samples. The invention has the advantages of short detection time, high detection efficiency and high detection accuracy.
【技术实现步骤摘要】
一种血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法
本专利技术属于血液检测领域,涉及一种血清中尿素氮含量的测定方法,尤其涉及一种血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法。
技术介绍
尿素是人体蛋白质代谢的主要终末产物,氨基酸脱氨基产生NH3和C02,两者在肝脏中合成尿素。通常肾脏为排泄尿素的主要器官,尿素从肾小球滤过后在各段小管均可重吸收。各种肾实质性病变,如肾小球肾炎、间质性肾炎、急慢性肾功能衰竭等均可使血尿素氮增高。如能排除肾外因素,尿素氮可作为尿毒症诊断指标之一。血清(或血浆)中的尿素氮,在尿素氮试剂的酸性环境中与二乙酰-肟(DAM)共沸后,可缩合成一红色化合物,称为fearon反应。其颜色的深浅与血清(或血浆)中尿素氮的含量成正比,与同样处理的尿素氮标准液比色,即可测算出血清(或血浆)中尿素氮的含量。由于此方法干扰性大,目前临床实验室多采用尿素酶偶联法,用尿素酶分解尿素产生氨,氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH氧化为NAD+时,通过340nm吸光度的降低值可计算出尿素氮含量。但是,尿素酶偶联法测试时间较长,步骤繁琐,检测效率慢,且大量的人为操作易造成检测结果不准确。
技术实现思路
本专利技术提供一种血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,以克服现有技术的缺陷。为实现上述目的,本专利技术提供一种血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,步骤一、配制若干个含有不同尿素氮含量的血清标定液;步骤二、用近红外光谱仪对每个血清标定液进行光谱采集;步骤三、根据血清标定液的近红外光谱,建立鉴别模型;步骤四、用近红外光谱仪对待检测的血清样品进行光谱采集,将血清样品的光谱与鉴别模型对比,获得血清样品 ...
【技术保护点】
一种血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,其特征在于:步骤一、配制若干个含有不同尿素氮含量的血清标定液;步骤二、用近红外光谱仪对每个所述血清标定液进行光谱采集;步骤三、根据所述血清标定液的近红外光谱,建立鉴别模型;步骤四、用所述近红外光谱仪对待检测的血清样品进行光谱采集,将所述血清样品的光谱与所述鉴别模型对比,获得所述血清样品中的尿素氮含量。
【技术特征摘要】
1.一种血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,其特征在于:步骤一、配制若干个含有不同尿素氮含量的血清标定液;步骤二、用近红外光谱仪对每个所述血清标定液进行光谱采集;步骤三、根据所述血清标定液的近红外光谱,建立鉴别模型;步骤四、用所述近红外光谱仪对待检测的血清样品进行光谱采集,将所述血清样品的光谱与所述鉴别模型对比,获得所述血清样品中的尿素氮含量。2.根据权利要求1所述的血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,其特征在于:其中,步骤一是采用尿素酶偶联法测定血清中的尿素氮含量,并配制出不同尿素氮含量的所述血清标定液;所述尿素酶偶联法是指采用尿素酶、谷氨酸脱氢酶、α-酮戊二酸、NADH与所述血清混合,根据NADH与所述血清反应前后的变化,得到血清中尿素氮的含量。3.根据权利要求2所述的血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,其特征在于:其中,所述尿素酶偶联法的具体步骤为:步骤a、将试剂与所述血清混合,并于36~38℃温浴3-6min;所述试剂包括所述尿素酶、所述谷氨酸脱氢酶、所述α-酮戊二酸和所述NADH;步骤b、在340nm波长处测量所述试剂和所述血清的混合液中所述NADH的吸光度下降速率,并与相同处理的尿素氮标准液比较,计算获得所述样品中尿素氮的含量。4.根据权利要求3所述的血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,其特征在于:其中,所述试剂还包括磷酸盐缓冲液;所述磷酸盐缓冲液的pH指为7.7±0.2;优选的,磷酸盐缓冲液为TRIS-盐酸缓冲剂。5.根据权利要求4所述的血清中尿素氮含量近红外光谱测定方法,其特征在于:其中,所述试剂...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄钢,王海波,杨培强,徐军,胡兆燕,
申请(专利权)人:上海健康医学院,南京瑞柯徕姆环保科技有限公司,
类型:发明
国别省市:上海,31
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