Method for determination of biological activity of SRB, the present invention relates to a soft coral extract comprises the following steps: (1) the logarithm period of tumor cells, each hole of 200 L with 96 well plates, each hole sample solution with different concentrations of 2 L; (2) 37 degrees C culture 17h; (3) centrifuge suction to clear; (4) per hole adding 80%TCA solution 50 L pre cooled, 4 degree C 1.5h fixed into the refrigerator, and then rinse with deionized water 5 times and dried at room temperature; (5) per hole adding 0.5%SRB dye 50 L, room temperature for 30min after washing 4 times, with the room temperature dry 1%TCA water solution precooling; (6) 150 L per hole adding Tris solution and protein binding dye, measured per hole absorbance od in 520nm using elisa. By formula IR (%) = (OD
【技术实现步骤摘要】
肉芝软珊瑚提取物的生物活性SRB测定方法
本专利技术属于海洋生物医药
,具体涉及一种肉芝软珊瑚提取物的生物活性SRB测定方法。
技术介绍
肉芝软珊瑚(Sarcophytonsp.),分类学上属腔肠动物门(Cnidaria),珊瑚虫纲(Anthozoa),软珊瑚目动物(Alcyonacea),软珊瑚科(Alcyoniidae),肉芝软珊瑚属(Sarcophyton)动物,是一种在热带与亚热带比较常见的海洋生物。肉芝软珊瑚颜色多种,包括褐色、绿色或棕色,带有白色或金色的水螅体,随着生长会长出褶皱。珊瑚体呈平铺的盆形,群体肥厚,中央凹入,表面常具有略呈辐射状的脊,脊宽约1至3公分;群体的柱部低矮、粗大。全球有肉芝软珊瑚约41种,到目前为止,国内外研究者已对该属的17个种开展了化学成分研究。该属的化学成分主要有萜类(包括倍半萜、二萜、三萜、四萜,尤其以西松烷二萜居多)、甾醇(尤其以多羟基甾醇居多)、糖苷类、前列腺素、神经酰胺、吡啶衍生物及脂肪酸等化合物。这其中不乏许多结构新颖、生理活性显著的化学成分,因此我们选择南海肉芝软珊瑚(Sarcophytonsp.)进行化学成分及其生物活性的研究。
技术实现思路
本专利技术旨在为肉芝软珊瑚的提取物提供一种方便可靠的生物活性测定方法。一种肉芝软珊瑚提取物的生物活性SRB测定方法,步骤如下:(1)取对数期的肿瘤细胞,用新鲜的RPMI-1640培养基调整细胞悬液的浓度为2×105个/ml,每孔200μL加入96孔板中,每孔加入不同浓度的样品溶液2μL;(2)37ºC培养17h;(3)离心3min(4ºC、3000prm),吸去 ...
【技术保护点】
一种肉芝软珊瑚提取物的生物活性SRB测定方法,其特征在于,步骤如下:(1)取对数期的肿瘤细胞,用新鲜的RPMI‑1640培养基调整细胞悬液的浓度为2×10
【技术特征摘要】
1.一种肉芝软珊瑚提取物的生物活性SRB测定方法,其特征在于,步骤如下:(1)取对数期的肿瘤细胞,用新鲜的RPMI-1640培养基调整细胞悬液的浓度为2×105个/ml,每孔200μL加入96孔板中,每孔加入不同浓度的样品溶液2μL;(2)37ºC培养17h;(3)离心3min(4ºC、3000prm),吸去上清;(4)每孔加入50μL预冷的80%TCA溶液,移入4ºC冰箱中固定1.5h,再用去离子水冲洗5次,室温晾干;(5)每孔加入0.5%SRB染液(1%的TCA...
【专利技术属性】
技术研发人员:褚方强,
申请(专利权)人:青岛清泉生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:山东,37
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