一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物，该化合物的分子结构如下式(Ⅰ)所示。本发明专利技术所述的化合物由毛冬青根乙醇回流提取和柱色谱分离纯化得到。本发明专利技术所述的化合物具有抗炎活性，可用于制备预防和治疗炎症性血管疾病的药物。

Outer ring double bond type of alkyl type three terpene saponin compound and preparation method and application thereof

The present invention relates to an outer ring double bond type three terpene saponin compound, wherein the molecular structure of the compound is shown in the following formula (I). The compounds of the invention are obtained by Mao Dongqing root ethanol reflux extraction and column chromatography separation and purification. The compounds of the present invention have anti-inflammatory activity and can be used for the preparation of drugs for preventing and treating inflammatory vascular diseases.

【技术实现步骤摘要】
一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及甾族化合物，具体涉及五环三萜类化合物以及该化合物在制备治疗炎症性血管疾病药物中的应用。
技术介绍
毛冬青为冬青科(Aquifoliaceae)冬青属植物IlexpubescensHook.etArn.，别名乌尾丁、六月霜、细叶冬青、毛披树、水火药、火烙木等，主产于广东、江西、福建、广西等地，是我国南方常用中药。其药用部位为根，具有活血通络、消肿止痛、清热解毒之功效，临床上广泛用于治疗冠心病、心绞痛、血栓闭塞性脉管炎等。有文献报道过毛冬青部位的抗炎作用(WangJR,ZhouH,JiangZH,WongYF,LiuL.Invivoanti-inflammatoryandanalgesicactivitiesofapurifiedsapononfractionderivedfromtherootofIlexpubescens.Biol.Pharm.Bull.2008,21,643-650.)，同时有文献报道从中分离得到的乌苏烷型三萜皂苷类化合物具有抗肿瘤(ZhouY,ChaiXY,ZengK,ZhangJY,LiN,JiangY,TuPF,llexpublesninsC-M,elevennewtriterpenesaponinsfromtherootsofIlexpubescens.Planta.Med.2013,79,70-77.)、抗血栓(熊天琴,陈元元,李红侠.毛冬青皂苷B3的抗血栓作用研究,中草药.2012,43,1758-1788)和抑制黄嘌呤氧化酶(ZhouZL,FengZC,YinWQ,ZhangHL.AnewtriterpenesaponinfromtheleavesofIlexpubescensanditsXODinhibitoryactivity.Chem.Nat.Compd.2013,49(4):682-684.)作用。乌苏烷型三萜皂苷类化合物在植物界分布较广，据文献报道从1996年至2012年期间，共从自然界发现乌苏烷型三萜类化合物约250余个，(DindaB,DebnathS,MohantaBC,HarigayaY.NaturallyOccurringTriterpenoidSaponins.ChemistryBiodiversity.2010,2327-2580.HillRA,ConnollyJD.Triterpenoids.Nat.Prod.Rep.2015,32:273-327)。关于该类化合物抗炎活性的报道并不是很多，2011年从雷公根(Centellaasiatica)的叶子中分离得到1个乌苏烷型三萜皂苷asiaticosideG(NhiemNX,TaiBH,KimYH.Anewursane-typetriterpenoidglycosidefromCentellaasiaticaleavesmodulatestheproductionofnitricoxideandsecretionofTNF-αinactivatedRAW264.7cells.BioorgMedChemLett.2011,21:1777-1781)，并发现其在100μM浓度条件下，在LPS诱导的RAW264.7细胞模型中，对NO和TNF-α的抑制率分别为77.3％和69.0％。2014年从牡荆(Vitexnegundovar.cannabifolia)的叶子中发现三个乌苏烷型三萜皂苷化合物(LiMM,SuXQ,TuPF.Anti-inflammatoryUrsane-andOleanane-TypeTriterpenoidsfromVitexnegundovar.cannabifolia.JNatProd,2014,77:2248-2254.)，分别是cannabifolinC、2α,3α-dihydroxyurs-12,20(30)-dien-28-oicacid和tormenticacid，并且发现它们能抑制LPS诱导RAW26437细胞中NO的表达，其IC50值分别为34.0，24.9和26.1μM，但是所得三个三萜皂苷化合物的抗炎活性仍不理想。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题提供一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物，该化合物治疗炎症性血管疾病的效果显著。本专利技术要解决上述问题的技术方案是：一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物，其分子结构如式Ⅰ所示：本专利技术所述的环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物的分子式C47H74O17，HR-ESI-MSm/z[M+Na]+:910.4930，化学名称为3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基]-3β-羟基乌苏烷-12,19(29)-二烯-28-酸-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。本专利技术所述的环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物可以通过化学合成的方法。本领域的技术人员可以通过本领域的知识确定合成步骤和工艺条件。本专利技术所述的环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物还可以从毛冬青(IlexpubescensHooketArn.)中分离得到，具体分离方法由下步骤组成：(1)取毛冬青根，依次用12、10和8倍的浓度为70％的乙醇回流提取2h，合并乙醇提取液，回收乙醇并减压浓缩至无醇味，得总浸膏；(2)将总浸膏溶解在水中，过D-101型大孔树脂柱，依次用浓度为30％的乙醇、浓度为60％的乙醇和浓度为95％的乙醇洗脱；收集浓度为60％的乙醇洗脱液过200～300目的硅胶柱，以氯仿-甲醇为溶剂按氯仿︰甲醇为100︰1～0︰1的梯度进行洗脱；收集氯仿︰甲醇为85︰15的洗脱液过SephadexLH-20柱，以甲醇为洗脱剂洗脱，收集洗脱液浓缩后过ODS柱，收集甲醇：水为7：3的洗脱液，浓缩后得到白色粉末状结晶即可。上述分离方法中所述的乙醇的浓度均为体积浓度。上述分离方法中所述的毛冬青是冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)植物毛冬青的干燥根。本专利技术所述的环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物，具有抗炎作用，可用于制备预防和治疗治疗炎症性血管疾病的药物。所述的药物是由(Ⅰ)式所示环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物和药学上可以接受的辅料组成的常用的剂型，如，注射剂、片剂或胶囊剂等。所述制剂中(Ⅰ)式所示的化合物的重量百分含量为10％～50％。下面通过实验来证明(Ⅰ)式所示环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物所具有的技术效果。采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞模型，研究化合物对细胞中一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧酶-2(COX-2)蛋白表达量的影响，考察本专利技术所述化合物的抗炎作用，具体实验方法如下所述。1、样品1来源于具体实施例1所示制备方法。对照品tormenticacid(委陵菜酸)为文献(LiMM,SuXQ,TuPF.Anti-inflammatoryUrsane-andOleanane-TypeTriterpenoidsfromVitexnegundovar.cannabifolia.JNatProd,2014,77:2248-2254.)所报道化合物，具体结构式如下式(Ⅱ)所示。阳性对照药DEX为地塞米松。2、鼠源巨噬细胞RAW264.7购自美国标准菌库，保存在含有10％F本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物，其分子结构如下式(Ⅰ)所示：

【技术特征摘要】
1.一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物，其分子结构如下式(Ⅰ)所示：2.权利要求1所述的环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，该方法由下步骤组成：(1)取毛冬青根，依次用12、10和8倍的浓度为70％的乙醇回流提取2h，合并乙醇提取液，回收乙醇并减压浓缩至无醇味，得总浸膏；(2)将总浸膏溶解在水中，过D-101型大孔树脂柱，依次用浓度为30％的乙醇、浓度为60％的乙醇和浓度为95％的乙醇洗脱；收集浓度为60％的乙醇洗脱液过200～300目的硅胶柱，以氯仿-甲醇为溶剂按氯仿︰甲醇为100︰1～0︰1的梯度进行洗脱；收集氯仿︰甲醇为85︰1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘中秋，吴鹏，周华，高慧，朱丽君，卢琳琳，王莹，戚笑笑，王立萍，
申请(专利权)人：广州中医药大学，
类型：发明
国别省市：广东,44