一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法技术

本发明专利技术公开的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其具体步骤包括：1）灰树花子实体原料浸泡脱脂，离心得到一次固相物和一次提取液；2）一次固相物进行沸水冷凝回流浸提，离心得到二次固相物和二次提取液；3）二次提取液水提得灰树花水提多糖；4）二次固相物进行浸提后固液分离，得到三次提取液；5）三次提取液碱提得灰树花碱提多糖；采用本发明专利技术对灰树花子实体进行多糖提取，结合了水提和碱提两种提取方式，综合提取灰树花多糖，可以综合提高灰树花多糖的提取率，提取率达到现有提取率的122%，同时大幅度降低了原料的浪费，是一种高利用率、高提取率的灰树花多糖分离纯化的方法，适合大范围推广。

A method of grey water tree polysaccharides and alkaline extraction separation and purification

Separation and purification method of the invention discloses an ash tree flower polysaccharides and alkaliextracted, includes the following steps: 1) Maitake raw materials immersion degreasing, centrifugal get a solid phase and a liquid extraction; 2) a solid for boiling water reflux extraction, from experience to two a solid and two extract; 3) the two extraction liquid water to ash trees flower polysaccharides; 4) two solid phase extraction were obtained after solid-liquid separation, three extraction liquid; 5) the three extraction liquid to g.frondosa alkaliextracted; the invention of ash tree flower body polysaccharide extraction, water extraction and alkali extraction combined with two kinds of extraction methods, comprehensive extraction of Grifola frondosa polysaccharide, extraction rate can improve the comprehensive grifolan, the extraction rate reached the current extraction rate of 122%, and greatly reduce the waste of raw materials, is a kind of The method for separating and purifying Grifola frondosa polysaccharide with high utilization ratio and high extraction rate is suitable for wide range popularization.

【技术实现步骤摘要】
一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法
本专利技术涉及灰树花生产领域，特别是一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法。
技术介绍
灰树花(舞茸)多糖是灰树花中的一种提取物，由葡聚糖、葡萄糖、木糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、丰乳糖及少量蛋白质的异聚糖复合物组成。灰树花多糖中含有一种蛋白多糖，中文名叫舞茸地复仙（舞茸D-fraction）它的蛋白和多糖的比例是7：3平均分子量是100万。多糖部分由具有β-(1-3)侧链的β-(1-6)葡聚糖和具有β-(1-6)侧链的β-(1-3)葡聚糖组成。多糖成分中只有这种舞茸地复仙最有抗癌防癌的作用。灰树花（Grifolafrondosa）是一种药食两用菌，其多糖是主要的一类活性成分，作为一种生物反应调节剂，灰树花多糖具有增强免疫功能、抑制肿瘤、抗HIV病毒、稳定血压、降低血糖、改善脂肪代谢等生理活性，且无毒副作用。热水浸提法是多糖提取最普遍应用的方法之一，但该方法存在耗时长，提取率不高等缺点，并存在很大程度的原料浪费。
技术实现思路
本专利技术对现有的灰树花多糖提取方法，进行了综合性研究，结合现有技术，针对热水浸提法存在的提取率不高、原料浪费严重的问题，公开了一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，本专利技术的灰树花多糖分离纯化方法，具有提取率高，原料利用率高的特点。为解决以上技术问题，本专利技术提供的技术方案是:一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）使用醇溶液对灰树花子实体原料进行浸泡脱脂，脱脂完毕后，通过离心设备，进行固液分离，得到一次固相物和一次提取液；（2）使用去离子水对步骤（1）中所得的一次固相物，进行沸水冷凝回流浸提，浸提完毕后，再次通过离心设备，进行固液分离，得到二次固相物和二次提取液；（3）将步骤（2）中所得的二次提取液，经浓缩、去蛋白、碱中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，得灰树花水提多糖；（4）使用碱性水溶液对步骤（2）中所得的二次固相物进行浸提，浸提完毕后固液分离，得到三次提取液；（5）将步骤（4）中所得的三次提取液，经酸中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，即得灰树花碱提多糖。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（1）中，所述醇溶液与灰树花子实体原料的重量比为8-10：1，醇溶液为85－95%乙醇（w/v）溶液。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（2）中，进行沸水冷凝回流浸提时，水体温度控制在90－100℃之间，煎煮时间控制在2－4小时。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（2）中，所述离子水与灰树花原料的重量比为8－10：1，提取次数共计2次。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（3）中，对二次提取液进行浓缩时，通过框架式薄膜浓缩器或真空浓缩机，进行浓缩，直至二次提取液的波美度达到25°～30°。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（3）中，去蛋白的具体条件为，向经过浓缩的二次提取液中，滴加5－30%三氯乙酸（w/v），直至溶液不再混浊，并于3－6℃下静置12－24小时，离心去蛋白。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（3）中，向经过去蛋白的二次提取液中，滴加10%氢氧化钠水溶液，进行中和，直至PH为6.8-7.2之间。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（3）和（5）中，进行透析脱盐时，透析袋埋在吸水力强的聚乙二醇或甘油中，分别对步骤（3）中经过碱中和的二次提取液和步骤（5）中经过酸中和的三次提取液，进行透析36－48小时。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（3）和（5）中，醇沉的具体步骤为：A、冷却的步骤（3）中的二次提取液和步骤（5）中的三次提取液至10℃；B、随后采用三慢二快的搅拌节奏，缓慢向二次提取液和三次提取液中加入乙醇，并控制二次提取液和三次提取液内的含醇量达54％～65％；C、最后，将加入了乙醇的二次提取液和三次提取液密封，并保存于低温环境下，环境温度控制在5℃~10℃。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（3）和（5）中，进行洗涤时，通过无水乙醇和丙酮依次洗涤两次。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（3）和步骤（5）中，进行喷雾干燥时，采用超声波喷雾干燥工艺，设定进风温度为85~95℃，进气压力设定为0.1~0.25MPa，进料量控制在30~50mL/min，同时设定出风温度为70~90℃。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（4）中，所述碱性水溶液与二次固相物的重量比为8-10：1，碱性水溶液为5%氢氧化钠水溶液。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（4）中，进行浸提时，水体温度控制在90－100℃之间，煎煮时间控制在2－4小时。上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（5）中，进行酸中和时，通过向三次提取液中，滴加2mol/LHCL溶液进行中和，直至PH值为7.0。本专利技术的有益效果为：本专利技术公开的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其具体步骤包括：1）灰树花子实体原料浸泡脱脂，离心得到一次固相物和一次提取液；2）一次固相物进行沸水冷凝回流浸提，离心得到二次固相物和二次提取液；3）二次提取液水提得灰树花水提多糖；4）二次固相物进行浸提后固液分离，得到三次提取液；5）三次提取液碱提得灰树花碱提多糖；采用本专利技术对灰树花子实体进行多糖提取，结合了水提和碱提两种提取方式，综合提取灰树花多糖，可以综合提高灰树花多糖的提取率，提取率达到现有提取率的122%，同时大幅度降低了原料的浪费，是一种高利用率、高提取率的灰树花多糖分离纯化的方法，适合大范围推广。附图说明图1本专利技术流程图。具体实施方式实施例一一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）使用醇溶液对灰树花子实体原料进行浸泡脱脂，脱脂完毕后，通过离心设备，进行固液分离，得到一次固相物和一次提取液；（2）使用去离子水对步骤（1）中所得的一次固相物，进行沸水冷凝回流浸提，浸提完毕后，再次通过离心设备，进行固液分离，得到二次固相物和二次提取液；（3）将步骤（2）中所得的二次提取液，经浓缩、去蛋白、碱中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，得灰树花水提多糖；（4）使用碱性水溶液对步骤（2）中所得的二次固相物进行浸提，浸提完毕后固液分离，得到三次提取液；（5）将步骤（4）中所得的三次提取液，经酸中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，即得灰树花碱提多糖。其中，步骤（1）中，所述醇溶液与灰树花子实体原料的重量比为9.5：1，醇溶液为85－95%乙醇（w/v）溶液。其中，步骤（2）中，进行沸水冷凝回流浸提时，水体温度控制在95℃，煎煮时间控制在3.3小时。其中，步骤（2）中，所述离子水与灰树花原料的重量比为8.5：1，提取次数共计2次。其中，步骤（3）中，对二次提取液进行浓缩时，通过框架式薄膜浓缩器或真空浓缩机，进行浓缩，直至二次提取液的波美度达到28°。其中，步骤（3）中，去蛋白的具体条件为，向经过浓缩本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）使用醇溶液对灰树花子实体原料进行浸泡脱脂，脱脂完毕后，通过离心设备，进行固液分离，得到一次固相物和一次提取液；（2）使用去离子水对步骤 （1）中所得的一次固相物，进行沸水冷凝回流浸提，浸提完毕后，再次通过离心设备，进行固液分离，得到二次固相物和二次提取液；（3）将步骤（2）中所得的二次提取液，经浓缩、去蛋白、碱中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，得灰树花水提多糖；（4）使用碱性水溶液对步骤 （2）中所得的二次固相物进行浸提，浸提完毕后固液分离，得到三次提取液；（5）将步骤（4）中所得的三次提取液，经酸中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，即得灰树花碱提多糖；其中，步骤（1） 中，所述醇溶液与灰树花子实体原料的重量比为 8‑10 ：1，醇溶液为85－95%乙醇（w/v）溶液；其中，步骤 （2） 中，进行沸水冷凝回流浸提时，水体温度控制在90－100℃之间，煎煮时间控制在2－4小时；其中，步骤 （2） 中，所述离子水与灰树花原料的重量比为 8－10 ：1，提取次数共计2次；其中，步骤 （3）中，对二次提取液进行浓缩时，通过框架式薄膜浓缩器或真空浓缩机，进行浓缩，直至二次提取液的波美度达到25°～30°；其中，步骤 （3）中，去蛋白的具体条件为，向经过浓缩的二次提取液中，滴加5－30%三氯乙酸（w/v），直至溶液不再混浊，并于3－6℃下静置12－24小时，离心去蛋白。...

【技术特征摘要】
1.一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）使用醇溶液对灰树花子实体原料进行浸泡脱脂，脱脂完毕后，通过离心设备，进行固液分离，得到一次固相物和一次提取液；（2）使用去离子水对步骤（1）中所得的一次固相物，进行沸水冷凝回流浸提，浸提完毕后，再次通过离心设备，进行固液分离，得到二次固相物和二次提取液；（3）将步骤（2）中所得的二次提取液，经浓缩、去蛋白、碱中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，得灰树花水提多糖；（4）使用碱性水溶液对步骤（2）中所得的二次固相物进行浸提，浸提完毕后固液分离，得到三次提取液；（5）将步骤（4）中所得的三次提取液，经酸中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，即得灰树花碱提多糖；其中，步骤（1）中，所述醇溶液与灰树花子实体原料的重量比为8-10：1，醇溶液为85－95%乙醇（w/v）溶液；其中，步骤（2）中，进行沸水冷凝回流浸提时，水体温度控制在90－100℃之间，煎煮时间控制在2－4小时；其中，步骤（2）中，所述离子水与灰树花原料的重量比为8－10：1，提取次数共计2次；其中，步骤（3）中，对二次提取液进行浓缩时，通过框架式薄膜浓缩器或真空浓缩机，进行浓缩，直至二次提取液的波美度达到25°～30°；其中，步骤（3）中，去蛋白的具体条件为，向经过浓缩的二次提取液中，滴加5－30%三氯乙酸（w/v），直至溶液不再混浊，并于3－6℃下静置12－24小时，离心去蛋白。2.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤（3）中，向经过去蛋白的二次提取液中，滴加10%氢氧化钠水溶液，进行中和，直至PH为6.8-7.2之间。3.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵兴军，毛日文，朱惠芬，仲延龙，
申请(专利权)人：江苏江大源生态生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32