脂肪组织靶向多肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及蛋白多肽领域，具体涉及一类脂肪组织靶向多肽及其制备方法和应用。所述的脂肪组织靶向多肽包括细胞靶向多肽肽段、细胞凋亡多肽肽段以及连接细胞靶向多肽肽段和细胞凋亡多肽肽段的桥链。本发明专利技术的脂肪组织靶向多肽可以特异性的使脂肪细胞凋亡，从而达到降脂减肥的疗效。并且由于其分子本身包含的靶向作用机理，可以避免发生现有减肥药物的常见不良反应，相比现有减肥药物具有更直接的疗效和更少的副作用。

Adipose tissue targeted polypeptide, preparation method and application thereof

The invention relates to the field of protein and polypeptide, in particular to a kind of fat tissue targeted polypeptide, a preparation method and an application thereof. The adipose tissue targeted polypeptide comprises a cell targeted polypeptide peptide segment, an apoptotic polypeptide peptide segment, and a bridged chain that connects a cell targeted polypeptide peptide segment and an apoptotic polypeptide peptide segment. The fat tissue targeted polypeptide of the invention can specifically induce apoptosis of fat cells, thereby achieving the effect of reducing blood fat and reducing weight. And because the molecule itself contains a targeting mechanism, it can avoid the common adverse effects of the existing weight loss drugs, and has more direct curative effect and less side effects than the existing weight reducing drugs.

【技术实现步骤摘要】
脂肪组织靶向多肽及其制备方法和应用
本专利技术涉及蛋白多肽领域，具体涉及一类脂肪组织靶向多肽及其制备方法和应用。
技术介绍
肥胖症作为一种常见的慢性内分泌代谢疾病，发病率呈逐年上升趋势，已成为全球性的公共健康难题。当人体进食的热量多于消耗量时便以脂肪形式存于体内，超过正常体重的20％即为肥胖。肥胖可发生于任何年龄，但以40岁以后者为多，女性发生率偏高。肥胖分为两大类型：一是单纯性肥胖，病人以肥胖为主要表现，不伴明显的神经和内分泌系统功能的改变，却伴有代谢调节障碍，这类肥胖最为多见。二是继发性肥胖，常继发脑炎、脑膜炎、脑部损害、垂体疾病、肾上腺皮质机能亢进、甲状腺机能低下、胰岛素分泌过多等。多年来，肥胖症的行为和药物干预一直未被广泛接受。直至20世纪60年代开始了肥胖症行为治疗，使通过改变不良的饮食和运动习惯来减轻体重成为可能。研究表明，现有药物治疗可使体重减轻并能维持3～6个月。虽然研究病例有限，但却提出了一个与以往截然不同的概念，即肥胖症应与其他慢性疾病一样，通过长期的药物治疗来改善。尽管芬氟拉明等药物由于严重的心血管不良反应致使其最终撤出市场，但大量事实证明肥胖症有必要视作一种慢性疾病进行长期的药物治疗。理想的减肥药物应能减少能量摄取，增加能量消耗，并改善肥胖相关的心血管疾病危险因子。迄今为止，肥胖药物按作用机制主要可分为三类：抑制食欲的药物，影响营养吸收的药物，增加能量消耗的药物。抑制食欲的药物有以下几类，作用于去甲肾上腺素的药物直接作用于中枢神经系统，刺激去甲肾上腺素(NE)的释放或阻断其再摄取，导致神经末梢NE耗竭，进而抑制食欲，减少摄食，降低体重。此类药物如安非拉酮。5-羟色胺(5-HT)受体激动剂通过促进5-HT的释放和(或)抑制其再摄取而达到减肥的目的。短期研究显示，此类药物有部分减轻体重的作用，疗效与作用与去甲肾上腺素类似，如：芬氟拉明、右芬氟拉明、氟西汀和舍曲林等。西布曲明为神经递质再摄取抑制剂类药物的代表，该药物通过NE和5-HT的再摄取，减少摄食，降低体重；不同于芬氟拉明和右芬氟拉明的是，西布曲明不诱导5-HT的释放，因而被认为与心血管疾病的发生无关。目前，FDA批准的减少营养物吸收的药物只有奥利司他，该药物可特异性地抑制胃肠道胰脂肪酶，抑制膳食中脂肪(甘油三酯)水解为可吸收的游离脂肪酸和甘油单脂，减少饮食中脂肪的吸收达30％，从而减轻体重，该药只通过外周组织发挥作用，全身吸收量甚微(﹤1％)。该药是第一个被认可的非食欲抑制性抗肥胖药物，其药理作用呈剂量依赖性，推荐剂量为一日3次，每次120mg。严格来说，目前临床上尚无增加能量消耗类的减肥药物，不过西布曲明除抑制食欲和增加饱腹感外，也有研究发现它能提高基础代谢率及促进产热效应。
技术实现思路
本专利技术所解决的现有技术的问题在于：目前临床应用的减肥药物，确实有助于减轻体重和减少体重反弹，但缺乏长期的安全性及疗效评估，长期服用易导致神经、心血管等系统疾病。本专利技术人通过研究肥胖症发生的机制，发现了全新的药物干预靶点，从而找到了专利技术所述的脂肪组织靶向多肽。具体而言，本专利技术提供了一种脂肪组织靶向多肽，所述的脂肪组织靶向多肽包括细胞靶向多肽肽段、细胞凋亡多肽肽段以及连接细胞靶向多肽肽段和细胞凋亡多肽肽段的桥链。优选的，其中细胞靶向多肽肽段选自以下序列中的一种：SEQ1，SEQ2，SEQ3，SEQ4，SEQ5，SEQ6，SEQ7，SEQ8，SEQ9，SEQ10，SEQ11，SEQ12，SEQ13，SEQ14，SEQ15，SEQ16，SEQ17，SEQ18，SEQ19，SEQ20，SEQ21，SEQ22，SEQ23，SEQ24，SEQ25，SEQ26，SEQ27，SEQ28，SEQ29，SEQ30；其中所述的细胞靶向多肽肽段中的氨基酸独立地为甘氨酸和D型或者L型氨基酸，优选为甘氨酸和L型氨基酸。优选的，所述的细胞靶向多肽肽段中的氨基酸为天然或非天然氨基酸，所述的天然氨基酸优选为经保护基团修饰的天然氨基酸；所述的保护基团优选为叔丁氧羰基、氧叔丁基、三苯甲基、2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基、烯丙基、(N-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧环亚己基-1)乙基)中的一种或几种。优选的，所述的细胞凋亡多肽肽段选自细胞凋亡因子或下列所述的肽链片段中的一种：SEQ31，SEQ32；其中所述肽链片段中的氨基酸独立地为D型或者L型氨基酸；优选为氨基酸全部为D型氨基酸或者L型氨基酸；进一步优选为氨基酸全部为D型氨基酸。优选的，所述的细胞凋亡多肽肽段选自细胞凋亡因子或肽链片段SEQ33；其中所述肽链片段中的氨基酸独立地为甘氨酸和D型或者L型氨基酸；优选为甘氨酸和D型氨基酸。优选的，所述的肽链片段中的氨基酸为天然或非天然氨基酸；所述的天然氨基酸优选为经保护基团修饰的天然氨基酸；所述的保护基团优选为叔丁氧羰基、氧叔丁基、三苯甲基、2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基、烯丙基、(N-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧环亚己基-1)乙基)中的一种或几种。优选的，所述的细胞凋亡因子选自以下中的一种：白细胞介素-1、白细胞介素-2、白细胞介素-5、白细胞介素-10、白细胞介素-11、白细胞介素-12、白细胞介素-18、干扰素-γ，干扰素-α、干扰素-β、肿瘤坏死因子-α、巨噬细胞集落刺激因子。优选的，所述的桥链为2～10个的天然或非天然氨基酸片段。优选的，所述的桥链为2～6个氨基酸组成的片段，更优选为2个氨基酸片段。更优选的，所述的桥链为包含甘氨酸或丙氨酸。优选的，所述的脂肪组织靶向多肽为链状或者是环状脂肪组织靶向多肽；所述的环状脂肪组织靶向多肽优选为分子内成环的方式。优选的，所述的成环方式为化学键，选自C-N、C-O、C＝N、C-C、C＝C、C-S、S-S、CO-NH、CO-S键中的一种或几种以上。更优选的，所述的成环方式为S-S、CO-NH或CO-S键。优选的，所述的脂肪组织靶向多肽采用聚乙二醇修饰，所述的脂肪组织靶向多肽的C端、N端或侧链的任一位置与聚乙二醇进行结合。更优选的，所述的脂肪组织靶向多肽的桥链与聚乙二醇进行结合。优选的，所述聚乙二醇选自PEG10，PEG100，PEG200，PEG300，PEG400，PEG500，PEG600，PEG700，PEG800，PEG900，PEG1000，PEG1100，PEG1200，PEG1300，PEG1400，PEG1500，PEG1600，PEG1700，PEG1800，PEG2000，PEG3000，PEG4000，PEG10000，PEG20000，PEG40000中的一种或几种以上。优选的，所述聚乙二醇选自PEG10，PEG100，PEG200，PEG300，PEG400，PEG500中的一种或几种以上。更优选的，所述聚乙二醇选自PEG10，PEG100，PEG200中的一种或几种以上。本专利技术同时提供了一种脂肪组织靶向多肽的制备方法，包括如下步骤：(1)采用固相合成法，依照脂肪组织靶向多肽的连接次序在偶联剂的作用下，依次进行氨基酸的偶联，合成具有N端保护的链状脂肪组织靶向多肽；(2)裂解去除N端保护的基团，得到链状的脂肪组织靶向多肽。优选的，所述偶联本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂肪组织靶向多肽，其特征在于：所述的脂肪组织靶向多肽包括细胞靶向多肽肽段、细胞凋亡多肽肽段以及连接细胞靶向多肽肽段和细胞凋亡多肽肽段的桥链。

【技术特征摘要】
1.一种脂肪组织靶向多肽，其特征在于：所述的脂肪组织靶向多肽包括细胞靶向多肽肽段、细胞凋亡多肽肽段以及连接细胞靶向多肽肽段和细胞凋亡多肽肽段的桥链。2.根据权利要求1所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于，其中细胞靶向多肽肽段选自以下序列中的一种：SEQ1，SEQ2，SEQ3，SEQ4，SEQ5，SEQ6，SEQ7，SEQ8，SEQ9，SEQ10，SEQ11，SEQ12，SEQ13，SEQ14，SEQ15，SEQ16，SEQ17，SEQ18，SEQ19，SEQ20，SEQ21，SEQ22，SEQ23，SEQ24，SEQ25，SEQ26，SEQ27，SEQ28，SEQ29，SEQ30；其中所述的细胞靶向多肽肽段中的氨基酸独立地为甘氨酸和D型或者L型氨基酸，优选为甘氨酸和L型氨基酸。3.根据权利要求1或2所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于，所述的细胞靶向多肽肽段中的氨基酸为天然或非天然氨基酸，所述的天然氨基酸优选为经保护基团修饰的天然氨基酸；所述的保护基团优选为叔丁氧羰基、氧叔丁基、三苯甲基、2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基、烯丙基、N-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧环亚己基-1)乙基中的一种或几种。4.根据权利要求1-3任一项所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于：所述的细胞凋亡多肽肽段选自细胞凋亡因子或下列所述的肽链片段中的一种：SEQ31，SEQ32；其中所述肽链片段中的氨基酸独立地为D型氨基酸或者L型氨基酸；优选为氨基酸全部为D型氨基酸或者L型氨基酸；进一步优选为氨基酸全部为D型氨基酸。5.根据权利要求1-3任一项所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于：所述的细胞凋亡多肽肽段选自细胞凋亡因子或肽链片段SEQ33；其中所述肽链片段中的氨基酸独立地为甘氨酸和D型或者L型氨基酸；优选为甘氨酸和D型氨基酸。6.根据权利要求4或5所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于，所述的肽链片段中的氨基酸为天然或非天然氨基酸；所述的天然氨基酸优选为经保护基团修饰的天然氨基酸；所述的保护基团优选为叔丁氧羰基、氧叔丁基、三苯甲基、2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基、烯丙基、N-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧环亚己基-1)乙基中的一种或几种。7.根据权利要求4-6任一项所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于，所述的细胞凋亡因子选自以下中的一种：白细胞介素-1、白细胞介素-2、白细胞介素-5、白细胞介素-10、白细胞介素-11、白细胞介素-12、白细胞介素-18、干扰素-γ，干扰素-α、干扰素-β、肿瘤坏死因子-α、巨噬细胞集落刺激因子。8.根据权利要求1-7任一项所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于，所述的桥链为2～10个的天然或非天然氨基酸片段，优选为2～6个氨基酸组成的片段，更优选为2个氨基酸片段；进一步优选为包含甘氨酸或丙氨酸。9.根据权利要求1-8任一项所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于，所述的脂肪组织靶向多肽为链状或者是环状脂肪组织靶向多肽；所述的环状脂肪组织靶向多肽优选为分子内成环的方式。10.根据权利要求9所述的脂肪组织靶向多肽，其特征在于，所述的成环方式为化学键，选自C-N、C-O、C＝N、C-C、C＝C、C-S、S-S、CO-NH、CO-S键中的一种或几种以上，优...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓，厉保秋，路杨，杨东晖，何南海，沈柯，周俊，
申请(专利权)人：杭州阿德莱诺泰制药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33