一种豆腐菜挥发油的提取纯化和检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种豆腐菜挥发油的提取纯化和检测方法及其应用。本发明专利技术首次采用水蒸气蒸馏和有机萃取技术提取纯化得到豆腐菜挥发油，提取纯化方法工艺简单，成本低，制备工艺中的蒸馏水和有机溶剂能够重复利用，经本发明专利技术制备工艺获得的挥发油含水率低，同时经试验验证具有良好的抗氧化、抑菌和抗癌活性，对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌和绿脓杆菌均有良好的抑菌作用，对HepG2(人肝癌细胞)和MCF‑7(人乳腺癌细胞)具有良好的抗癌抑癌效果，适合工业化生产应用。

【技术实现步骤摘要】
一种豆腐菜挥发油的提取纯化和检测方法及其应用
本专利技术属于医药产品研究开发
，具体涉及一种豆腐菜挥发油的提取纯化和检测方法及其应用。
技术介绍
豆腐菜(PremnamicrophyllaTurcz)，属于马鞭草科、豆腐柴属植物，别名有臭黄荆、豆腐木、豆腐柴、豆腐叶、观音柴和凉粉柴，根、茎和叶入药，能清热解毒，消肿止血。主治毒蛇咬伤，无名肿毒，创伤出血等。其在我国分布广泛，主要分布于长江流域以南地区包括华东、中南、华南以至四川、贵州等地，适生于海拔1000m以下的山坡、林缘、疏林下、溪沟两侧的灌丛中及道路旁。在现有研究报道中指出，豆腐菜叶和嫩枝中含有大量的果胶、蛋白质和维生素，而且其总糖和还原糖含量也较高，化学成分研究证明，豆腐菜主要含有黄酮及其苷类，有机酸，三萜类，蛋白质，氨基酸等成分，营养丰富。挥发油(volatileoils)又称精油(essentialoils)，是一类在常温下能挥发的、可随水蒸汽蒸馏的、与水不相混的油状液体的总称。大多数挥发油具有芳香气味。挥发油是一类重要的活性成分，临床上除直接应用主要含挥发油的生药外，还可应用从中精制的挥发油，如桉叶油、薄荷油等。挥发油具有发散解表、芳香开窍、理气止痛、祛风除湿、活血化瘀、祛寒温里、清热解毒、解暑祛秽、杀虫抗菌等作用，如薄荷油用驱风健胃，当归油镇痛，柴胡油退热，土荆芥油驱肠虫等，此外挥发油还广泛应用于香料、食品与化妆品等的生产。因此为进一步拓展豆腐菜应用领域，有必要对豆腐菜挥发油进行研究。然而现有技术中尚未有关于豆腐菜挥发油的报道。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术提供一种豆腐菜挥发油的分离提取方法及豆腐菜挥发油的应用，所述提取纯化方法工艺简单，成本低，获得的挥发油含水率低，具有良好的抗氧化、抑菌和抗癌活性。为实现上述目的，本专利技术采用下述技术方案：一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，包括以下步骤：(1)取新鲜豆腐菜洗净晾干后粉粹至粒径为50-100目，加入蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，得含挥发油水系；(2)向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂即得到干燥纯净的挥发油。进一步的，所述洗净晾干后的豆腐菜与蒸馏水的质量比为1：1～3，进一步优选为1:2；所述豆腐菜粉粹粒径优选为60目；专利技术人在实验研究中发现，粉粹颗粒较大，会使水蒸汽从原料间隙流出，从而使得提取率降低，且浪费资源；而粉粹粒径过小，则使得水蒸汽无法均匀透过原料，导致蒸汽从冲开的原料中逸出，同样导致提取率不高；进一步的，所述水蒸汽蒸馏提取时间为5-6h；适宜的提取时间能够保证尽可能由豆腐菜中提取出挥发油组分，同时也避免提取时间过长造成的资源浪费；进一步的，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、丙烯酸乙酯、甲苯、乙醚、氯仿中的一种或几种，优选为乙醚；申请人发现，乙醚对豆腐菜挥发油组分萃取效果最佳，相较于其他的有机溶剂具有更好的提取率；进一步的，所述脱水干燥剂选自无水硫酸钠或无水硫酸钙，优选为无水硫酸钠；所述豆腐菜挥发油的提取纯化方法，最优工艺为：(1)取新鲜豆腐菜洗净晾干后粉粹至粒径为60目，加入蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，蒸馏提取时间为5h，得含挥发油水系；其中，所述洗净晾干后的豆腐菜与蒸馏水的质量比为1：2；(2)向含挥发油水系中加入乙醚进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的乙醚溶液中加入无水硫酸钠脱水，过滤回收乙醚即得到干燥纯净的挥发油。本专利技术还公开了由上述提取纯化方法制备得到的豆腐菜挥发油。此外，本专利技术提供一种由上述提取纯化方法制备得到的豆腐菜挥发油的检测方法，所述方法包括采用气相色谱-质谱法(GC-MS)分析检测，检测条件为：HP-5MS色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)；载气：氦气；流速：1.2mL/min，溶剂延迟4min；升温程序：初始温度为60℃，保持1min，以15℃/min升温到200℃，保持5min，再以5℃/min升到280℃，保持2min。离子化方式：EI，70eV；离子源温度：250℃；载气：氦气；柱流速：1.2mL/min。其中，所述豆腐菜挥发油化学成分包括布卢姆醇C、柏木烯、蒈烯、α-愈创烯、隐品酮和异长叶醇。本专利技术还公开了上述豆腐菜挥发油的应用，所述豆腐菜挥发油作为抗氧化剂应用于食品、药品、化妆品或保健品；本专利技术还公开了上述豆腐菜挥发油的应用，所述豆腐菜挥发油作为抑菌剂应用于食品、药品、化妆品或保健品；进一步的，所述豆腐菜挥发油作为金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌和绿脓杆菌的抑菌剂。最后，本专利技术公开了上述豆腐菜挥发油的应用，所述豆腐菜挥发油作为抗癌细胞剂应用于食品、药品或保健品；进一步的，所述豆腐菜挥发油作为HepG2(人肝癌细胞)和MCF-7(人乳腺癌细胞)的抗癌细胞剂。本专利技术的有益效果：本专利技术首次采用水蒸气蒸馏和有机萃取技术提取纯化得到豆腐菜挥发油，提取纯化方法工艺简单，成本低，制备工艺中的蒸馏水和有机溶剂能够重复利用，经本专利技术制备工艺获得的挥发油含水率低，同时经试验验证具有良好的抗氧化、抑菌和抗癌活性，对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌和绿脓杆菌均有良好的抑菌作用，对HepG2(人肝癌细胞)和MCF-7(人乳腺癌细胞)具有良好的抗癌抑癌效果，适合工业化生产应用。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。正如
技术介绍
所介绍的，现有技术中豆腐菜营养丰富，因此为进一步拓展豆腐菜应用领域，有必要对豆腐菜挥发油进行研究，然而现有技术中尚未有关于豆腐菜挥发油的报道。本申请的一种典型的实施方式中，提供一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，包括以下步骤：(1)取新鲜豆腐菜洗净晾干后粉粹至粒径为50-100目，加入蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，得含挥发油水系；(2)向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂即得到干燥纯净的挥发油。其中，所述洗净晾干后的豆腐菜与蒸馏水的质量比为1：1～3，进一步优选为1:2；所述豆腐菜粉粹粒径优选为60目；专利技术人在实验研究中发现，粉粹颗粒较大，会使水蒸汽从原料间隙流出，从而使得提取率降低，且浪费资源；而粉粹粒径过小，则使得水蒸汽无法均匀透过原料，导致蒸汽从冲开的原料中逸出，同样导致提取率不高；所述水蒸汽蒸馏提取时间为5-6h；适宜的提取时间能够保证尽可能由豆腐菜中提取出挥发油组分，同时也避免提取时间过长造成的资源浪费；所述有机溶剂选自乙酸乙酯、丙烯酸乙酯、甲苯、乙醚、氯仿中的一种或几种，优选为乙醚；申请人发现，乙醚对豆腐菜挥发油组分萃取效果最佳，相较于其他的有机溶剂具有更好的提取率；所述脱水干燥剂选自无水硫酸钠或无水硫酸钙，优选为无水硫酸钠；本专利技术的另一典型实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取新鲜豆腐菜洗净晾干后粉粹至粒径为50‑100目，加入蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，得含挥发油水系；(2)向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂即得到干燥纯净的挥发油。

【技术特征摘要】
1.一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取新鲜豆腐菜洗净晾干后粉粹至粒径为50-100目，加入蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，得含挥发油水系；(2)向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂即得到干燥纯净的挥发油。2.如权利要求1所述的一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，其特征在于，所述洗净晾干后的豆腐菜与蒸馏水的质量比为1：1～3，优选为1:2；所述豆腐菜粉粹粒径为60目。3.如权利要求1所述的一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、丙烯酸乙酯、甲苯、乙醚、氯仿中的一种或几种，优选为乙醚。4.如权利要求1所述的一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，其特征在于，所述脱水干燥剂选自无水硫酸钠或无水硫酸钙，优选为无水硫酸钠。5.如权利要求1所述的一种豆腐菜挥发油的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取新鲜豆腐菜洗净晾干后粉粹至粒径为60目，加入蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，蒸馏提取时间为5h，得含挥发油水系；其中，所述洗净晾干后的豆腐菜与蒸馏水的质量比为1：2；(2)向含挥发油水系中加入乙醚进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的乙醚溶液中加入无水硫酸钠脱水，过滤回收乙醚即得...

【专利技术属性】
技术研发人员：赖鹏翔，高阳，张瀚予，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东,37