一种酸性高比活木聚糖酶XYN11A及其基因和应用制造技术

技术编号:15629192 阅读:31 留言:0更新日期:2017-06-14 13:21
本发明专利技术公开了一种酸性高比活木聚糖酶XYN11A及其基因和应用。本发明专利技术涉及基因工程领域,具体地,本发明专利技术涉及一种酸性木聚糖酶XYN11A及其基因和应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术的木聚糖酶的具有以下性质:最适pH3.5,最适温度50℃,比活为4286U/mg;有效的降解大麦木聚糖、榉木木聚糖、桦木木聚糖,以及易于工业化发酵生产。作为一种新型的酶制剂,可广泛用于饲料,酿酒、食品工业等。

【技术实现步骤摘要】
一种酸性高比活木聚糖酶XYN11A及其基因和应用
本专利技术涉及基因工程领域,具体地,本专利技术涉及一种酸性木聚糖酶XYN11A及其基因和应用。
技术介绍
纤维素、半纤维素和木质素等是植物细胞壁的主要组成成分。半纤维素包括木聚糖,甘露聚糖,半乳聚糖等等,完全降解半纤维素举要多种酶的协同作用,其中木聚糖酶是一种切割β-1,4-糖苷键的主要酶类,在食品,饲料和纸浆工业等方面有广阔的应用前景。在啤酒酿造过程中,麦芽中的木聚糖造成啤酒过滤困难、堵塞过滤膜,增加了啤酒的生产成本和品质,采用酸性木聚糖酶和木聚糖酶协同作用,可以解决以上问题。在饲料制粒时,热稳定性优良的木聚糖酶可以较少的损失酶活,并在进食过程中辅助消化提高营养。而在纸浆漂白时,木聚糖酶可以替代部分有机氯化物,从而减少环境污染。由于不同工业对木聚糖酶性质需求不同,因此,获得新型具有优良特性木聚糖酶的研究仍具有重大意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能高效应用的酸性木聚糖酶。本专利技术的再一目的是提供编码上述酸性木聚糖酶的基因。本专利技术的另一目的是提供包含上述基因的重组载体。本专利技术的另一目的是提供包含上述基因的重组菌株。本专利技术的另一目的是提供一种制备上述酸性木聚糖酶的基因工程方法。本专利技术的另一目的提供上述酸性木聚糖酶的应用。本专利技术从青霉Penicilliumsp.L1中分离得到一种新的酸性木聚糖酶XYN11A。本专利技术提供了一种酸性木聚糖酶XYN11A,其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。SEQIDNO.1:MSLFKSLFVVSAAILGANALPGDYHKRQTITSSETGTSNGYYYSFWTNGGGTVDYTNGDGGEYSVSWEDCGDFTSGKGWATGSDRDITFSGSFNPSGNAYLSVYGWTTSPLVEYYILENYGDYNPGSSMTYKGTVTSDGSVYEIYEHQQVDQPSVSGTATFNQYWSIRQDTRSSGTVTTANHFDAWASLGMDLGTTFNYQIVSTEGYESSGSSTITVS其中,该酶基因编码218个氨基酸,N端19个氨基酸为其的信号肽序列“MSLFKSLFVVSAAILGANA”(SEQIDNO.3)。因此,成熟的酸性木聚糖酶Xyn11A的理论分子量为21.7kDa,其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示:LPGDYHKRQTITSSETGTSNGYYYSFWTNGGGTVDYTNGDGGEYSVSWEDCGDFTSGKGWATGSDRDITFSGSFNPSGNAYLSVYGWTTSPLVEYYILENYGDYNPGSSMTYKGTVTSDGSVYEIYEHQQVDQPSVSGTATFNQYWSIRQDTRSSGTVTTANHFDAWASLGMDLGTTFNYQIVSTEGYESSGSSTITVS本专利技术的木聚糖酶Xyn11A同时具有好的pH稳定性,并且常温下在pH2.0-5.0酸性范围内均具有高活性,其最适pH值为3.5,在pH1.5~8.0的范围内维持稳定;最适温度为50℃。本专利技术提供了编码上述酸性木聚糖酶XYN11A。具体地,该基因的基因组序列如SEQIDNO.4所示:ATGTCCCTTTTCAAGAGCTTATTCGTGGTTTCTGCTGCCATCCTAGGGGCCAATGCGCTTCCTGGTGATTACCACAAGCGGCAAACTATCACCTCTAGCGAAACCGGGACGAGCAATGGCTACTATTATTCGTTCTGGACCAACGGGGGTGGCACAGTGGATTATACAAACGGCGATGGAGGTGAATACAGCGTCAGCTGGGAAGACTGTGGTGATTTCACATCCGGAAAAGGCTGGGCAACTGGAAGTGACCGGGATATCACCTTTTCCGGGTCTTTCAATCCTTCTGGAAACGCCTATCTTTCCGTCTACGGCTGGACTACGAGCCCACTCGTTGAGTACTATATCCTCGAGAATTATGGCGATTATAACCCTGGCAGCTCGATGACGTACAAGGGAACGGTGACCAGCGACGGATCTGTCTATGAGATCTACGAGCACCAGCAGGTTGATCAGCCCTCTGTGTCTGGCACTGCTACTTTCAACCAATACTGGTCCATTCGACAGGATACCCGCTCAAGCGGTACCGTGACCACTGCTAATCATTTCGATGCTTGGGCTTCCCTTGGAATGGATCTAGGAACCACCTTCAACTATCAGATAGTATCTACTGAGGGATATGAGAGCAGTGGATCCTCAACAATCACAGTTTCATGA本专利技术通过PCR的方法分离克隆了木聚糖酶基因xyn11A,DNA全序列分析结果表明,木聚糖酶XYN11A结构基因xyn11A全长657bp。其中,信号肽的碱基序列为:ATGTCCCTTTTCAAGAGCTTATTCGTGGTTTCTGCTGCCATCCTAGGGGCCAATGCG(SEQIDNO.6)。成熟的木聚糖酶XYN11A的基因序列如SEQIDNO.5所示。SEQIDNO.5CTTCCTGGTGATTACCACAAGCGGCAAACTATCACCTCTAGCGAAACCGGGACGAGCAATGGCTACTATTATTCGTTCTGGACCAACGGGGGTGGCACAGTGGATTATACAAACGGCGATGGAGGTGAATACAGCGTCAGCTGGGAAGACTGTGGTGATTTCACATCCGGAAAAGGCTGGGCAACTGGAAGTGACCGGGATATCACCTTTTCCGGGTCTTTCAATCCTTCTGGAAACGCCTATCTTTCCGTCTACGGCTGGACTACGAGCCCACTCGTTGAGTACTATATCCTCGAGAATTATGGCGATTATAACCCTGGCAGCTCGATGACGTACAAGGGAACGGTGACCAGCGACGGATCTGTCTATGAGATCTACGAGCACCAGCAGGTTGATCAGCCCTCTGTGTCTGGCACTGCTACTTTCAACCAATACTGGTCCATTCGACAGGATACCCGCTCAAGCGGTACCGTGACCACTGCTAATCATTTCGATGCTTGGGCTTCCCTTGGAATGGATCTAGGAACCACCTTCAACTATCAGATAGTATCTACTGAGGGATATGAGAGCAGTGGATCCTCAACAATCACAGTTTCATGA成熟蛋白理论分子量为21.7kDa,本专利技术的木聚糖酶与来源于Penicilliumsp.40的木聚糖酶(xylanaseA)的性质有很大的差异,与Penicilliumsp.40来源的的木聚糖酶xylanaseA相比较,本专利技术的木聚糖酶XYN11A有更好的pH稳定性和热稳定性,且其比活性是xylanaseA的5倍,XYN11A更适于在饲料、食品等领域应用,且成本低廉。本专利技术还提供了包含上述酸性木聚糖酶基因XYN11A的重组载体,优选为pPIC-xyn11A。将本专利技术的木聚糖酶基本文档来自技高网...
一种酸性高比活木聚糖酶XYN11A及其基因和应用

【技术保护点】
一种酸性高比活木聚糖酶XYN11A,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种酸性高比活木聚糖酶XYN11A,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2所示。2.酸性高比活木聚糖酶基因XYN11A,其特征在于,编码权利要求1所述的酸性高比活木聚糖酶XYN11A。3.如权利要求2所述的酸性高比活木聚糖酶基因xyn11A,其特征在于,其碱基序列如SEQIDNO.4或SEQIDNO.5所示。4.包含权利要求3所述酸性高比活木聚糖酶基因xyn11A的重组载体。5.包含权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:李学军黄辉乔伟张金伟
申请(专利权)人:北京盛拓达生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:北京,11

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1