一种植物乳杆菌微生态制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开一种植物乳杆菌微生态制剂，该制剂的活性成分为植物乳杆菌Zhang‑LL；其中，所述植物乳杆菌Zhang‑LL的保藏号为：CGMCC No.6936。本发明专利技术还公开所述植物乳杆菌微生态制剂的制备方法和在降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血清谷丙转氨酶含量和脏器指数上以及提高血清IgG含量上的应用。本发明专利技术制备的植物乳杆菌微生态制剂活菌含量高，菌浓度可高达1×10

【技术实现步骤摘要】
一种植物乳杆菌微生态制剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生态制剂
更具体地，涉及一种植物乳杆菌微生态制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
随着生活水平的提升，人们对高营养食品的追求也越来越多，然而意味着这样的食品中的胆固醇含量偏高。大量流行病学调查、科学实验及临床干预已经证明，摄入过多胆固醇而导致的动脉粥样硬化，血脂水平升高等是各种心脑血管疾病的主要原因。人体在血脂长期处于高水平的情况下，会造成血管内膜功能性损伤，出现纤维斑块，继续发展会导致斑块出血、斑块破裂、局部血栓等，也会造成血管管腔狭窄甚至闭塞，严重会形成动脉瘤。降低血清中胆固醇的水平直接关系到人类的健康情况。很多研究者致力于降低人体血清中胆固醇含量的研究，防止相关疾病的发生，其中，包括控制饮食中胆固醇摄入，抑制自身合成或促进胆固醇的转化排泄等或者采用物理、化学方法去除食物中的胆固醇生物转化法脱除食品中的胆固醇等。目前，降低血脂的主要方法仍然是药物治疗，但是使用的大多数降血脂药物都有不同程度的副作用。因此，开发一种安全、无副作用的具有降胆固醇能力的植物乳杆菌微生态制剂具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种植物乳杆菌微生态制剂。本专利技术的第二个目的在于提供一种上述微生态制剂的制备方法。本专利技术的第三个目的在于提供一种上述微生态制剂的应用。为达到上述目的，本专利技术采用下述技术方案：一种植物乳杆菌微生态制剂，该制剂的活性成分为植物乳杆菌Zhang-LL；其中，所述植物乳杆菌Zhang-LL是专利技术人从发酵米粉中分离、选育得到，经中国普通微生物菌种保藏中心鉴定，并于2007年1月2日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心保藏(简称CGMCC)，保藏号为：CGMCCNo.6936。本专利技术进一步提供了上述植物乳杆菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)活化菌种：将植物乳杆菌Zhang-LL以1-3％(V/V)的接种量接种于MRS液体培养基，37℃培养16-18h，如此传代培养2-4次得到活化后的菌种；(2)扩大培养：将上述活化后的植物乳杆菌Zhang-LL以2-4％(V/V)的接种量接种于MRS液体培养基，37℃培养16-18h，得到扩大培养液；(3)离心浓缩与加入保护剂：离心扩大培养液，弃掉上清液，收集得到菌泥；将菌泥加入保护剂，混匀，得到浓缩发酵剂；(4)预冻、冻干：将上述浓缩发酵剂在0.16mBar真空度下-30℃预冻10h至完全冻结状态，得到预冻发酵剂；将上述预冻发酵剂于冻干温度-55℃、真空度0.16mBar条件下冻干48h至完全干燥状态，得到干粉微生态制剂。优选地，步骤(3)所述离心为4℃、8000-10000r/min离心8-12min。优选地，步骤(3)所述保护剂为甘油和谷氨酸钠，所述甘油和谷氨酸钠在菌泥中的终浓度均为2.5％。本专利技术还提供了植物乳杆菌Zhang-LL及其微生态制剂在降低总胆固醇含量、降低低密度脂蛋白胆固醇含量、降低血清谷丙转氨酶含量、提高血清IgG含量和降低脏器指数上的应用。本专利技术通过给SD大鼠饲喂高脂饲料，同时使用植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂灌胃进行人工干预，测定微生态制剂对SD大鼠血清总胆固醇、总甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量、血清谷丙转氨酶含量、血清IgG含量和脏器指数的影响。结果表明，植物乳杆菌Zhang-LL或由其制备的微生态制剂具有良好的降低血液中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量、提高血清IgG含量的能力，并且能够减轻由于高脂食物引起的肝脏功能损伤和由于摄食高脂食物引起的脏器指数升高，对肝脏具有较好的保护作用。本专利技术的有益效果如下：本专利技术制备的植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂活菌含量高，菌浓度可高达1×1010CFU/g，能有效降低胆固醇含量、提高免疫力，还能减轻由于高脂食物引起的肝脏功能损伤和由于摄食高脂食物引起的体重和肝重增加以及脏器指数的升高，是一剂具有良好功能及应用前景的微生态制剂。附图说明下面结合附图对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明。图1示出植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂对大鼠血清指标的影响；图2示出植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂对大鼠血清谷丙转氨酶含量的影响；图3示出植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂对大鼠血清IgG含量的影响。具体实施方式为了更清楚地说明本专利技术，下面结合优选实施例和附图对本专利技术做进一步的说明。附图中相似的部件以相同的附图标记进行表示。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本专利技术的保护范围。实施例1植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂的制备1、菌种活化将植物乳杆菌Zhang-LL以2％(V/V)的接种量接种于10mLMRS液体培养基，37℃培养16h。如此传代培养3次得到活化后的菌种。其中，所述的植物乳杆菌Zhang-LL为申请人从发酵米粉中分离、选育得到，经中国普通微生物菌种保藏中心鉴定，并于2007年1月2日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心保藏(简称CGMCC)，保藏号为：CGMCCNo.6936。2、扩大培养将上述活化后的植物乳杆菌Zhang-LL以3％(V/V)的接种量接种于装有500mLMRS培养基(胰蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母浸粉5.0g、柠檬酸三铵2.0g、葡萄糖20.0g、吐温801.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、硫酸镁0.5g、硫酸锰0.25g、水1L，pH6.5)的三角瓶中，37℃培养16h，得到扩大培养液。3、离心浓缩与加入保护剂将上述500mL液体发酵剂分装入离心瓶中，于4℃、8000r/min离心10min，弃掉上清液，收集得到菌泥；将菌泥加入2.5％甘油和2.5％谷氨酸钠，混匀，得到浓缩发酵剂。4、预冻、冻干将上述浓缩发酵剂在0.16mBar真空度下-30℃预冻10h至完全冻结状态，得到预冻发酵剂；利用真空冷冻干燥机，将上述预冻发酵剂于冻干温度-55℃、真空度0.16mBar条件下冻干48h至完全干燥状态，得到干粉微生态制剂。采用平板菌落计数法测定活菌数。结果表明，制备的植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂活菌数达到1×1010CFU/g菌粉。实施例2植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂功能分析1、样品制备将植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂用生理盐水稀释为1.0×108CFU/ml，4℃保藏。2、实验动物及分组实验使用5周龄雄性SD大鼠30只，体重152.26±9.17g。每单笼饲养，室温维持在23±2℃，相对湿度为55±5％，并且定时12小时光照和12小时黑暗。饲料和水由老鼠自由取食，高脂饲料配方如表1。适应一周后，将大鼠随机分为2组(高脂饲料组和高脂饲料+微生态制剂组)，每组15只，其中高脂饲料组SD大鼠喂食高脂饲料+灌胃生理盐水；高脂饲料+微生态制剂组SD大鼠喂食高脂饲料+灌胃植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂的菌液。表1大鼠高脂饲料成分表3、大鼠饲喂实验高脂饲料组按体重2ml/100g灌胃无菌生理盐水，Zhang-LL组按体重2ml/100g灌胃植物乳杆菌Zhang-LL微生态制剂菌液，每天一次灌胃。实验8周末，禁食12h后测定所有大鼠体重，麻醉后，对小鼠进行眼球采血，剂量为1mL，血液在室本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物乳杆菌微生态制剂，其特征在于：所述制剂的活性成分为植物乳杆菌Zhang‑LL，其保藏号为：CGMCC No.6936。

【技术特征摘要】
1.一种植物乳杆菌微生态制剂，其特征在于：所述制剂的活性成分为植物乳杆菌Zhang-LL，其保藏号为：CGMCCNo.6936。2.一种如权利要求1所述植物乳杆菌微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)活化菌种：将植物乳杆菌Zhang-LL以体积百分比为1-3％的接种量接种于MRS液体培养基，37℃培养16-18h，如此传代培养2-4次得到活化后的菌种；(2)扩大培养：将上述活化后的植物乳杆菌Zhang-LL以体积百分比为2-4％的接种量接种于MRS液体培养基，37℃培养16-18h，得到扩大培养液；(3)离心浓缩与加入保护剂：离心扩大培养液，弃掉上清液，收集得到菌泥；将菌泥加入保护剂，混匀，得到浓缩发酵剂；(4)预冻、冻干：将上述浓缩发酵剂在0.16mBar真空度下-30...

【专利技术属性】
技术研发人员：张红星，谢远红，刘慧，金君华，
申请(专利权)人：北京农学院，
类型：发明
国别省市：北京,11