知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法，其方法工艺为：（1）将知母须根粉碎，然后进行超临界流体萃取，得萃取液；（2）将萃取液浓缩、加水稀释为萃取物水溶液，然后加入二甲基亚砜和氯仿的混合溶剂，充分振荡进行萃取，取下层液进行浓缩干燥，即可得双苯吡酮类知母须根提取物。本方法采用二甲基亚砜与氯仿的混合溶剂萃取，充分利用二甲基亚砜既溶于水又溶于氯仿，而氯仿与水不互溶的理化性质，纯化效果更好，提取物含量更高。本发明专利技术采用超临界提取，提取效率更高，采用混合溶剂萃取进行纯化，纯化效率高，产品含量更高。

【技术实现步骤摘要】
知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法
本专利技术属于中药制药
，尤其是一种知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法。
技术介绍
知母为百合科(Liliacea)植物知母（AnemarrhenaasphodeloidesBge.）的干燥根茎，具有清热泻火、生津润燥的功效；现代药理研究表明其具有降血糖、抗老年痴呆等药理作用（丁蔚茅.知母宁抗乙肝病毒作用的实验研究[J].中国新技术新产品,2009(17):9.；LiTJ,etal.TimosaponinB-Ⅱimprovesmemoryandlearningdysfunctioninducedbycerebralischemiainrats[J].NeuroscienceLetters,2007，421:147-151.）。知母中化学成分主要为双苯吡酮类和甾体皂苷类，双苯吡酮类主要成分为新芒果苷、芒果苷和异芒果苷。芒果苷具有抗炎解热、降血糖等药理效应（邓家刚等，芒果苷对豚鼠肺组织释放慢反应物质的影响[J]，广西中医药,2008,31(3):58-59.），新芒果苷和异芒果苷具有芒果苷相似的药理作用，表明其具有潜在的药物开发价值。因此，对这些成分进行富集纯化具有一定经济价值和社会意义。采挖出来的知母药材上存在大量的知母须根，两年生的知母主根、须根的重量比约为3:2，三年生知母主根、须根的重量比约为2:1。全国每年知母产量约为4000吨，也就是说每年有2000～2600吨的知母须根被直接丢弃。这不仅造成了植物资源的重大浪费，也不利于生态环境的保护。有研究通过TLC表明知母须根与根茎的主要化学成分基本一致，只是含量上存在差异。知母根茎中知母皂苷的含量高于须根，但知母须根中芒果苷含量比根茎高。芒果苷含量为知母须根中最高，知母肉中次之，知母皮中最低（滕辉等，知母须根与根茎化学成分的对比分析[J]，中国中药杂志，1990,15(9):526-528.；郭晓晔等，采收加工方法对知母成分含量影响研究及北京市医疗机构知母饮片质量调查[J],北京中医药大学，2010）。目前中药提取主要采用溶剂回流提取或者浸提，纯化手段一般为大孔吸附树脂等，但存在纯化效果较差，提取物含量较低的不足之处。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种纯化效果好、提取物含量高的知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法。为解决上述技术问题，本专利技术所采取的方法工艺为：（1）将知母须根粉碎，然后进行超临界流体萃取，得萃取液；（2）将萃取液浓缩、加水稀释为萃取物水溶液，然后加入二甲基亚砜和氯仿的混合溶剂，充分振荡进行萃取，取下层液进行浓缩干燥，即可得双苯吡酮类知母须根提取物。本专利技术所述步骤（1）中的超临界流体萃取为：以CO2为溶剂、低级醇为夹带剂，CO2的流量为0.2～0.5L/min，萃取压力为10～50MPa，萃取温度为30～60℃，萃取2～5h。所述夹带剂为30～95wt%的低级醇。所述低级醇为甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇。本专利技术所述步骤（1）中，知母须根粉碎至20～40目。本专利技术所述步骤（2）中，二甲基亚砜与氯仿的体积比为1:20～1:1。本专利技术所述步骤（2）中，萃取物水溶液的浓度为0.10～0.15g/ml。本专利技术所述步骤（2）中，混合溶剂与萃取物水溶液的体积比为2:1～1:2。采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本专利技术采用二甲基亚砜与氯仿的混合溶剂萃取，充分利用二甲基亚砜即溶于水又溶于氯仿，而氯仿与水不互溶的理化性质，纯化效果更好，提取物含量更高。本专利技术采用超临界提取，提取效率更高，采用混合溶剂萃取进行纯化，纯化效率高，产品含量更高。本专利技术所用的原料为知母根茎上去除的须根，价格低廉，可大大提高知母的综合利用率，节省中药资源，产生良好的社会效益和经济价值。附图说明下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。图1是知母须根原料的UPLC-Q-TOF图谱；图2是本专利技术提取物的UPLC-Q-TOF图谱；图3是图2中横轴22～32段的局部放大图谱。具体实施方式实施例1：本知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法采用下述具体工艺。（1）知母主根去除的须根粉碎成20目，加入超临界流体萃取釜中，以CO2为溶剂，以95wt%的乙醇为夹带剂，CO2的流量为0.2L/min，萃取釜压力为10MPa，萃取釜温度为30℃，萃取5h，得萃取液。（2）将萃取液浓缩至无醇，加水稀释为浓度0.10g/mL的萃取物水溶液，向其中加入二甲基亚砜:氯仿=1:20（体积）的混合溶剂，混合溶剂:萃取物水溶液=2:1（体积），充分振荡进行萃取，取下层液进行浓缩干燥，得到双苯吡酮类知母须根提取物。所得提取物采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF)定性定量分析，UPLC-Q-TOF图谱见图2、图3；由图2、图3可见，所得提取物中含有新芒果苷、芒果苷和异芒果苷，三者含量之和为59.55wt%。实施例2：本知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法采用下述具体工艺。（1）知母主根去除的须根粉碎成30目，加入超临界流体萃取釜中，以CO2为溶剂，以50wt%的甲醇为夹带剂，CO2的流量为0.35L/min，萃取釜压力为30MPa，萃取釜温度为45℃，萃取3.5h，得萃取液。（2）将萃取液浓缩至无醇，加水稀释为浓度0.125g/mL的萃取物水溶液，向其中加入二甲基亚砜:氯仿=1:10（体积）的混合溶剂，混合溶剂:萃取物水溶液=1:1（体积），充分振荡进行萃取，取下层液进行浓缩干燥，得到双苯吡酮类知母须根提取物。所得提取物采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF)定性定量分析，其含有新芒果苷、芒果苷和异芒果苷，三者含量之和为58.32wt%。实施例3：本知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法采用下述具体工艺。（1）知母主根去除的须根粉碎成40目，加入超临界流体萃取釜中，以CO2为溶剂，以30wt%的正丙醇为夹带剂，CO2的流量为0.5L/min，萃取釜压力为50MPa，萃取釜温度为60℃，萃取2h，得萃取液。（2）将萃取液浓缩至无醇，加水稀释为浓度0.15g/mL的萃取物水溶液，向其中加入二甲基亚砜:氯仿=1:1（体积）的混合溶剂，混合溶剂:萃取物水溶液=1:2（体积），充分振荡进行萃取，取下层液进行浓缩干燥，得到双苯吡酮类知母须根提取物。所得提取物采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF)定性定量分析，其含有新芒果苷、芒果苷和异芒果苷，三者含量之和为58.48wt%。由上述实施例可见，本提取方法所得提取物采用UPLC-Q-TOF分析，首次鉴定出知母须根中不但含有新芒果苷和芒果苷，还含有异芒果苷，可见其纯化效率高、产品含量高。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法，其特征在于，其方法工艺为：（1）将知母须根粉碎，然后进行超临界流体萃取，得萃取液；（2）将萃取液浓缩、加水稀释为萃取物水溶液，然后加入二甲基亚砜和氯仿的混合溶剂，充分振荡进行萃取，取下层液进行浓缩干燥，即可得双苯吡酮类知母须根提取物。

【技术特征摘要】
1.一种知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法，其特征在于，其方法工艺为：（1）将知母须根粉碎，然后进行超临界流体萃取，得萃取液；（2）将萃取液浓缩、加水稀释为萃取物水溶液，然后加入二甲基亚砜和氯仿的混合溶剂，充分振荡进行萃取，取下层液进行浓缩干燥，即可得双苯吡酮类知母须根提取物。2.根据权利要求1所述的知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法，其特征在于，所述步骤（1）中的超临界流体萃取为：以CO2为溶剂、低级醇为夹带剂，CO2的流量为0.2～0.5L/min，萃取压力为10～50MPa，萃取温度为30～60℃，萃取2～5h。3.根据权利要求2所述的知母须根中双苯吡酮类化合物的提取方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄燕巧，薛强，额尔敦巴雅尔，李卫民，程鑫颖，
申请(专利权)人：晨光生物科技集团邯郸有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13