一种防治沟眶象的牛血清白蛋白‑苯氧威纳米药物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种防治沟眶象的牛血清白蛋白包裹苯氧威纳米药物的制备方法。所述的防治沟眶象的牛血清白蛋白包裹苯氧威的过程采用了物理包埋法。首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于双蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相。然后，在高速搅拌条件下，将油相逐滴加入水相中，乳化一段时间后，迅速冷却，超声粉碎得到超微乳液，冷却。最后，冷干得到苯氧威白蛋白纳米粒子。该方法采用的新型白蛋白纳米粒子制备技术是在不改变白蛋白结构的前提下，将药物包裹在白蛋白中，增加了载药量，同时也具有缓释的作用。利用纳米技术可以降低化学农药的用量、残留量、成本以及环境污染性，同时也可以提高药效、有效增加药剂与靶标害虫的接触面积，真正实现化学农药的高效、低毒、安全。

A preparation method of prevention and treatment of Eucryptorrhynchus bovine serum albumin fenoxycarb nano drug

The invention discloses a preparation method of a bovine serum albumin inclusion nano medicine for preventing and controlling the orbital image of a bull. The process of preparing bovine serum albumin by controlling the orbit of the orbital image is a physical embedding method. First of all, a certain amount of bovine serum albumin (BSA) was dissolved in two distilled water and treated as an aqueous phase. A certain amount of benzene was dissolved in acetonitrile to form an oil phase. Then, in the high-speed mixing, the oil phase drops into the water phase, and after a period of emulsification, it is cooled rapidly, and then the ultrafine emulsion is cooled by ultrasonic grinding. Finally, the cold dry benzene oxygen Granville white protein nanoparticles. The new technology for preparing albumin nanoparticles is that the drug is encapsulated in albumin without changing the structure of albumin, thus increasing the drug loading and releasing the drug. The use of chemical pesticides can reduce the amount of residues, nanotechnology, cost and environmental pollution, but also can improve the efficacy, effectively increase the contact area of the reagents and the target pests, high efficiency, low toxicity, realize chemical pesticide safety.

【技术实现步骤摘要】
一种防治沟眶象的牛血清白蛋白-苯氧威纳米药物的制备方法
本专利技术公开了一种防治沟眶象的牛血清白蛋白-苯氧威纳米药物的制备方法，苯氧威纳米粒的制备过程，属于生命科学、化学、纳米材料和新型农药

技术介绍
苯氧威，英文名Ethyl2-(4-phenoxyphenoxy)ethylcarbamate，分子式为C17H19NO4，苯氧威、双氧威或苯醚威，苯是具有保幼激素活性的非萜烯类昆虫生长调节剂类杀虫剂，最早由瑞士先正达公司在上个世纪九十年代投放市场，并被先正达列为二十一世纪的十几个保留品种之一。苯氧威纯品为无色结晶体，熔点53-54℃，溶解性(25℃时)：水5.7mg/Kg，丙酮、氯仿、乙醚乙酸乙酯、甲醇、异丙醇、甲苯等中大于250g/Kg。在pH3、7、9，50℃下水解稳定，对光稳定，低毒、高效，对环境无污染。具有杀虫谱广，对害虫高效，对哺乳动物低毒，对天敌无害，持效期长，对环境无污染等优点。由于苯氧威兼具二苯醚和氨基甲酸酯分子结构，使它有多种杀虫功能，具胃毒和触杀作用并对昆虫内分泌激素有多种调节功能。作用机制为：使昆虫无法蜕皮变态而逐渐死亡；抑制成虫期变态，从而造成后期或蛹期死亡；有较强的杀卵作用，可减少虫口数；可改变昆虫的胚胎发育、繁殖和性外激素。广泛应用于储粮害虫（米象、玉米象、谷象、赤拟谷盗、印度谷螟和麦蛾等）、森林害虫（松毛虫、沟眶象和杨树多种食叶害虫）、果树害虫（蒂蛀虫、荔枝蝽象、梨木虱和苹果黄蚜等）、果蔬害虫（菜青虫、菜蚜和潜叶蝇等）以及卫生害虫（白蚁、蟑螂、跳蚤和蚂蚁等）等多种类的害虫。白蛋白具有安全无毒、无免疫原性、可生物降解及生物相容性好等优点，是一种理想的给药系统载体材料。具有的可生物降解、无毒、无抗原性和生物利用度高等特点，白蛋白已受到了生物医药领域研究工作者的重视，被广泛用作诊断试剂和药物载体等。新型白蛋白纳米制备技术是在不改变白蛋白结构的前提下，将药物载入其中，混悬剂中药物以纳米级别的“纯药物”粒子形式存在，为难溶性、大剂量药物注射给药提供了一种新的途径。利用包埋技术把纯药物纳米粒子制成纳米生物农药微球，发挥纳米材料所特有的体积效应、表面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应，显著地提高药效，农药的传统施药方式是通过喷雾方式，通过这个过程80-90％的药物有效成分将流失到土壤和空气中，直接造成了农药的施药量加大、施药次数增加等。通过使用纳米技术将亚微米级的农药颗粒或液体包裹在一个惰性壳结构中或者搭载在一种大分子物质上，形成一种新型的纳米农药。真正做到化学农药使用的低浓度、低药量、低成本、低毒性、低抗性、低残留、广谱杀虫、高效以及对环境无污染。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种防治沟眶象的新型农药牛血清白蛋白-苯氧威纳米粒子的制备方法，该方法采用的新型白蛋白纳米制备技术是在不改变白蛋白结构的前提下，将药物载入其中，更易被吞食和吸收，更好地发挥触杀和胃毒作用，提高药效，降低用量，载药量大，具有控释能力，实现生物农药的高效、低毒、安全。目前，尚未有关纳米级苯氧威药物的研究报道。该方法具有可以使农药产品微型化，降低成本，可达到“低消耗、高效益”的可持续发展目的，实现资源利用的持续化。本专利技术的上述目的在于通过以下技术方案实现：牛血清白蛋白包裹苯氧威的过程采用了乳化固化法，白蛋白纳米粒作为一种药物载体，无免疫原性、生物相容性好。所述的牛血清白蛋白包裹苯氧威的过程采用了乳化固化法。首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于双蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相。然后，在高速搅拌条件下，将油相逐滴加入水相中，乳化一段时间后，迅速冷却，超声粉碎得到超微乳液，冷却。最后，冷干得到苯氧威白蛋白纳米粒子。该方法采用的新型白蛋白纳米粒子制备技术是在不改变白蛋白结构的前提下，将药物包裹在白蛋白中，增加了载药量，同时也具有缓释的作用。具体步骤如下：（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于双蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超声溶解5-20min，配制成2-15mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）将水相调节转速1000-5000rpm，高速搅拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30-60min，取出乳液迅速于0-4℃下冷却5-10min，然后取出超声5-20min，得到牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液；（4）将牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液经透析膜（MWCO=5000）透析过夜12h；（5）将透析液取出并冷冻，冷干得到白色粉末，即牛血清白蛋白-苯氧威纳米粒。所述的牛血清白蛋白包裹对象苯氧威，为疏水性药物，也同样适用于其他疏水性药物如噻虫啉，阿维菌素等。所述的乳化固化法是指将油相药物加入到水相白蛋白中，高速搅拌下，形成水包油的纳米粒，冰浴后超声形成稳定的、均匀的超微乳，透析，冷冻，冷干得牛血清白蛋白-苯氧威纳米粒。步骤（2）中的苯氧威也可换做其他药物替代，其包裹方法也可适用。步骤（2）中的乙腈也可用乙醚、二氯甲烷、氯仿、二甲基亚砜、石油醚、乙醇、甲醇等多种有机溶剂替代。步骤（2）中的超声时间5-20min，所得到的纳米粒粒径均匀，分散性好。步骤（3）中的乳化过程时间30-60min，时间太短乳化不充分，太长会导致更多的聚集。本专利技术具有以下优点：（1）本专利技术的反应机理是水相在高速旋转的状态下逐滴加入油相，产生水包油乳滴。（2）白蛋白本身具有可生物降解、无毒、无抗原性和生物利用度高等特点，药物载入其中，更易被吞食和吸收，更好地发挥触杀和胃毒作用，提高药效。（3）白蛋白纳米粒的载药量大，具有控释能力，实现生物农药的高效、低毒、安全。（4）本专利技术不需要特殊的化学试剂，工艺简单，设备要求低，绿色环保，低制造成本。附图说明图1为牛血清白蛋白-苯氧威纳米粒子的SEM图。图2为牛血清白蛋白-苯氧威纳米农药防治沟眶象的效果。具体实施方式（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于双蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超声溶解5-20min，配制成2-15mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）将水相调节转速1000-5000rpm，高速搅拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30-60min，取出乳液迅速于0-4℃下冷却5-10min，然后取出超声5-20min，得到牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液；（4）将牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液经透析膜（MWCO=5000）透析过夜12h；（5）将透析液取出并冷冻，冷干得到白色粉末，即牛血清白蛋白-苯氧威纳米粒；（6）将得到的牛血清白蛋白-苯氧威纳米粒溶于纯净水中，装载到小型喷雾器中，并喷到沟眶象的食物上，观察沟眶象的死亡情况。沟眶象的死亡情况见图2。实施例1（1）取0.08g牛血清白蛋白于4ml双蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）另取1mg苯氧威，加入0.167ml乙腈超声溶解5min，配制成6mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）将水相调节转速1000rpm，高速搅拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30min，取出乳液迅速于0-4℃下冷却10min，然后取出超声10min，得到牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液；（本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种防治沟眶象的牛血清白蛋白‑苯氧威纳米药物的制备方法，其特征在于：所述的牛血清白蛋白包裹苯氧威的过程采用了乳化固化法，首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于双蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相，然后，在高速搅拌条件下，将油相逐滴加入水相中，乳化一段时间后，迅速冷却，超声粉碎得到超微乳液，冷却，最后，冷干得到苯氧威白蛋白纳米粒子，该方法采用的新型白蛋白纳米粒子制备技术是在不改变白蛋白结构的前提下，将药物包裹在白蛋白中，增加了载药量，同时也具有缓释的作用，具体步骤如下：（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于双蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超声溶解5‑20min，配制成2‑15mg/mL的苯氧威‑乙腈油相；（3）将水相调节转速1000‑5000 rpm，高速搅拌下逐滴加入苯氧威‑乙腈油相，乳化30‑60min，取出乳液迅速于0‑4℃下冷却5‑10min，然后取出超声5‑20min，得到牛血清白蛋白‑苯氧威超微乳液；（4）将牛血清白蛋白‑苯氧威超微乳液经透析膜（MWCO=5000）透析过夜12h；（5）将透析液取出并冷冻，冷干得到白色粉末，即牛血清白蛋白‑苯氧威纳米粒。...

【技术特征摘要】
1.一种防治沟眶象的牛血清白蛋白-苯氧威纳米药物的制备方法，其特征在于：所述的牛血清白蛋白包裹苯氧威的过程采用了乳化固化法，首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于双蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相，然后，在高速搅拌条件下，将油相逐滴加入水相中，乳化一段时间后，迅速冷却，超声粉碎得到超微乳液，冷却，最后，冷干得到苯氧威白蛋白纳米粒子，该方法采用的新型白蛋白纳米粒子制备技术是在不改变白蛋白结构的前提下，将药物包裹在白蛋白中，增加了载药量，同时也具有缓释的作用，具体步骤如下：（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于双蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超声溶解5-20min，配制成2-15mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）将水相调节转速1000-5000rpm，高速搅拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30-60min，取出乳液迅速于0-4℃下冷却5-10min，然后取出...

【专利技术属性】
技术研发人员：温俊宝，季英超，刘彦雪，雷建都，代娟，王英飒，朱蓬勃，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11