The invention discloses a method for preparing a self-assembled protein multilayer film, which belongs to the technical field of preparation of biological medical materials. The preparation method comprises four steps, namely, the preparation of a self-assembled multilayer film substrate, the preparation of a plant polyphenol solution, the configuration of a protein solution, and the preparation of a self-assembled multilayer film. The invention changes the deposition process of the prior art simply relying on electrostatic action, and adopts the strong intermolecular hydrogen bonding action of the plant polyphenols and proteins superior to the electrostatic force to act as the driving force of the deposition process. The main part of the self-assembled film does not use polycation, which can effectively reduce the damage caused by the multilayer polycation in the conventional self-assembled film. The multilayer film is mainly composed of plant polyphenols and proteins, and has good biocompatibility. It can promote the adhesion, growth and proliferation of human cells. The self assembled multilayer film is decorated on the surface of the implanted material of the human body, and the biocompatibility of the implanted material can be remarkably improved, and the application prospect is very wide.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医用材料领域,具体是指一种自组装蛋白质多层膜制备方法。
技术介绍
层层自组装技术是一种有效制备薄膜的方法,可适用于多种材料的组装,操作简单,易于控制。其中聚电解质层层自组装技术是通过将基底在阴阳离子聚电解质溶液中交替浸泡,从而在基底表面制备聚电解质薄膜。自组装过程的结合力主要包括共价键,配位键,电荷转移,氢键和静电引力等形式的作用力。层层自组装技术可以实现在玻璃,钛合金,陶瓷,石英,单晶硅片,云母,金,银,氧化铝以及聚合物等底上的组装,并且基底形状不受限制。随着组织工程的发展,组装工程材料表面的生物相容性的改善已成为生物医用材料研究的一个关键问题。而层层自组装由于具有温和的组装条件,对生物分子和基材的广泛适应性及其能在纳米和亚微米尺度设计的可调性等优点,已经越来越多地被应用于组织工程材料的表面改性中。目前,层层自组装技术得到了很大发展,制备自组装膜的聚合物也从聚电解质扩展到蛋白质,DNA,染料分子,纳米颗粒,胶束等等。通过层层自组装技术把蛋白质直接固定在材料表面,使材料的细胞相容性明显提高,这类研究已成为生物材料研究中的热点。采用人为的方式形成材料-蛋白质复合层,改善细胞在材料表面的吸附及生长性能,是一种简单有效的方法。静电引力作用的自组装物质需带电荷,限制了蛋白膜自组装过程对材料的选择。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足,而提供一种自组装蛋白质多层膜制备方法,本专利技术利用植物多酚和蛋白质分子间的氢键作用,采用层层自组装的方法,制备多种具有生物活性的多层蛋白膜。为实现上述目的,本专利技术的技术方案是包括如下 ...
【技术保护点】
一种自组装蛋白质多层膜制备方法,其特征在于包括如下步骤:(1) 自组装膜的基材预处理将基材进行表面处理后,浸入到浓度为0.001~10g/L的阳离子聚电解质溶液中自组装形成底层;(2)植物多酚水溶液的配制在缓冲溶液中,调节pH 1‑14,依次加入,氯化钠,抗坏血酸和植物多酚,搅拌至完全溶解,配置成浓度为0.01~100mg/mL的植物多酚水溶液;(3)蛋白质水溶液的配制在缓冲溶液中,调节pH 1‑14,依次加入,氯化钠,抗坏血酸和蛋白质,搅拌至完全溶解,配置成浓度为0.01~100mg/mL的蛋白质水溶液;(4) 自组装多层膜的制备把经过步骤(1)处理基材浸入到经过步骤(2)制备的植物多酚的水溶液中,平衡吸附后用步骤(2)中缓冲溶液洗去游离的植物多酚,再浸入到经过步骤(3)制备的蛋白质水溶液中,平衡吸附后用步骤(3)中缓冲溶液洗去游离的蛋白质,利用植物多酚与蛋白质通过氢键作用进行层层自组装;(5)多次循环操作步骤(4),得到自组装蛋白质多层膜。
【技术特征摘要】
1.一种自组装蛋白质多层膜制备方法,其特征在于包括如下步骤:(1)自组装膜的基材预处理将基材进行表面处理后,浸入到浓度为0.001~10g/L的阳离子聚电解质溶液中自组装形成底层;(2)植物多酚水溶液的配制在缓冲溶液中,调节pH1-14,依次加入,氯化钠,抗坏血酸和植物多酚,搅拌至完全溶解,配置成浓度为0.01~100mg/mL的植物多酚水溶液;(3)蛋白质水溶液的配制在缓冲溶液中,调节pH1-14,依次加入,氯化钠,抗坏血酸和蛋白质,搅拌至完全溶解,配置成浓度为0.01~100mg/mL的蛋白质水溶液;(4)自组装多层膜的制备把经过步骤(1)处理基材浸入到经过步骤(2)制备的植物多酚的水溶液中,平衡吸附后用步骤(2)中缓冲溶液洗去游离的植物多酚,再浸入到经过步骤(3)制备的蛋白质水溶液中,平衡吸附后用步骤(3)中缓冲溶液洗去游离的蛋白质,利用植物多酚与蛋白质通过氢键作用进行层层自组装;(5)多次循环操作步骤(4),得到自组装蛋白质多层膜。2.根据权利要求1所述的一种自组装蛋白质多层膜的制备方法,其特征在于,阳离子聚电解质为聚乙烯亚胺或聚烯丙胺盐酸盐。3.根据权利要求1所述的自组装蛋白质多层膜制备方法,其特征在于:所述缓冲溶液为1~100MmNa2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液或1~100Mm醋酸-醋酸钠缓冲液或1~100MmHEPES缓冲溶液的一种。4.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:昝兴杰,杨硕硕,
申请(专利权)人:温州生物材料与工程研究所,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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