一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法技术

本发明专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法。该方法以茜草藤药材为检测对象，建立了茜草藤药材的指纹图谱的方法，确认了共有特征峰1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰和6号峰芦丁，选择6号峰芦丁作为指纹图谱中的内参考峰，确定了各共有特征峰的相对保留时间，且通过结合该指纹图谱中多个色谱峰的信息，能够全面地、快速地检测茜草藤药材的质量，有利于其全面质量检测和整体质量控制，从而有助于提高该药物使用的安全性和稳定性。同时，本发明专利技术建立的茜草藤药材的指纹图谱的方法具有精密度高、重复性好、稳定性高等优点。

Method for establishing fingerprint of medicinal herb of madder vine

The invention belongs to the field of pharmaceutical analysis, in particular to a fingerprint chromatogram method for establishing medicinal herbs of madder vine. This method takes the medicine Rubia cordifolia as research object, establishes the method of fingerprint madder recisa Pierre, confirmed a total of peak peak 1, peak 2, peak 3, peak 4, peak 5 and peak 6 rutin, 6 peaks in the fingerprints of rutin as reference test peak, determine the common characteristic peaks and the relative retention time, and by combining multiple peaks in the fingerprint information, comprehensive and rapid detection of the quality of medicinal materials of Rubia cordifolia, is conducive to the comprehensive quality inspection and overall quality control, which is helpful to improve the drug use safety and stability. At the same time, the fingerprint chromatogram of the medicinal herb of the madder vine has the advantages of high precision, good repeatability and high stability.

【技术实现步骤摘要】
一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法
本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法。
技术介绍
茜草藤为茜草科茜草属植物茜草R.cordifoliaL.或东南茜草R.argyi(Lévl.etVan.)HaraexL.A.LaueneretD.K.Ferguson的干燥地上部分，茜草藤作药用最早记载于《履巉岩本草》，陕西汉中市以及河南南阳市的民间将茜草藤水煮后用于治疗小儿腹泻、并广为流传，西安医科大学第一附属医院儿科将其作为临床医院制剂使用已有十多年。目前的茜草藤药材标准为1997年收载于安徽省药品标准中(皖Q/WS-01-97)的标准，通过鉴别和浸出物含量测定来检测其质量。近年来，国内外的研究主要是关于地下部分的茜草，对地上部分茜草藤的研究文献很少，陈战国等对茜草藤的生药学进行了一定的研究(中草药，2001，32(2)：157-159.)，研究中指出，茜草藤主要含有皂苷、多糖、黄酮类、酚类、微量元素等化学成分，但并没有明确具体成分。从上述可知，目前茜草藤质量研究方面的相关信息有限，仅有少量性状、显微、理化薄层鉴别研究等，还有待进一步完善。一方面，由于茜草藤药材的同属植物较多、相互之间不易鉴别，产地对茜草藤药材所含的化学成分的种类和各化学成分的含量等也有一定的影响，通过现行标准控制茜草藤药材的质量过于单一、片面，不能从整体上全面反映茜草藤药材的质量，进而导致质量检测结果可能缺乏客观性和准确性，从而无法保证茜草藤药材临床用药的有效性和安全性；另一方面，通过鉴别和浸出物含量测定联合来检测茜草藤药材的质量，费时、费力，难以广泛地应用于生产实践。因而，建立一种能够全面地、快速地检测茜草藤药材的质量的方法，对于其全面质量检测和整体质量控制具有重要意义。
技术实现思路
为此，本专利技术要解决的第一个技术问题是茜草藤药材的质量检测方法不能从整体上全面反映茜草藤药材的质量、进而导致质量检测结果可能缺乏客观性和准确性、从而无法保证茜草藤药材临床用药的安全性和有效性的问题，本专利技术要解决的第二个技术问题是现有的茜草藤药材的质量检测方法费时、费力，难以广泛地应用于生产实践的问题，从而提供一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法。为解决上述技术问题，本专利技术是通过以下技术方案来实现的：本专利技术提供一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法，该方法包括如下步骤：(1)取待测茜草藤药材0.5～5.0重量份，精密称定，精密加入体积分数为20％～100％的甲醇水溶液25～100体积份，称定重量，超声提取15～60分钟，放冷，再称定重量，用体积分数为20％～100％的甲醇水溶液补足损失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；(2)精密称取芦丁对照品，加甲醇制成每1体积份含0.00005～0.00020重量份的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以体积分数为0.05％～0.5％的磷酸水溶液为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0～5min，A：B为5％：95％；5～40min，A：B为5％：95％→20％：80％；40min，A：B为20％：80％；40～55min，A：B为20％：80％→40％：60％；55min，A：B为40％：60％；55～60min，A：B为40％：60％→80％：20％；60min，A：B为80％：20％；60～70min，A：B为80％：20％；70min，A：B为80％：20％；70～75min，A：B为80％：20％→5％：95％；检测波长为218～222nm，柱温25～40℃，流速为0.5～1.5mL/min；(4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液5～20μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱；(5)利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液和对照品溶液的液相色谱分别经过数据导入、多点校正和数据匹配，即得指纹图谱；所述重量份与所述体积份的关系为g/mL。优选地，上述建立茜草藤药材的指纹图谱的方法，该方法包括如下步骤：(1)取待测茜草藤药材0.5～2.0重量份，精密称定，精密加入体积分数为30％～70％的甲醇水溶液25～50体积份，称定重量，超声提取20～30分钟，放冷，再称定重量，用体积分数为30％～70％的甲醇水溶液补足损失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；(2)精密称取芦丁对照品，加甲醇制成每1体积份含0.00005～0.00015重量份的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以体积分数为0.05％～0.20％的磷酸水溶液为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0～5min，A：B为5％：95％；5～40min，A：B为5％：95％→20％：80％；40min，A：B为20％：80％；40～55min，A：B为20％：80％→40％：60％；55min，A：B为40％：60％；55～60min，A：B为40％：60％→80％：20％；60min，A：B为80％：20％；60～70min，A：B为80％：20％；70min，A：B为80％：20％；70～75min，A：B为80％：20％→5％：95％；检测波长为220nm，柱温为30～35℃，流速为0.8～1.2mL/min；(4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液5～15μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱；(5)利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液和对照品溶液的液相色谱分别经过数据导入、多点校正和数据匹配，即得指纹图谱。进一步优选地，上述建立茜草藤药材的指纹图谱的方法，该方法包括如下步骤：(1)取待测茜草藤药材1.0重量份，精密称定，精密加入体积分数为50％的甲醇水溶液25体积份，称定重量，超声提取30分钟，放冷，再称定重量，用体积分数为50％的甲醇水溶液补足损失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；(2)精密称取芦丁对照品，加甲醇制成每1体积份含0.00010重量份的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以体积分数为0.1％的磷酸水溶液为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0～5min，A：B为5％：95％；5～40min，A：B为5％：95％→20％：80％；40min，A：B为20％：80％；40～55min，A：B为20％：80％→40％：60％；55min，A：B为40％：60％；55～60min，A：B为40％：60％→80％：20％；60min，A：B为80％：20％；60～70min，A：B为80％：20％；70min，A：B为80％：20％；70～75min，A：B为80％：20％→5％：95％；检测波长为220nm，柱温为30℃，流速为1.0mL/min；(4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱；(5)利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液和对照品溶液的液相色谱分别经过数据导入、多点校正和数据匹配，即得指纹图谱。进一步优本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)取待测茜草藤药材0.5～5.0重量份，精密称定，精密加入体积分数为20％～100％的甲醇水溶液25～100体积份，称定重量，超声提取15～60分钟，放冷，再称定重量，用体积分数为20％～100％的甲醇水溶液补足损失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；(2)精密称取芦丁对照品，加甲醇制成每1体积份含0.00005～0.00020重量份的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以体积分数为0.05％～0.5％的磷酸水溶液为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0～5min，A：B为5％：95％；5～40min，A：B为5％：95％→20％：80％；40min，A：B为20％：80％；40～55min，A：B为20％：80％→40％：60％；55min，A：B为40％：60％；55～60min，A：B为40％：60％→80％：20％；60min，A：B为80％：20％；60～70min，A：B为80％：20％；70min，A：B为80％：20％；70～75min，A：B为80％：20％→5％：95％；检测波长为218～222nm，柱温25～40℃，流速为0.5～1.5mL/min；(4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液5～20μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱；(5)利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液和对照品溶液的液相色谱分别经过数据导入、多点校正和数据匹配，即得指纹图谱；所述重量份与所述体积份的关系为g/mL。...

【技术特征摘要】
1.一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)取待测茜草藤药材0.5～5.0重量份，精密称定，精密加入体积分数为20％～100％的甲醇水溶液25～100体积份，称定重量，超声提取15～60分钟，放冷，再称定重量，用体积分数为20％～100％的甲醇水溶液补足损失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；(2)精密称取芦丁对照品，加甲醇制成每1体积份含0.00005～0.00020重量份的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以体积分数为0.05％～0.5％的磷酸水溶液为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0～5min，A：B为5％：95％；5～40min，A：B为5％：95％→20％：80％；40min，A：B为20％：80％；40～55min，A：B为20％：80％→40％：60％；55min，A：B为40％：60％；55～60min，A：B为40％：60％→80％：20％；60min，A：B为80％：20％；60～70min，A：B为80％：20％；70min，A：B为80％：20％；70～75min，A：B为80％：20％→5％：95％；检测波长为218～222nm，柱温25～40℃，流速为0.5～1.5mL/min；(4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液5～20μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱；(5)利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液和对照品溶液的液相色谱分别经过数据导入、多点校正和数据匹配，即得指纹图谱；所述重量份与所述体积份的关系为g/mL。2.根据权利要求1所述的建立茜草藤药材的指纹图谱的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)取待测茜草藤药材0.5～2.0重量份，精密称定，精密加入体积分数为30％～70％的甲醇水溶液25～50体积份，称定重量，超声提取20～30分钟，放冷，再称定重量，用体积分数为30％～70％的甲醇水溶液补足损失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；(2)精密称取芦丁对照品，加甲醇制成每1体积份含0.00005～0.00015重量份的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以体积分数为0.05％～0.2％的磷酸水溶液为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0～5min，A：B为5％：95％；5～40min，A：B为5％：95％→20％：80％；40min，A：B为20％：80％；40～55min，A：B为20％：80％→40％：60％；55min，A：B为40％：60％；55～60min，A：B为40％：60％→80％：20％；60min，A：B为80％：20％；60～70min，A：B为80％：20％；70min，A：B为80％：20％；70～75min，A：B为80％：20％→5％：9...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦海军，张慧，马雨涵，楚庆霞，吴艳芳，于波，
申请(专利权)人：合肥华润神鹿药业有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34