The invention relates to the field of functional materials, provides a method for fluorescence detection of DNA composite nanoparticles preparation and detection methods, the nanocomposites prepared by co precipitation. The preparation method comprises the following steps: the side chain modification base conjugated oligomeric polymer dissolved in an organic solvent, to obtain solution A; the oligonucleotides modified fluorescent dye dissolved in pure water, get the solution A solution B; rapid injection of B solution and mixed filtering to obtain fluorescent composite nanoparticles; the tested DNA composite nanoparticles were added after the change of fluorescence signal observation, detection of different bases to DNA. The system overcomes the preparation of nanoparticles for detection system of existing DNA complex, high cost and low sensitivity, has unique fluorescent properties and good biological compatibility, and has good practical value in the field of biological detection.
【技术实现步骤摘要】
用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备及检测方法
本专利技术涉及功能复合材料
,特别涉及一种用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备及检测方法。
技术介绍
DNA检测在临床诊断、基因变异识别、医学研究等领域显示出良好的应用前景,引起了广泛关注。用于DNA检测的方法包括PCR检测技术,免疫测定,质谱法等,虽然这些方法很方便,但它们的检测限较低,限制了其应用。其中,光学检测法以其高灵敏度、操作简单、实时检测等优势发展较快。常用于DNA检测的光学材料包括金纳米粒子,量子点,荧光共轭聚合物等,其中控制金纳米粒子形貌以及改善量子点的生物相容性较为复杂。荧光共轭聚合物具有“分子导线”效应,相对于其他材料可以成倍的提高检测灵敏度。目前已有报道表明,利用阳离子型水溶性共轭聚合物同荧光分子标记的核苷酸探针之间的荧光共振能量转移效应实现检测信号的放大。近年来,基于共轭聚合物的荧光纳米粒子已发展成为基因检测和生物分析的有效工具。共轭聚合物易于亲水性修饰和功能化处理,其中由较少的结构单元组成的共轭寡聚物,分子量介于小分子和共轭聚合物之间。它既具有小分子结构可控、易纯化等优点,又具有共轭聚合物的高稳定性。共轭寡聚物共轭结构规整,因此具有独特的光电性能。其自组装形成的纳米粒子在细胞内拥有亮度高和光稳定性好等优点,因此,制备一种简单实用,能够灵敏检测DNA的荧光复合纳米粒子是十分必要的。基于以上现状,专利技术一种新型荧光复合纳米粒子用于基因检测,将染料标记的寡核苷酸序列与荧光共轭寡聚物复合形成纳米粒子,利用荧光共振能量转移效应实现不同碱基数目的DNA的检测对生物检测领域具有十分重要 ...
【技术保护点】
一种用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、将侧链修饰有碱基的共轭寡聚物溶于有机溶剂中,得到溶液A;将染料标记的寡核苷酸序列溶于超纯水中,得到溶液B;步骤二、将溶液A快速注入溶液B,混合均匀,用过滤膜过滤即得到含有荧光复合纳米粒子的溶液C。
【技术特征摘要】
1.一种用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、将侧链修饰有碱基的共轭寡聚物溶于有机溶剂中,得到溶液A;将染料标记的寡核苷酸序列溶于超纯水中,得到溶液B;步骤二、将溶液A快速注入溶液B,混合均匀,用过滤膜过滤即得到含有荧光复合纳米粒子的溶液C。2.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法,其特征在于,步骤一中,所述侧链修饰有碱基的共轭寡聚物选自具有式(1)-(4)的荧光共轭寡聚物中的一种或多种:3.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法,其特征在于,步骤一中,所述有机溶剂为四氢呋喃、甲醇、丙酮、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺的一种或多种。4.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法,其特征在于,步骤一中,用于标记所述寡核苷酸序列的染料为RhodamineB,TexasRed,X-rhodamine,Naphthofluorescein,Cy3,Cy3.5,Cy5中的一种。5.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法,其特征在于,步骤一中,所述染料标记的寡核苷酸序列碱基数目为5-10个。6.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法,其特征在于,步骤一中,所述溶液A的浓度为1-2×10-3M;所述溶液B的浓度为1-2×10-...
【专利技术属性】
技术研发人员:李立东,王晓瑜,刘录,朱书贤,
申请(专利权)人:北京科技大学,
类型:发明
国别省市:北京,11
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