一种分离和/或检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯的方法技术

技术编号:15540313 阅读:62 留言:0更新日期:2017-06-05 10:15
本申请公开了一种分离和/或检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯的方法,所述方法为高效液相色谱法,具体包括如下步骤:供试品溶液与对照品溶液的配制;所用色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶;色谱分离检验条件,柱温:30~40℃,流动相流速0.9~1.3mL/min,左氧氟沙星与羟苯甲酯的紫外检测波长分别为240~260nm、280~300nm;检测:分别精密吸取供试品与对照品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,读取供试品左氧氟沙星与羟苯甲酯的色谱峰面积。该方法可以准确、快速同时测定盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯的含量,为盐酸左氧氟沙星眼用凝胶的质量可控性提供保障。

A method for separation and detection of Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel and / or agent of levofloxacin and methylparaben.

The invention discloses a method for separating and / or detection of Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel agent levofloxacin and methylparaben, the method for high performance liquid chromatography, and includes the following steps: sample solution and reference solution; chromatographic column of eighteen alkyl silane bonded silica chromatographic separation; testing conditions, column temperature: 30 to 40 DEG C, the flow rate of 0.9 ~ 1.3mL/min, the UV detection wavelength of levofloxacin and methylparaben were 240 ~ 260nm, 280 ~ 300nm; detection precision: from the experimental sample and control sample solution 10 L, HPLC, reading test the peak area product of levofloxacin and methylparaben. The content of this method can be accurate, rapid and simultaneous determination of levofloxacin and Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel agent methylparaben, to provide protection for the quality control of Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel.

【技术实现步骤摘要】
一种分离和/或检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯的方法
本申请涉及一种分离盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯,和/或检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯含量的方法,属于药物分析

技术介绍
氟喹诺酮类代表药物氧氟沙星的左旋异构体,抗菌谱广,对需氧革兰氏阳性菌和阴性菌均具有较强杀灭作用,因此,国内外制药企业利用其良好的杀菌作用制备出眼用凝胶剂。该凝胶剂具有水溶性好,附着性强,溶出度高,无油腻感和皮肤、粘膜刺激性,作用持久等特点,可用于眼部细菌性感染疾病的治疗。羟苯甲酯是国际上公认的广谱性高效食品防腐剂。羟苯甲酯,又称对羟基苯甲酸甲酯,为白色结晶粉末或无色结晶,易溶于醇,醚和丙酮,极微溶于水,沸点270~280℃,分子量为152.15。羟苯甲酯主要用作有机合成、食品、化妆品、医药的杀菌防腐剂,也用作于饲料防腐剂。为了保证盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂在规定时间内的质量稳定性,在制备的过程中需要加入一定量的羟苯甲酯防腐剂。然而,在眼用凝胶剂中羟苯甲酯的浓度过高,容易对患者的身体产生有害作用,而羟苯甲酯的浓度过低,则无法保证有效期内盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂的质量属性。因此,需要严格控制眼用凝胶剂中的羟苯甲酯的含量。现有技术中,尚未有检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中羟苯甲酯含量的方法,为了更好的控制盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中羟苯甲酯的含量,以保证该凝胶剂的安全性和质量属性,同时确定制剂中左氧氟沙星的有效含量,研究一种简便、快速、专属性高、检测限低及准确度与精密度良好的能够同时检测左氧氟沙星与羟苯甲酯含量的分析方法,是亟待解决的技术问题。
技术实现思路
本申请的目的在于提供一种分离和/或检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯的方法,该方法可以准确、快速地同时测定盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯含量,为盐酸左氧氟沙星眼用凝胶的质量可控性提供保障。为了实现上述目的,本申请采用的技术方案如下:一种分离和/或检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯含量的方法,所述方法为高效液相色谱法,具体包括如下步骤:(1)配制供试品溶液、左氧氟沙星对照品溶液与羟苯甲酯对照品溶液;(2)色谱条件:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶;水相为3.0~4.0mg/mL醋酸铵和5.0~6.0mg/mL高氯酸钠的混合溶液,所述混合溶液pH为2.1~2.5;色谱流动相包括流动相A和流动相B,其中所述流动相A为体积比为10:90~16:84的乙腈与所述水相的溶液,所述流动相B为乙腈;色谱分离及和/或检测条件:柱温为35~40℃,流动相流速为0.9~1.3mL/min,所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星的紫外检测波长为280~300nm,所述羟苯甲酯的紫外检测波长为240~260nm;(3)操作:分别精密吸取所述供试品溶液与所述对照品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,并分别读取供试品溶液中左氧氟沙星的色谱峰面积A供1与羟苯甲酯的色谱峰面积A供2,以及对照品左氧氟沙星的色谱峰峰面积A对1与羟苯甲酯的色谱峰峰面积A对2,并用下式:计算出所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星的含量w左氧氟沙星与羟苯甲酯的含量w羟苯甲酯。优选地,步骤(1)中,用极性溶液将所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂稀释成为浓度0.09~0.16mg/mL的溶液从而获得供试品溶液;用极性溶液将所述左氧氟沙星稀释成为浓度为0.087~0.15mg/mL的溶液,用极性溶液将所述与羟苯甲酯稀释成为浓度为0.010~0.018mg/mL的溶液,从而分别获得对照品溶液。优选地,所述极性溶液为纯化水或0.1mol/L盐酸。优选地,步骤(2)中,所述水相溶液中醋酸铵的浓度为3.2~3.5mg/mL,高氯酸钠的浓度为5.0~5.5mg/mL。优选地,所述水相溶液的pH范围为2.2~2.3。优选地,步骤(2)中,洗脱时间及其对应的流动相中流动相A的体积含量如下:在0~18min,流动相A的体积含量为100%;在18~25min,流动相A的体积含量从100%梯度降低至70%;在25~39min,流动相A的体积含量为70%;在39~40min,流动相A的体积含量从70%梯度升高至100%;在40~50min,流动相A的体积含量为100%。优选地,步骤(2)中,所述流动相A中乙腈与所述水相溶液的体积比为12:88~15:85。优选地,步骤(2)中,色谱分离和/或检测条件:柱温为38~40℃,流动相流速为1.0~1.1mL/min。优选地,步骤(2)中,色谱分离和/或检测条件:所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星的紫外检测波长分别为290~300nm,所述羟苯甲酯的紫外检测波长为240~250nm。优选地,步骤(1)中,用极性溶液将所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂稀释成为浓度0.11~0.15mg/mL的溶液,从而获得供试品溶液。优选地,步骤(2)中,色谱流动相水相配制时,调节pH值用的酸为磷酸、醋酸或盐酸中的一种。本申请中,所使用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。本申请中,在进行色谱流动相水相配制时,称取醋酸铵和高氯酸钠,用纯化水稀释至浓度分别为3.0~4.0mg/mL、5.0~6.0mg/mL的溶液,混合后调节pH至2.1~2.5;优选所述醋酸铵浓度3.2~3.5mg/mL,高氯酸钠的浓度5.0~5.5mg/mL,优选pH范围为2.2~2.3;旨在为分离过程提供合适的pH范围。本申请中,在进行色谱流动相配制时,流动相A中乙腈与水相溶液体积比为10:90~16:84,流动相B为乙腈,在0~18min,流动相A的体积含量为100%;在18~25min,流动相A的体积含量从100%梯度降低至70%;在25~39min,流动相A的体积含量为70%;在39~40min,流动相A的体积含量从70%梯度升高至100%;在40~50min,流动相A的体积含量为100%,从而能够保证样品中的各组分能够完全分离。本申请中,色谱分离检测条件为:柱温30~40℃,流动相流速0.9~1.3mL/min;优选柱温范围38~40℃,流动相流速1.0~1.1mL/min,以保证所属羟苯甲酯色谱峰前后分离度大于1.5,且分析时间控制至50min内。本申请中,左氧氟沙星的紫外检测波长为280~300nm,羟苯甲酯的紫外检测波长为240~260nm,使得盐酸左氧氟沙星眼用凝胶中的左氧氟沙星与羟苯甲酯在该波长内具有最大吸光度,优选左氧氟沙星的紫外检测波长为290~300nm,所述羟苯甲酯的紫外检测波长为240~250nm。本申请中,在检测时,分别精密吸取供试品与对照品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,并分别读取供试品左氧氟沙星与羟苯甲酯色谱峰面积A供1、A供2,与对照品左氧氟沙星、羟苯甲酯的色谱峰峰面积A对1、A对2,并用下式:计算出所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯的含量w左氧氟沙星、w羟苯甲酯。本申请的有益效果是:采用本申请提供的方法可同时检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶中左氧氟沙星与防腐剂羟苯甲酯的含量,实现该眼用凝胶中左氧氟沙星和羟苯甲酯与制剂中其它有关物质完全分离,保证在测定过程中不受干扰,所属色谱峰峰形对称,无明显拖尾,前后分离度均满足本文档来自技高网
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一种分离和/或检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯的方法

【技术保护点】
一种分离和/或分别检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯含量的方法,其特征在于,所述方法为高效液相色谱法,具体包括如下步骤:(1)配制供试品溶液、左氧氟沙星对照品溶液与羟苯甲酯对照品溶液;(2)色谱条件:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶;水相为3.0~4.0mg/mL醋酸铵和5.0~6.0mg/mL高氯酸钠的混合溶液,所述混合溶液pH为2.1~2.5;色谱流动相包括流动相A和流动相B,其中所述流动相A为体积比为10:90~16:84的乙腈与所述水相的溶液,所述流动相B为乙腈;色谱分离和/或检测条件:柱温为35~40℃,流动相流速为0.9~1.3mL/min,所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星的紫外检测波长为280~300nm,所述羟苯甲酯的紫外检测波长为240~260nm;(3)操作:分别精密吸取所述供试品溶液与所述对照品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,并分别读取供试品溶液中左氧氟沙星的色谱峰面积A

【技术特征摘要】
1.一种分离和/或分别检测盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星与羟苯甲酯含量的方法,其特征在于,所述方法为高效液相色谱法,具体包括如下步骤:(1)配制供试品溶液、左氧氟沙星对照品溶液与羟苯甲酯对照品溶液;(2)色谱条件:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶;水相为3.0~4.0mg/mL醋酸铵和5.0~6.0mg/mL高氯酸钠的混合溶液,所述混合溶液pH为2.1~2.5;色谱流动相包括流动相A和流动相B,其中所述流动相A为体积比为10:90~16:84的乙腈与所述水相的溶液,所述流动相B为乙腈;色谱分离和/或检测条件:柱温为35~40℃,流动相流速为0.9~1.3mL/min,所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星的紫外检测波长为280~300nm,所述羟苯甲酯的紫外检测波长为240~260nm;(3)操作:分别精密吸取所述供试品溶液与所述对照品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,并分别读取供试品溶液中左氧氟沙星的色谱峰面积A供1与羟苯甲酯的色谱峰面积A供2,以及对照品左氧氟沙星的色谱峰峰面积A对1与羟苯甲酯的色谱峰峰面积A对2,并用下式:计算出所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂中左氧氟沙星的含量w左氧氟沙星与羟苯甲酯的含量w羟苯甲酯。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,用极性溶液将所述盐酸左氧氟沙星眼用凝胶剂稀释成为浓度0.09~0.16mg/mL的溶液从而获得供试品溶液;用极性溶液将所述左氧氟沙星稀释成为浓度为0.087~0.15mg/mL的溶液,用极性溶液将所述羟苯甲酯稀释成为浓度为0.010~0.018mg/mL的溶液,从而分别获得所述左氧氟沙星和所述羟苯甲酯对照品溶液;优选所述极性溶液为纯化水或0.1mol/L盐酸。3.根...

【专利技术属性】
技术研发人员:王超付欢许方云马慧玲刘锐梁琴
申请(专利权)人:湖北远大天天明制药有限公司
类型:发明
国别省市:湖北,42

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