【技术实现步骤摘要】
稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株降低对pH敏感性的方法
本专利技术属于植物保护和生物
,尤其涉及一种稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株降低对pH敏感性的方法。
技术介绍
一些真菌在其与环境持久的互作过程中已经进化出复杂的调控机制识别和响应其周围的pH变化。另外,一些真菌依据其周围不同pH,能分泌不同的蛋白。为了成功侵入寄主,在侵染过程中(Botrytiscinerea)灰葡萄孢菌在寄主的不同组织分泌不同的蛋白。尽管只有一些“真正的”毒性因子是成功抑制寄主防御响应的,但仍需要不同的胞外分泌蛋白协同起作用。构巢曲霉菌中的7个蛋白与pH识别相关(etal.,2008),其中的两个蛋白PalH和PalI是推测膜蛋白,PalH(7个预测跨膜螺旋)携带有pH识别活性。通过对PACC缺失菌株的研究表明,pH信号途径在各种致病真菌毒性中的作用。PACC的缺失会对真菌分泌代谢产物或裂解酶产生极大地负作用。因此,pH信号途径似乎控制许多细胞功能,而这些细胞功能与病菌的各种侵染过程相关。
技术实现思路
本专利技术的目的就在于为了解决上述问题而提供一种稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株降低对pH敏感性的方法。本专利技术通过以下技术方案来实现上述目的:本专利技术包括以下步骤:(1)分别将稻瘟病菌效应蛋白过表达菌株接种于pH5和pH8的蕃茄燕麦培养基中培养10天;(2)用灭菌棉签将培养基表面长满的菌丝刮掉,再将刮掉菌丝的培养基放置于培养箱中进行12小时黑暗12小时光照处理3天;(3)用灭菌水清洗培养基表面的孢子,取10μl孢子悬浮液于载玻片上于显微镜下进行孢子计数,统计产孢量;(4)分别用pH5和 ...
【技术保护点】
一种稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株降低对pH敏感性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)分别将稻瘟病菌效应蛋白过表达菌株接种于pH5和pH8的蕃茄燕麦培养基中培养10天;(2)用灭菌棉签将培养基表面长满的菌丝刮掉,再将刮掉菌丝的培养基放置于培养箱中进行12小时黑暗12小时光照处理3天;(3)用灭菌水清洗培养基表面的孢子,取10μl孢子悬浮液于载玻片上于显微镜下进行孢子计数,统计产孢量;(4)分别用pH5和pH8的缓冲液清洗孢子,将孢子悬浮液置于洋葱表皮于28℃培养箱中培养,于6h时于显微镜下观察孢子萌发率及附着胞形成率。
【技术特征摘要】
1.一种稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株降低对pH敏感性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)分别将稻瘟病菌效应蛋白过表达菌株接种于pH5和pH8的蕃茄燕麦培养基中培养10天;(2)用灭菌棉签将培养基表面长满的菌丝刮掉,再将刮掉菌丝的培养基放置于培养箱中进行12小时黑暗12小时光照处理3天;(3)用灭菌水清洗培养基表面的孢子,取10μl孢子悬浮液于载玻片上于显...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨静,李成云,王春梅,刘林,吴奇,王云锋,
申请(专利权)人:云南农业大学,
类型:发明
国别省市:云南,53
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