抗PSMP的单克隆抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及抗PSMP的单克隆抗体3D5，重链属于IgG1亚型，轻链属于κ链。本发明专利技术涉及抗PSMP的单克隆抗体4E7，重链属于IgG2b亚型，轻链属于κ链。3D5重链可变区序列如SEQ ID NO.3和5所示，重链互补决定区如SEQ ID NO.7,8,9和13,14,15所示，轻链可变区如SEQ ID NO.4和6所示，轻链互补决定区如SEQ ID NO.10,11,12和16,17,18所示。4E7重链可变区序列如SEQ ID NO.31和33所示，重链互补决定区如SEQ ID NO.35,36,37和41,42,43所示，轻链可变区如SEQ ID NO.32和34所示，轻链互补决定区如SEQ ID NO.38,39,40和44,45,46所示。所述3D5和4E7抗PSMP的单克隆抗体可用于PSMP相关的多种疾病的治疗。所述3D5和4E7抗PSMP的单克隆抗体还可用于检测样品中的PSMP蛋白的含量。

Monoclonal antibodies against PSMP and uses thereof

The present invention relates to monoclonal antibodies 3D5 to PSMP, heavy chains belonging to the IgG1 subtype, light chains belonging to the kappa chain. The present invention relates to monoclonal antibodies 4E7 to PSMP, heavy chains belonging to the IgG2b subtype, light chains belonging to the kappa chain. 3D5 heavy chain variable region sequences such as SEQ NO.3 and ID 5 shows, heavy chain complementarity determining region such as SEQ ID and 13,14,15 NO.7,8,9 shown in the light chain variable region such as SEQ NO.4 and ID 6 shows, such as SEQ ID decided to NO.10,11,12 and 16,17,18 shown in light chain complementarity. 4E7 heavy chain variable region sequences such as SEQ NO.31 and ID 33 shows, heavy chain complementarity determining region such as SEQ ID and 41,42,43 NO.35,36,37 shown in the light chain variable region such as SEQ NO.32 and ID 34 shows, such as SEQ ID decided to NO.38,39,40 and 44,45,46 shown in light chain complementarity. The 3D5 and 4E7 monoclonal antibodies against PSMP can be used for the treatment of PSMP related multiple diseases. The 3D5 and 4E7 monoclonal antibodies against PSMP can also be used to detect the content of PSMP protein in a sample.

【技术实现步骤摘要】
抗PSMP的单克隆抗体及其用途
本专利技术属于基因工程领域，涉及单克隆抗体技术，尤其涉及抗PSMP的单克隆抗体及编码所述抗体蛋白的多核苷酸，包含所述多核苷酸的基因工程载体，相应的药物组合物，以及在药物和试剂的制备、疾病的预防和治疗等方面的用途。
技术介绍
近年来，免疫疗法发生了变化，从基础向临床的转化到药物开发成为更为重要的途径。通过描述免疫系统相关趋化因子如何组织在生理和病理活动中发挥作用，暗示趋化因子有强大的临床应用前景，可以用作免疫疗法的治疗靶或辅助治疗剂或主要疗法。抗体，又称免疫球蛋白分子，由B细胞分泌产生。抗体基本结构单元由2对相同的多肽链组成，每一对具有一条轻链(约25kDa)和一条重链(约50-70kDa)。每条链的氨基端部分包括约100至110个或更多个氨基酸的可变区，主要负责抗原识别。每条链的羧基端为恒定区。根据抗体分子重链的性质分为IgG、IgM、IgA、IgE和IgD类别。某些类别也具有子类，例如IgG1、IgG2。轻链可为κ链或λ链。单克隆抗体：指含有由唯一轻链基因产物和唯一重链基因产物组成的唯一一个物种的抗体群体。在群体的所有分子中单克隆抗体的互补性决定区域(CDR)相同。单克隆抗体抗原结合位点由重链(H)和轻链(L)的N端可变(V)区的氨基酸残基形成。重链和轻链的V区内3个“高变区”，插入多个称为“骨架区”或“FR”的保守区段之间。FR指免疫球蛋白的高变区之间天然存在且与之相邻的氨基酸序列。在抗体分子中，轻链的3个高变区和重链的3个高变区相对于彼此呈三维空间布置以形成抗原结合表面。抗原结合表面与结合抗原的三维表面互补，每条重链和轻链的3个高变区称为“互补性决定区域”或“CDR”。单克隆抗体的制备的杂交瘤技术是通过融合经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的杂交瘤细胞克隆。在已经融合的细胞中有相当比例的无关细胞的融合体，需经筛选去除。将这些阳性细胞再进行克隆化，应用特异性抗原包被的ELISA找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株，增殖后进行冻存、体外培养或动物腹腔接种培养。基因工程抗体(重组抗体)是指应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和重新装配，再导入适当的工程细胞所表达的抗体分子。基因工程抗体包括嵌合抗体、人源化抗体、单链抗体、二硫键稳定的Fv、Fab、单域抗体、多价抗体、多特异抗体、靶向药物抗体、抗原化抗体。基因表达及其编码产物蛋白质表达的检测方法包括反转录－聚合酶链式反应、蛋白质印迹、ELISA、FACS、免疫荧光、免疫组化、免疫细胞化学、流式蛋白定量检测方法。可以应用于实验研究以及临床生理和病理疾病中细胞和组织的基因表达及其编码产物蛋白质表达的检测。具有重要生理、病理意义的基因及其编码产物蛋白质，可以作为药物靶标，开发靶向这一分子本身及其相互作用分子的化合物、抗体、多肽药物或基因工程药物和商品化试剂，应用于发病机制研究，疾病标志物的研究和临床检测，及研究和临床的药物的治疗。
技术实现思路
本专利技术提供了两种抗PSMP的单克隆抗体。所述单克隆抗体3D5，属于IgG1亚型，对PSMP具有高亲和力检测和中和活性。所述单克隆抗体4E7，属于IgG2b亚型，对PSMP具有高亲和力检测和中和活性。本专利技术还提供了两种分泌所述单抗隆抗体的杂交瘤细胞株。所述单克隆抗体包含重链和轻链可变区，包括其多核苷酸及氨基酸序列。所述单克隆抗体3D5包括SEQIDNO.3，SEQIDNO.4或SEQIDNO.7，SEQIDNO.8，SEQIDNO.9，SEQIDNO.10，SEQIDNO.11，SEQIDNO.12所示的氨基酸序列，以及与上述氨基酸序列具有至少80％，优选至少85％，更为优选至少90％，更进一步优选至少95％，特别优选至少98％，更为特别优选至少99％同源性(序列匹配)的序列。这些序列可以与本专利技术的SEQIDNO.3，SEQIDNO.4或SEQIDNO.7，SEQIDNO.8，SEQIDNO.9，SEQIDNO.10，SEQIDNO.11，SEQIDNO.12所示的序列具有相同、相似或不同的生物学功能，优选具有相同或相似的功能。本专利技术还提供了一种多核苷酸或其互补序列。所述多核苷酸包含编码SEQIDNO.7，SEQIDNO.8，SEQIDNO.9和SEQIDNO.10，SEQIDNO.11，SEQIDNO.12的多核苷酸序列，其中所述多核苷酸序列为：(1)SEQIDNO.13，SEQIDNO.14，SEQIDNO.15所示分别编码SEQIDNO.7，SEQIDNO.8，SEQIDNO.9的多核苷酸序列，和SEQIDNO.16，SEQIDNO.17，SEQIDNO.18所示分别编码SEQIDNO.10，SEQIDNO.11，SEQIDNO.12的多核苷酸序列；或(2)具有编码权利要求1，2，5或6所述氨基酸序列的多核苷酸序列，其编码的蛋白与(1)所述多核苷酸编码的蛋白具有相同或相似或不同的生物学功能。所述单克隆抗体4E7包括SEQIDNO.31，SEQIDNO.32或SEQIDNO.35，SEQIDNO.36，SEQIDNO.37，SEQIDNO.38，SEQIDNO.39，SEQIDNO.40所示的氨基酸序列，以及与上述氨基酸序列具有至少80％，优选至少85％，更为优选至少90％，更进一步优选至少95％，特别优选至少98％，更为特别优选至少99％同源性(序列匹配)的序列。这些序列可以与本专利技术的SEQIDNO.31，SEQIDNO.32或SEQIDNO.35，SEQIDNO.36，SEQIDNO.37，SEQIDNO.38，SEQIDNO.39，SEQIDNO.40所示的序列具有相同、相似或不同的生物学功能，优选具有相同或相似的功能。本专利技术还提供了一种多核苷酸或其互补序列。所述多核苷酸包含编码SEQIDNO.35，SEQIDNO.36，SEQIDNO.37，SEQIDNO.38，SEQIDNO.39，SEQIDNO.40的多核苷酸序列，其中所述多核苷酸序列为：(1)SEQIDNO.41，SEQIDNO.42，SEQIDNO.43所示分别编码SEQIDNO.35，SEQIDNO.36，SEQIDNO.37的多核苷酸序列，和SEQIDNO.44，SEQIDNO.45，SEQIDNO.46所示分别编码SEQIDNO.38，SEQIDNO.39，SEQIDNO.40的多核苷酸序列；或(2)具有编码权利要求1，2，5或6所述氨基酸序列的多核苷酸序列，其编码的蛋白与(1)所述多核苷酸编码的蛋白具有相同或相似或不同的生物学功能。本专利技术还提供了两种基因工程载体。所述基因工程载体含有编码本专利技术所述的单克隆抗体的多核苷酸。所述基因工程载体可以是普通载体、表达载体。本专利技术还提供了一种药物组合物。所述药物组合物含有：本专利技术所述的蛋白，编码所述蛋白的多核苷酸和/或含有所述多核苷酸的基因工程载体，以及一种或多种药物可接受的盐或药学上可接受的载体或赋形剂。所述药物能够用于预防和/或治疗的疾病包括：自身免疫病、肿瘤转移、免疫调节、炎症反应、肝癌，肺腺癌，胰腺癌、前列腺癌、肾癌、膀胱癌、乳腺癌、破骨细胞瘤、动脉粥样硬化、心肌梗死、高血压疾病、心本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗PSMP的单克隆抗体，其包含：(1)具有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.31和SEQ ID NO.32所示氨基酸序列的蛋白；或(2)具有与(1)所述蛋白有至少80％同源性的氨基酸序列的蛋白，其功能与(1)所述蛋白的功能相同或相似或不同；所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区，其中所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.31所示，所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.32所示。

【技术特征摘要】
2015.11.13 CN 20151078125841.一种抗PSMP的单克隆抗体，其包含：(1)具有SEQIDNO.3和SEQIDNO.4或SEQIDNO.31和SEQIDNO.32所示氨基酸序列的蛋白；或(2)具有与(1)所述蛋白有至少80％同源性的氨基酸序列的蛋白，其功能与(1)所述蛋白的功能相同或相似或不同；所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区，其中所述重链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.3或SEQIDNO.31所示，所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.4或SEQIDNO.32所示。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其包含：(1)具有SEQIDNO.3和SEQIDNO.4或SEQIDNO.31和SEQIDNO.32所示氨基酸序列的蛋白；或(2)具有与(1)所述蛋白有至少90％同源性的氨基酸序列的蛋白，其功能与(1)所述蛋白的功能相同或相似或不同。3.一组多核苷酸，其包含编码SEQIDNO.3和SEQIDNO.4或SEQIDNO.31和SEQIDNO.32的多核苷酸序列，其包含：(1)SEQIDNO.5所示编码SEQIDNO.3的多核苷酸序列，和SEQIDNO.6所示编码SEQIDNO.4的多核苷酸序列；SEQIDNO.33所示编码SEQIDNO.31的多核苷酸序列，和SEQIDNO.34所示编码SEQIDNO.32的多核苷酸序列；或(2)具有编码权利要求1或2所述氨基酸序列的多核苷酸序列，其编码的蛋白与(1)所述多核苷酸编码的蛋白具有相同或相似或不同的生物学功能。4.根据权利要求3所述的多核苷酸或其互补序列，其包含编码权利要求1或2所述氨基酸序列的多核苷酸序列。5.一种抗PSMP的单克隆抗体，其包含：(1)具有SEQIDNO.7，SEQIDNO.8，SEQIDNO.9和SEQIDNO.10，SEQIDNO.11，SEQIDNO.12所示氨基酸序列的蛋白；或具有SEQIDNO.35，SEQIDNO.36，SEQIDNO.37和SEQIDNO.38，SEQIDNO.39，SEQIDNO.40所示氨基酸序列的蛋白；或(2)具有与(1)所述蛋白有至少80％同源性的氨基酸序列的蛋白，其功能与(1)所述蛋白的功能相同或相似或不同；所述单克隆抗体包含轻链互补决定区和重链互补决定区，其中所述重链互补决定区的氨基酸序列为SEQIDNO.7，SEQIDNO.8和SEQIDNO.9或SEQIDNO.35，SEQIDNO.36，SEQIDNO.37所示，所述轻链互补决定区的氨基酸序列为SEQIDNO.10，SEQIDNO.11和SEQIDNO.12或SEQIDNO.38，SEQIDNO.39，SEQIDNO.40所示。6.根据权利要求5所述的单克隆抗体，其包含：(1)具有SEQIDNO.7，SEQIDNO.8，SEQIDNO.9和SEQIDNO.10，SEQIDNO.11，SEQIDNO.12所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王应，马大龙，郑丹凤，裴晓磊，佘少平，彭新建，陈迪新，郑璨，梁炜薇，宋泉声，张颖妹，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京,11