人源性核糖体蛋白L22用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途制造技术

本发明专利技术涉及生物药物技术领域，尤其是一种人源性核糖体蛋白（Ribosomal protein L22，RPL22）全序列蛋白用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途。重组人源性核糖体蛋白RPL22的全序列蛋白用作为治疗非小细胞肺癌的药物或用作为抗肿瘤的药物，人源性核糖体蛋白RPL22序列如序列表所示序列1。本发明专利技术的重组人源性核糖体蛋白RPL22可作为一种内源性酪蛋白激酶抑制剂，发挥抗癌活性，在抑制非小细胞肺癌方面具有单独抑制癌细胞活性的作用。该蛋白是人体自身内源性蛋白，生物安全性好，并且本发明专利技术单药在保证较强的抗癌活性的前提下，可与其它抗癌药物联合使用，减少其它抗癌药物使用剂量、降低其它抗癌药物毒副作用。

Novel use of human ribosomal protein L22 as anticancer and antitumor drug

The invention relates to the technical field of biological medicine, especially a human ribosomal protein (Ribosomal protein L22, RPL22) the whole sequence of protein used as anticancer new antitumor drugs use. Recombinant human ribosomal protein RPL22 is a complete sequence protein that is used as a drug for the treatment of non-small cell lung cancer or as an antineoplastic drug. The human ribosomal protein RPL22 sequence, such as the sequence list, is shown in sequence 1. The recombinant human ribosomal protein RPL22 of the invention can act as an endogenous casein kinase inhibitor and play an anti-cancer activity, and has the function of inhibiting cancer cell activity alone in inhibiting non-small cell lung cancer. The protein is the human endogenous protein, biological safety, and the invention of single medicine under the premise of ensuring strong anti-cancer activity, can be used in combination with other anticancer drugs, reduce the use of other anticancer drugs and reduce the dose of other anticancer drug toxicity.

【技术实现步骤摘要】
人源性核糖体蛋白L22用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途
本专利技术涉及生物药物
，尤其是一种人源性核糖体蛋白（RibosomalproteinL22，RPL22）全序列蛋白用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途。
技术介绍
统计显示，肺癌已成为人类因癌症死亡的最主要原因；而在我国，肺癌发病率和死亡率亦居于各类癌症之首。由于其复杂病因和发病的分子生物学机制尚未完全阐明，临床治疗效果不佳；寻找有效的治疗方法是当前非小细胞肺癌治疗亟需解决的问题。核糖体蛋白（ribosomalprotein,RP）是细胞生长过程中的非常重要调控基因，其可能直接影响了细胞增殖分化过程，且不同来源细胞中作用机制不尽相同。专利技术人研究发现，细胞在刺激增殖后部分核糖体蛋白基因表达明显变化；其中，专利技术人首次发现RPL22在肺癌发展过程中起重要的调控作用：非小细胞肺癌中RPL22表达下调；同时发现肺癌中，RPL22通过与酪蛋白激酶相互作用、并抑制其活性调控肺癌发生发展（参考文献：MINGXIAYANG*,Haibo,Sun；Ji,He；Hong,Wang；Xiaowei,Yu；Lei,Ma；Changliang,Zhu.InteractionofribosomalproteinL22withcaseinkinase2α:Anovelmechanismforunderstandingthebiologyofnon-smallcelllungcancer.ONCOLOGYREPORTS32:139-144,2014.（IF2.19）；MingxiaYang*,HaiboSun,HongWang,ShijiangZhang,XiaoweiYu,LeiZhang.Down-regulationofribosomalproteinL22innon-smallcelllungcancer.MedOncol,2013;30(3):646.（IF2.14））。现有对比文件1专利号为200680017309.5，名称为改进的表达元件，公开了一种分离的多核苷酸，其包含来自核糖体蛋白基因启动区的至少500个连续的核苷酸的元件，所述核糖体蛋白基因选自诸多基因，其中优选有RPL22（说明书【0044】段）。全文只公开了RPL22可分离出来，但未提及其作为抗癌或抗肿瘤药物的用途。对比文件2专利号为201280038761.5，名称为用于癌症的循环生物标志物，权利要求书公开了一种方法测定来自受试者的生物样品中一种或多种生物标志物的存在或水平，其中所述一种或多种生物标志物可选自RPL22,鉴定包含所述一种或多种生物标志物的存在或水平的生物印记,将生物印记与参照生物印记相比较，其中该比较用于表征癌症，具体表征包括鉴定癌症的存在或风险，或鉴定癌症是转移性的或是侵袭性的（权利要求权利要求1、3、4）。虽然文中提到了RPL22可用于表征癌症，但我们知道表征癌症和治疗癌症是两回事，现有的技术没有采用过RPL22作为抗癌或抗肿瘤药物的用途。
技术实现思路
为了克服现有的抗癌技术的不足，本专利技术提供了一种原核表达获得的人源性核糖体蛋白L22用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：重组人源性核糖体蛋白RPL22的全序列蛋白用作为治疗非小细胞肺癌的药物或用作为抗肿瘤的药物。所述重组人源性核糖体蛋白RPL22序列如序列表所示序列1：MAPVKKLVVKGGKKKKQVLKFTLDCTHPVEDGIMDAANFEQFLQERIKVNGKAGNLGGGVVTIERSKSKITVTSEVPFSKRYLKYLTKKYLKKNNLRDWLRVVANSKESYELRYFQINQDEEEEEDED。根据本专利技术的另一个实施例，进一步包括，所述重组人源性核糖体蛋白RPL22与顺铂具有协同增效作用。根据本专利技术的另一个实施例，进一步包括，还包括重组人源性核糖体蛋白RPL22进行磷酸化修饰、糖基化修饰、甲酰化修饰后改进的蛋白用作为治疗非小细胞肺癌的药物或抗肿瘤的药物。根据本专利技术的另一个实施例，进一步包括，所述重组人源性核糖体蛋白RPL22按照药物制备的常用方法制成口服剂、针剂、片剂或缓释剂。根据本专利技术的另一个实施例，进一步包括，所述重组人源性核糖体蛋白RPL22通过市场购买或自行制备获得。根据本专利技术的另一个实施例，进一步包括，所述自行制备获得的方法如下：根据Genbank数据库公布的人正常核糖体蛋白RPL22基因序列NM_000983，通过基因克隆的方法从人正常支气管上皮细胞克隆RPL22开放阅读框序列，通过基因重组的方法构建表达型载体，通过工程菌扩增表达后，纯化获得RPL22蛋白并去除内毒素，通过真空低温冷冻干燥方法获得重组人源性核糖体蛋白RPL22。本专利技术的有益效果是：（1）本专利技术旨在公开----重组人源性核糖体蛋白RPL22全序列蛋白用作为抗癌药物的新用途，特别是用作为治疗非小细胞肺癌的药物、以及潜在的治疗其它肿瘤的药物。（2）本专利技术采用人体内源性蛋白，为人体内已经存在的一种蛋白，非外源性蛋白，因此，该蛋白用于抗癌药物开发并用于临床，具有良好的组织相容性，无毒性。（3）本专利技术提供的药物，单药在细胞水平和实体瘤水平治疗非小细胞肺癌方面具有显著的抗癌作用。（4）本专利技术单药在保证较强的抗癌活性的前提下，与其它抗癌药物联合使用，有减少其它抗癌药物使用剂量、降低其它抗癌药物毒副作用。附图说明下面结合附图和实施例对本专利技术进一步说明。图1是本专利技术RPL22蛋白抑制肺癌细胞增殖曲线图。图中，横坐标为药物稀释比例，纵坐标为细胞增殖抑制率。图2是本专利技术RPL22蛋白处理裸鼠种植瘤的结果。图中，A:对照组（小鼠血清），B:1/200，C:1/100，D:1/50，E:1/10。图3是顺铂DDP抑制肺癌细胞的IC50测定结果。图中，各点代表为DDP浓度点为0μM,0.01μM，0.1μM,10μM,100μM。图4是本专利技术RPL22蛋白协同顺铂（DDP）抑制肺癌细胞增殖的结果。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，所有实施例仅用于例证本专利技术，决不限制本专利技术的保护范围。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。一、本专利技术重组人源性核糖体蛋白RPL22的来源本专利技术中采用的重组人源性核糖体蛋白RPL22通过市场购买或自行制备获得。市场购买本专利技术可从PROSPEC公司（Prospec-TanyTechnoGeneLtd,Israel）购买获得。自行制备获得的方法如下：根据Genbank数据库公布的人正常核糖体蛋白RPL22基因序列NM_000983，通过基因克隆的方法从人正常支气管上皮细胞克隆RPL22开放阅读框序列，通过基因重组的方法构建表达型载体，通过工程菌扩增表达后，纯化获得RPL22蛋白并去除内毒素，通过真空低温冷冻干燥方法获得重组人源性核糖体蛋白RPL22。该方法为本领域技术人员的常用方法，在此不再赘述。二、本专利技术重组人源性核糖体蛋白RPL22储存在获得重组人源性核糖体蛋白RPL22后，可照药物制备的常用方法制成口服剂、针剂、片剂或缓释剂，但不限于此。三、本专利技术重组人源性核糖体蛋白RPL2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人源性核糖体蛋白L22用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途，其特征是，重组人源性核糖体蛋白RPL22的全序列蛋白用作为治疗非小细胞肺癌的药物或用作为抗肿瘤的药物，所述重组人源性核糖体蛋白RPL22序列如序列表所示序列1：MAPVKKLVVKGGKKKKQVLKFTLDCTHPVEDGIMDAANFEQFLQERIKVNGKAGNLGGGVVTIERSKSKITVTSEVPFSKRYLKYLTKKYLKKNNLRDWLRVVANSKESYELRYFQINQDEEEEEDED。

【技术特征摘要】
1.一种人源性核糖体蛋白L22用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途，其特征是，重组人源性核糖体蛋白RPL22的全序列蛋白用作为治疗非小细胞肺癌的药物或用作为抗肿瘤的药物，所述重组人源性核糖体蛋白RPL22序列如序列表所示序列1：MAPVKKLVVKGGKKKKQVLKFTLDCTHPVEDGIMDAANFEQFLQERIKVNGKAGNLGGGVVTIERSKSKITVTSEVPFSKRYLKYLTKKYLKKNNLRDWLRVVANSKESYELRYFQINQDEEEEEDED。2.根据权利要求1所述的人源性核糖体蛋白L22用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途，其特征是，所述重组人源性核糖体蛋白RPL22与顺铂起协同增效作用。3.根据权利要求1所述的人源性核糖体蛋白L22用作为抗癌抗肿瘤药物的新用途，其特征是，还包括重组人源性核糖体蛋白RPL22进行磷酸化修饰、糖基化修饰、甲酰化修饰后改进的蛋白用...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨明夏，
申请(专利权)人：杨明夏，
类型：发明
国别省市：江苏,32