苦瓜降糖提取物复合剂及其制备方法技术

本发明专利技术针对苦瓜单组分提取物降糖效果不佳的技术问题，将现代药材活性成分提取技术和传统中药复配原则相结合，提供了一种苦瓜降糖提取物复合制剂、所述提取物复合制剂的制备方法和及用途。本发明专利技术根据各种组分在苦瓜中的天然含量，将各提取物进行配比，使配比后的复合制剂相对于单一提取物取得了协同降糖的效果。另外，本发明专利技术选用蜗牛酶提取苦瓜渣中的SDF，提高了回收率。

Momordica charantia hypoglycemic extract composite agent and preparation method thereof

Aiming at the technical problems of single component extract hypoglycemic effect of Momordica charantia poor, combining modern medicine and traditional Chinese medicine active ingredients extraction technology of compound principle, provides a way for a Kugua Jiangtang compound preparation, extract the extract and preparation method of the compound preparation and. According to the natural content of various components in Momordica charantia, each extract is matched, and the compound preparation with the ratio is obtained with the effect of synergistic hypoglycemic effect relative to the single extract. In addition, the invention uses snail enzyme to extract SDF from balsam pear slag, and improves recovery rate.

【技术实现步骤摘要】
苦瓜降糖提取物复合剂及其制备方法
本专利技术属于生化制药领域，具体涉及一种源自苦瓜的天然降糖药物，特别涉及苦瓜多组分提取物的复合制剂。
技术介绍
糖尿病是一种慢性病，难以根治并引发多种并发症，例如临床上常见的糖尿病并发肾病、糖尿病并发心脏病、非创伤性下肢切除、以及失明等。糖尿病分为I型和II型，其中II型糖尿病最常见，一般认为II型糖尿病是由于机体不能产生足够量的胰岛素或者对胰岛素的敏感度降低导致的新陈代谢疾病。除了注射胰岛素外，目前已经有几种临床上用于治疗胰岛素的药物，例如双胍类、葡萄糖苷酶抑制剂类、磺脲类等，然而上述药物都具有一定的缺陷，长期服用副作用明显或产生抗药性。苦瓜(MomordicacharantiaL.)为葫芦科苦瓜属植物，现代药理研究结果表明，苦瓜具有降血糖、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、免疫调节等多种药理活性，其中降血糖活性最为显著。苦瓜在哺乳动物模型和人体中的降血糖活性已经得到证实，但其中的降血糖成分及作用机理还不完全清楚。关于苦瓜在降血糖中的用途，目前主要是以苦瓜为原料，利用水提、醇提等方法制备含有降血糖活性的提取物，也有一些研究利用苦瓜酶解物制备膳食纤维用于调节血糖。然而按照通常的研究方法从苦瓜中提取、纯化降糖活性成分时，往往发现相对单一的提取物或纯的成分丧失了降糖功能。例如，目前从苦瓜中成功分离纯化的活性成分——苦瓜苷虽有清热、解毒、利尿的功效，但降血糖的效果并不稳定。苦瓜膳食纤维对糖尿病有一定的治疗作用，现有技术膳食纤维的提取通常是化学法和两步酶解法。化学法不可避免的导致提取的膳食纤维残留有化学药物，带来潜在的食品安全隐患；两步酶解法步骤复杂，成本高，提取效率不高，目前两步酶法提取膳食纤维主要使用木瓜蛋白酶及淀粉酶，特别是对于具有降糖活性的可溶性膳食纤维提取率通常仅在10％左右。
技术实现思路
本专利技术针对苦瓜单组分提取物降糖效果不佳的技术问题，将现代药材活性成分提取技术和传统中药复配原则相结合，一方面，根据基于目前已有的研究和不同的提取方法，优化提取条件，提取苦瓜中不同的降血糖活性组分。另一方面，根据苦瓜中各种降糖活性组分的天然含量，对提取的降糖活性组分进行复配，使复配后的复合制剂最大程度的接近各组分在苦瓜中的天然比例。本专利技术以苦瓜中各降糖组分的天然含量为配比依据，从而使各活性成分达到协同降糖的作用。蜗牛酶是一种从蜗牛内脏中提取的一种复合酶系，本专利技术将蜗牛酶用于处理苦瓜渣生产膳食纤维，提高了可溶性膳食纤维的产量。一方面，本专利技术提供一种苦瓜降糖提取物复合制剂，降糖活性成分包括活性肽提取物、耐热活性提取物、可溶性膳食纤维提取物，其特征在于所述复合制剂中活性肽提取物、耐热活性提取物和可溶性膳食纤维提取物三者的比例与苦瓜中三种组分的天然含量一致。本专利技术所述苦瓜降糖提取物复合制剂，其中活性肽提取物：耐热活性提取物：可溶性膳食纤维提取物按干物质含量计为1∶5-10∶500-1000。本专利技术所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中所述活性肽提取物的制备方法包括：取新鲜苦瓜，洗净，加入5-10倍生理盐水4℃匀浆，匀浆液15000×g离心30min，上清液依次经过4层纱布过滤、watman滤纸、0.22μm滤膜三级过滤，0.22μm过滤的滤液过10kDa的截留膜，取分子量小于10kDa的级分浓缩，得活性肽。本专利技术所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中耐热活性提取物的制备方法包括：将水浸提法制备苦瓜活性肽产生的沉淀和滤渣合并用5-10倍体积50-90％的乙醇加热回流提取3次，每次提取时间为0.5-4小时，过滤取上清，合并上清液，减压浓缩，得耐热活性提取物。本专利技术所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中可溶性膳食纤维提取物的制备方法包括：将经过水提取、醇提取后产生的苦瓜渣烘干，加入pH4-6.5的醋酸缓冲溶液中，然后加入0.4-1％重量份的蜗牛酶37℃恒温水浴酶解1-3h，酶解完成后加热至100℃灭酶5min，抽滤取滤液，向滤液中加入2-5倍体积的无水乙醇、搅拌均匀、静置过夜，离心取沉淀，得可溶性苦瓜膳食纤维。第二方面，本专利技术提供所述苦瓜降糖提取物复合制剂在制备治疗糖尿病药物中的应用，例如，所述苦瓜降糖提取物复合制剂在制备降低空腹血糖药物中的应用、所述苦瓜降糖提取物复合制剂在制备提高糖耐量药物中的应用。第三方面，本专利技术提供一种综合利用苦瓜生产降糖复合提取物的方法，特征在于包括以下步骤：(1)取新鲜苦瓜，洗净，加入5-10倍生理盐水4℃匀浆，匀浆液15000×g离心30min，上清液依次经过4层纱布过滤、watman滤纸、0.22μm滤膜三级过滤，将离心沉淀与滤渣合并，0.22μm过滤的滤液过10kDa的截留膜，取分子量小于10kDa的级分浓缩，得活性肽；(2)将步骤(1)中离心沉淀与过滤滤渣的混合物用5-10倍体积50-90％的乙醇加热回流提取3次，每次提取时间为0.5-4小时，过滤取上清，合并上清液，减压浓缩，得耐热活性提取物；(3)将步骤(2)中过滤后的苦瓜渣烘干，加入pH4-6.5的醋酸缓冲溶液中，然后加入0.2-1％(w/w)蜗牛酶酶解1-3h，酶解完成后加热至100℃灭酶5min，抽滤取滤液，向滤液中加入2-5倍体积的无水乙醇、搅拌均匀、静置过夜，离心取沉淀，得可溶性膳食纤维；(4)将活性肽、耐热活性提取物、可溶性膳食纤维按干物质含量计以1∶5-10∶500-1000的量混合得苦瓜活性提取物。本专利技术所述综合利用苦瓜生产降糖复合提取物的方法，其特征在于步骤(3)中酶解条件为酶解温度50℃，pH为5.5，料液比为1∶30，蜗牛酶添加量为0.4％，酶解时间为1.5h。与现有技术相比，本专利技术取得了以下有益的技术效果：1、提高了苦瓜的利用率，除了无药理活性的植物纤维(包括木质素、难以降解的纤维素)以外，对苦瓜中各种活性成分几乎都进行了充分利用。2、根据苦瓜中各降糖组分的天然含量，将各组分进行复配取得了降糖的协同作用。3、现有技术中苦瓜可溶性膳食纤维的提取效率不高，通常低于原料干重的10％，本专利技术发现蜗牛酶能充分释放苦瓜渣中可溶性膳食纤维，进一步通过优化提取条件，使苦瓜SDF提取率占原料干重13.5％，同时提高了SDF的品质。4、无需对提取物中的活性成分进行成本高昂的提取和纯化，工艺简单、对设备要求低、成本投入小、易产业化。附图说明图1为苦瓜渣SDF溶解性曲线。具体实施方式以下结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本专利技术方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。实施例1：苦瓜热不稳定活性成分的提取将新鲜成熟的苦瓜果实洗净，加入5-10倍生理盐水4℃匀浆，匀浆液用盐酸调pH值至1.5静置30min，15000×g离心10min，上清液依次经过4层纱布、watman滤纸、0.22μm滤膜三级过滤，经过三级过滤后的滤液再过10kDa的截留膜，取分子量小于10kDa的级分，真空浓缩，得热不稳定活性提取物。将离心产生的沉淀和三级过滤产生的滤渣合并，备用。所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苦瓜降糖提取物复合制剂，降糖活性成分包括活性肽提取物、耐热活性提取物、可溶性膳食纤维提取物，其特征在于所述复合制剂中活性肽提取物、耐热活性提取物和可溶性膳食纤维提取物三者的比例与苦瓜中三种组分的天然含量一致。

【技术特征摘要】
1.一种苦瓜降糖提取物复合制剂，降糖活性成分包括活性肽提取物、耐热活性提取物、可溶性膳食纤维提取物，其特征在于所述复合制剂中活性肽提取物、耐热活性提取物和可溶性膳食纤维提取物三者的比例与苦瓜中三种组分的天然含量一致。2.如权利要求1所述苦瓜降糖提取物复合制剂，其中活性肽提取物：耐热活性提取物：可溶性膳食纤维提取物按干物质含量计为1∶5-10∶500-1000。3.如权利要求1或2所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中所述活性肽提取物的制备方法包括：取新鲜苦瓜，洗净，加入5-10倍生理盐水4℃匀浆，匀浆液15000×g离心30min，上清液依次经过4层纱布过滤、watman滤纸、0.22μm滤膜三级过滤，0.22μm过滤的滤液过10kDa的截留膜，取分子量小于10kDa的级分浓缩，得活性肽。4.如权利要求1或2所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中耐热活性提取物的制备方法包括：将水浸提法制备苦瓜活性肽产生的沉淀和滤渣合并用5-10倍体积50-90％的乙醇加热回流提取3次，每次提取时间为0.5-4小时，过滤取上清，合并上清液，减压浓缩，得耐热活性提取物。5.如权利要求1或2所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中可溶性膳食纤维提取物的制备方法包括：将经过水提取、醇提取后产生的苦瓜渣烘干，加入pH4-6.5的醋酸缓冲溶液中，然后加入0.4-1％重量份的蜗牛酶37℃恒温水浴酶解1-3h，酶解完成后加热至100℃灭酶5min，抽滤取滤液，向滤液中加入2-5倍体积的无水乙醇、搅拌均匀、静置过夜，离心取沉淀，得可溶性...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾东升，谢晓亮，温春秀，刘灵娣，崔施展，李荣乔，田伟，边建波，
申请(专利权)人：河北省农林科学院经济作物研究所，
类型：发明
国别省市：河北,13