The invention discloses a method for preparing a preparation for the repair of damaged skin cells, the method comprises the following steps: adipose tissue washed and shredded, digested by centrifugal treatment; adipose derived stem cells; separation of adipose stem cells into the culture medium after heavy suspension were cultured adipose derived stem cells; after culture in vitro; preparation of gelatin gel, and the in vitro expansion of adipose derived stem cells seeded on the hydrogel; fresh blood platelet rich plasma obtained after centrifugation, adding stem cells entrapped hydrogel and saline preparation of cell preparations. The present invention of cultured adipose derived stem cells in vitro, and the cultured stem cells seeded on the hydrogel scaffolds, and add cell preparations of platelet rich plasma, gelatin gel as an ideal cell transfer medium, can be directly transplanted into the lesion, while platelet rich plasma can release a variety of growth factor, effectively promote wound healing.
【技术实现步骤摘要】
一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法
本专利技术属于生物医学领域,特别是涉及一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法。
技术介绍
皮肤是人体最大的器官,具有保护体内各组织器官免受物理、化学、病原微生物侵袭的能力,是人体内、外环境之间的屏障和分界;临床上常见的大面积烧伤、创伤、肿瘤切除手术等均可以破坏皮肤的完整性,导致皮肤及其软组织缺损。临床上治疗皮肤软组织缺损创面,往往需要取自体皮肤移植或进行局部皮瓣转移手术进行修复;大面积皮肤缺损的患者,由于其自身皮源严重不足,创面的治疗十分困难,因此,寻找促进创面愈合的新方法已成为整形外科医生追逐的热点。与胚胎干细胞相比,成体干细胞多来自于自体的成熟组织,在临床应用方面不存在伦理学问题,而且,由成体干细胞诱导所得的细胞、组织不存在配型及免疫排斥反应等相关问题,可成为细胞疗法理想的种子细胞。脂肪干细胞是研究较为透彻的成体干细胞,它在体内外均有较强的增殖及自我更新能力,在特殊诱导培养条件下或体内特定环境中表现出其跨越胚层界限的分化能力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法,通过以明胶水凝胶作为支架材料搭载脂肪干细胞,并加入富血小板血浆支撑细胞制剂,有效修复皮肤损伤。本专利技术是通过以下技术方案实现的:一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法,该方法包括如下步骤:S1、取脂肪组织清洗并剪碎,进行消化处理;S2、取消化后的脂肪组织离心得到脂肪干细胞;S3、将分离的脂肪干细胞加入培养基中重悬后进行分离培养;S4、脂肪干细胞原代培养7-9d后进行体外扩增培养;S5、制备明胶水凝胶,并将体 ...
【技术保护点】
一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:S1、取脂肪组织清洗并剪碎,进行消化处理;S2、取消化后的脂肪组织离心得到脂肪干细胞;S3、将分离的脂肪干细胞加入培养基中重悬后进行分离培养;S4、脂肪干细胞原代培养7‑9d后进行体外扩增培养;S5、制备明胶水凝胶,并将体外扩增的脂肪干细胞接种于水凝胶中得到包埋干细胞的水凝胶;S6、取新鲜血液离心后得到富血小板血浆,加入包埋干细胞的水凝胶和生理盐水制备细胞制剂。
【技术特征摘要】
1.一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:S1、取脂肪组织清洗并剪碎,进行消化处理;S2、取消化后的脂肪组织离心得到脂肪干细胞;S3、将分离的脂肪干细胞加入培养基中重悬后进行分离培养;S4、脂肪干细胞原代培养7-9d后进行体外扩增培养;S5、制备明胶水凝胶,并将体外扩增的脂肪干细胞接种于水凝胶中得到包埋干细胞的水凝胶;S6、取新鲜血液离心后得到富血小板血浆,加入包埋干细胞的水凝胶和生理盐水制备细胞制剂。2.根据权利要求1所述的一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法,其特征在于:S1中所述消化处理的步骤为,将剪碎后的脂肪组织加入至消化液中,置于37℃恒温水浴箱中消化40-60min,消化结束后加入与消化液等体积的高糖DMEM终止消化。3.根据权利要求2所述的一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法,其特征在于:所述消化液为0.25%的胰蛋白酶液和0.1%的胶原酶液以体积比1:1混合,所述高糖DMEM中含有体积分数为10%的胎牛血清。4.根据权利要求1所述的一种用于皮肤损伤修复的细胞制剂的制备方法,其特征在于:S3中所述分离培养的步骤为,将S2中离心后的脂肪干细胞加入培养基中重悬,以2x106个/L的密度接种于培养瓶中,置于37℃,5%CO2,饱和湿度培养箱中培养,24h后第一次换液,之后每2...
【专利技术属性】
技术研发人员:张正亮,杨娟,
申请(专利权)人:湖南新起源医疗技术有限公司,
类型:发明
国别省市:湖南,43
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