本发明专利技术涉及组织培养技术领域，尤其涉及一种扶芳藤组织培养的培养基及方法。本发明专利技术提供了适用于扶芳藤新品种银边扶芳藤的组织培养培养基，以1/4MS培养基为基础，添加KT、NAA、TDZ和维生素C进行初代培养，以WPM培养基为基础，添加KT和NAA进行几代培养，以WPM培养基添加NAA作为生根培养基。在本发明专利技术提供培养基的诱导下，经诱导可使增殖系数提高至5.68，幼苗成活率可达93.6％。
Culture medium and method for tissue culture of silver side Euonymus fortunei
The invention relates to the technical field of tissue culture, in particular to a culture medium and a method for tissue culture of Euonymus fortunei. The present invention provides for new varieties of silver Fu Yoshito all rattan tissue culture medium, on the basis of 1/4MS medium, adding KT, NAA, TDZ and vitamin C for primary culture, on the basis of WPM medium added KT and NAA generations of cultured in WPM medium added NAA as root medium. Under the guidance of the culture medium provided by the invention, the proliferation coefficient can be increased to 5.68 by induction, and the seedling survival rate can reach 93.6%.
【技术实现步骤摘要】
一种银边扶芳藤组织培养的培养基及方法
本专利技术涉及组织培养
，尤其涉及一种银边扶芳藤组织培养的培养基及方法。
技术介绍
银边扶芳藤(Euonymusfortunei'EmeraldGaiety')为卫矛科卫矛属常绿藤本灌木，别名爬山火儿、爬藤、爬藤卫矛、爬卫矛、爬行卫矛、滂藤、铺地枫、千层楼、青藤。小枝方梭不明显。生长旺盛，是庭院中常见地面覆盖植物，点缀墙角、山石、老树等，都极为出色。银边扶芳藤从扶芳藤(Euonymusfortunei)中选育出来，其叶片两边为银白色，中间为绿色，叶片冬季银边变为红色，且温度越低颜色越红。此新品种色泽鲜艳，并继承了扶芳藤耐寒抗逆性好的特点，容易养护，是北方缺乏的彩色不落叶植物，具有很大市场潜力的园林树种。为了提高繁殖的效率，并维持母本的优良性状，目前，该新品种主要靠扦插进行繁殖，但扦插繁殖成苗率低，且根系弱、浅，繁殖系数不高。为了在保持母本的优良性状的基础上，达到快速繁殖的目的，应利用组培技术来实现对该扶芳藤新品种的快速繁殖。但是目前并没有适用于该品种的组织培养的培养基。因此，研发一种可提高扶芳藤新品种外植体增殖系数、丛生芽个数及生根率的组织培养的培养基具有重要的现实意义。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种扶芳藤组织培养的培养基及方法，该培养基可提高扶芳藤新品种外植体的增殖系数、丛生芽个数及生根率。本专利技术提供了一种扶芳藤的组培的初代培养基，其为含有0.06mg/L～0.15mg/LKT、0.06mg/L～0.1mg/LNAA、0.0.3mg/L～0.1mg/LTDZ、0.1mg/L维生素C、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/4MS培养基。本专利技术还提供了一种扶芳藤的组培的继代培养基，其为含有0.3mg/L～1mg/LKT、0.07mg/L～0.2mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。本专利技术还提供了一种扶芳藤的组培的生根培养基，其为含有0.01mg/L～0.1mg/LNAA、20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。1/4MS培养基是将MS培养基中大量元素、微量元素、有机物质、铁盐减半而蔗糖、琼脂量不变的培养基，其配方为：NH4NO30.4125g/L、KNO30.475g/L、CaCl2·2H2O0.11g/L、MgSO4·7H2O0.0925g/L、KH2PO40.0425g/L、KI0.2075mg/L、H3BO31.55mg/L、MnSO4·4H2O5.575mg/L、ZnSO4·7H2O2.15mg/L、Na2MoO4·2H2O0.0625mg/L、CuSO4·5H2O0.00625mg/L、CoCl2·6H2O0.00625mg/L、FeSO4·7H2O6.95mg/L、Na2-EDTA·2H2O9.325mg/L、肌醇25mg/L、烟酸0.125mg/L、盐酸吡哆醇(维生素B6)0.125mg/L、盐酸硫胺素(维生素B1)0.025mg/L、甘氨酸0.5mg/L，pH值为5.80。WPM培养基是适用于木本植物的培养基，其配方为K2SO40.99g/L、MgSO4·7H2O0.37g/L、KH2PO40.17g/L、NH4NO30.4g/L、MnSO4·4H2O22.5mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、H3BO36.2mg/L、CuSO4·5H2O0.25mg/L、Na2MoO4·2H2O0.25mg/L、Ca(NO3)2·4H2O0.556g/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、维生素B60.5mg/L、维生素B10.1mg/L、维生素B50.5mg/L，pH值为5.80。激动素(Kinetin，KT)是一种非天然的细胞分裂素，化学名称为6-糖基氨基嘌呤(或N6-呋喃甲基腺嘌呤)，除具有促进细胞分裂的作用外，还具有延缓离体叶片和切花衰老，诱导芽分化和发育及增加气孔开度的作用。萘乙酸(1-Naphthylaceticacid，NAA)，是广谱型植物生长调节剂，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加座果，防止落果，改变雌、雄花比率等。可经叶片、树枝的嫩表皮，种子进入到植株内，随营养流输导到全株。塞苯隆(thidiazuron，TDZ)，是一种新型高效的细胞分裂素用于组培能更好的促进植物的芽分化。维生素C存在植物生长过程中，起保护和屏蔽有害物质与细菌侵害的作用，在植物组织培养基中添加适量维生素C能够起到防止褐变的作用。本专利技术将上述4种物质以特定比例添加到基础培养基中，制得诱导扶芳藤的培养基、诱导扶芳藤丛生芽生根的培养基和扶芳藤组培苗炼苗的培养基，对扶芳藤外植体进行组织培养时，可显著提高扶芳藤的增殖系数、丛生芽发生率及生根率，效果好于现有报道的培养基种类。一些实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的初代培养基，其为含有0.1～0.15mg/LKT、0.08～0.1mg/LNAA、0.05～0.1mg/LTDZ、0.5～1mg/L维生素C、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.8。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的初代培养基，其为含有0.1mg/LKT、0.1mg/LNAA、0.05mg/LTDZ、0.5mg/L维生素C、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.8。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的初代培养基，其为含有0.15mg/LKT、0.08mg/LNAA、0.1mg/LTDZ、1mg/L维生素C、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.8。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的初代培养基，其为含有0.06mg/LKT、0.06mg/LNAA、0.03mg/LTDZ、0.1mg/L维生素C、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.8。一些实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的继代培养基，其为含有0.3～0.5mg/LKT、0.07～0.1mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的继代培养基，其为含有0.3mg/LKT、0.07mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的继代培养基，其为含有0.5mg/LKT、0.1mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的继代培养基，其为含有1mg/LKT、0.2mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。一些实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的生根培养基，其为含有0.01～0.05mg/LNAA、20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的生根培养基，其为含有0.01mg/LNAA、20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的生根培养基，其为含有0.05mg/LNAA、20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。一些具体实施例中，本专利技术提供的扶芳藤的组培的生根培养基，其为含有0.1mg/LN本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种扶芳藤的组培的初代培养基，其特征在于，其为含有0.06mg/L～0.15mg/L KT、0.06mg/L～0.1mg/L NAA、0.0.3mg/L～0.1mg/L TDZ、0.1mg/L维生素C、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/4MS培养基。
【技术特征摘要】
1.一种扶芳藤的组培的初代培养基，其特征在于，其为含有0.06mg/L～0.15mg/LKT、0.06mg/L～0.1mg/LNAA、0.0.3mg/L～0.1mg/LTDZ、0.1mg/L维生素C、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/4MS培养基。2.一种扶芳藤的组培的继代培养基，其特征在于，其为含有0.3mg/L～1mg/LKT、0.07mg/L～0.2mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。3.一种扶芳藤的组培的生根培养基，其特征在于，其为含有0.01mg/L～0.1mg/LNAA、20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基。4.根据权利要求1～3任一项所述的培养基，其特征在于，所述扶芳藤的品种为银边扶芳藤。5.一种扶芳藤的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：将扶芳藤外植体接种到权利要求1所述初代培养基，培养至芽眼萌动；步骤2：所述芽眼萌动的外植体接种至权利要求2所述的继代培养基，培养至分化出丛生苗；步骤3：所述丛生苗转接到权利要求3所述的生根培养基，培养后，经室外炼苗，得到扶芳藤幼苗；所述扶芳藤的品种为银边扶芳藤。6.根据权利要求5所述的组织培养方法，其特征在于，所述外...
【专利技术属性】
技术研发人员：张丹，张茂，王东超，何甜甜，郭冠男，
申请(专利权)人：河南红枫种苗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41
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