The invention discloses a method for preparing sodium dextrin used in starch based Liquor Dialysisintraperitoneus. With natural starch as raw material, using phosphate buffer configured to mass percentage concentration of 5% to 15% of the starch solution, at a certain temperature and under the condition of pH, the first use of alpha amylase on the enzyme, then the debranching enzyme of gelatinized starch debranching enzyme, the solution was precipitated by ethanol purification, ultrafiltration, gel column chromatography, the weight average and number average molecular weight of 1,6 and alpha glycosidic bond and to meet the requirement. Icodextrin with alpha 1,6 glycosidic bond is lower than 10%, average molecular weight is 13000 ~ 19000Da, the number average molecular weight is 5000 ~ 6500Da properties. The present invention provides a preparation method of moxa base dextrin used in starch based Liquor Dialysisintraperitoneus for high yield, good quality and relatively low cost, and makes up the deficiency of the preparation process of the moxa dextrin at present.
【技术实现步骤摘要】
一种淀粉基腹膜透析液用艾考糊精的制备方法
本专利技术涉及淀粉糊精制备的方法,具体是指利用生物技术、膜过滤及柱层析相结合制备淀粉基腹膜透析液的方法。
技术介绍
淀粉基腹膜透析液艾考糊精是艾考糊精腹膜透析液中的主要活性成分。肾透析是一种简单、有效、价廉的方法,适合几乎所有ESRD病人,在我国香港及欧洲等国,80%以上的透析患者选择腹透治疗。艾考糊精(Icodextrin)是由谷物淀粉通过α-1,4和少于10%α-1,6糖苷键连接的水溶性葡萄糖聚合物,重量平均分子量为13000~19000Da,数量平均分子量为5000~6500Da。艾考糊精作为一个胶体渗透剂在长期腹膜透析留置期间完成超滤。在现有的关于艾考糊精腹膜透析液的文献中,只有关于艾考糊精在腹膜透析液中的应用,以及相对于其他渗透剂,这种大分子多糖渗透剂在药物临床上具有的一些优势和目前面临的困难,但是并没有对艾考糊精的制备提供具体的方法。中国专利技术专利2013104530981中有介绍艾考糊精的酸水解制备方法,但是该方法使用的是乌氏粘度计对重均分子量进行测定,测定方法存在的误差较大,并且没有对数均分子量进行测定,重点在于也没有对α-1,6糖苷键的比例进行调控。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种产率高,品质好,成本相对低的淀粉基腹膜透析液用艾考糊精的制备方法,弥补了目前关于艾考糊精制备工艺的不足。本专利技术联合膜过滤与葡聚糖凝胶色谱柱进行分离、提纯,并且采用GPC对重均和数均分子量进行监测,利用1H-NMR对酶解产物的α-1,6糖苷键含量进行了测定。经过本专利技术制备方法所得到的艾考糊精分子量分布范围更 ...
【技术保护点】
一种淀粉基腹膜透析液用艾考糊精的制备方法,其特征在于包括如下步骤:1)将淀粉用磷酸盐缓冲溶液配置成淀粉溶液,并调节pH值至5.8~7.8,置于密闭容器中,在95~99℃下搅拌糊化60~100min后,冷却至70~95℃,加入α‑淀粉酶,用量为每克干淀粉加入α‑淀粉酶1~8U,酶解1~8min,调节pH值至2.5~3.0,并保持10~15min灭酶活,得到淀粉酶解液;2)将步骤1)所得的淀粉酶解液在pH值为5.5~6.5,40~60℃条件下加入脱支酶,用量为每克干淀粉加入脱支酶2~10U,搅拌反应30~60min后,加热至90~100℃并保持10~15min;灭酶活,得到腹膜透析液粗酶解液;3)将步骤2)中腹膜透析液粗酶解液先用乙醇溶液醇沉,静置,离心分离后取其沉淀物,再用蒸馏水洗涤后离心分离,将分离所得的沉淀物干燥;4)将步骤3)得到的沉淀物用蒸馏水配成溶液,采用孔径10k‑20kD超滤膜超滤后,将分子量在10000~20000Da之间的样品经葡聚糖凝胶色谱柱分离提纯,得到不同组分的酶解液,测其重均和数均分子量,测定α‑1,6糖苷键的含量;筛选得到重均分子量为13000~19000Da ...
【技术特征摘要】
1.一种淀粉基腹膜透析液用艾考糊精的制备方法,其特征在于包括如下步骤:1)将淀粉用磷酸盐缓冲溶液配置成淀粉溶液,并调节pH值至5.8~7.8,置于密闭容器中,在95~99℃下搅拌糊化60~100min后,冷却至70~95℃,加入α-淀粉酶,用量为每克干淀粉加入α-淀粉酶1~8U,酶解1~8min,调节pH值至2.5~3.0,并保持10~15min灭酶活,得到淀粉酶解液;2)将步骤1)所得的淀粉酶解液在pH值为5.5~6.5,40~60℃条件下加入脱支酶,用量为每克干淀粉加入脱支酶2~10U,搅拌反应30~60min后,加热至90~100℃并保持10~15min;灭酶活,得到腹膜透析液粗酶解液;3)将步骤2)中腹膜透析液粗酶解液先用乙醇溶液醇沉,静置,离心分离后取其沉淀物,再用蒸馏水洗涤后离心分离,将分离所得的沉淀物干燥;4)将步骤3)得到的沉淀物用蒸馏水配成溶液,采用孔径10k-20kD超滤膜超滤后,将分子量在10000~20000Da之间的样品经葡聚糖凝胶色谱柱分离提纯,得到不同组分的酶解液,测其重均和数均分子量,测定α-1,6糖苷键的含量;筛选得到重均分子量为13000~19000Da,数量平均分子量为5000~6500Da,淀粉中α-1,6糖苷键的摩尔比例低于10%的组分;5)将步骤4)中的最终酶解组分进行干燥,得到腹膜透析液用艾...
【专利技术属性】
技术研发人员:罗志刚,王萍萍,杨庆余,
申请(专利权)人:华南理工大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
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