一种从中华青牛胆中提取的化合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开一种化合物，命名为中华青牛胆碱。另外，本发明专利技术公开一种从中华青牛胆中提取分离到中华青牛胆碱的制备方法，所述制备方法利用酸性醇提取、经过浓缩复溶后，直接使用柱层析，洗出液合并重结晶即可得高纯度的中华青牛胆碱。此外，采用此制备方法，可分离到纯度高达90％～95％的巴马汀、假巴马汀。所述制备方法工艺简单、稳定、重现性好，且能一次同时得到中华青牛胆碱、巴马汀、假巴马汀化合物纯品，节约时间、减少消耗，适合工业化生产，对加快中华青牛胆药材资源综合利用与开发具有积极意义，具有很好的应用前景。

An extract from Tinospora sinensis in compound and preparation method thereof

The invention discloses a compound named Chinese qingniu choline. In addition, the invention discloses a method for extracting and separating from Tinospora sinensis to the preparation method of the green choline, the preparation method of extraction, after concentration after re dissolution by acid alcohol, using column chromatography, the qingniu choline combined eluates recrystallization to obtain high purity. In addition, Martin and pseudo Martin of purity up to 90% to 95% can be separated by this preparation method. The process of the preparation method is simple, stable and reproducible, and can get the cow at the same time, choline, Martin, Pakistan Pakistan Martin pure compounds were false, save time, reduce consumption, suitable for industrial production, is of great significance to accelerate the comprehensive utilization of resources and development of the Chinese green bile medicinal materials, and has good application prospects the.

【技术实现步骤摘要】
一种从中华青牛胆中提取的化合物及其制备方法
本专利技术涉及一种化合物及其制备方法，尤其是一种从中华青牛胆中提取的化合物中华青牛胆碱及其制备方法。
技术介绍
中华青牛胆Tinosporasinensis(Lour.)Merr.为防己科青牛胆属植物中华青牛胆的的干燥根茎,别名宽筋藤、伸筋藤、青筋藤等，味苦，微寒，归肝经，具有舒筋活络，祛风止痛之功效，主要用于风湿痹痛，筋脉拘挛，屈伸不利，跌打损伤，主产于广东、广西、云南、湖南等地，为两广地区常用中药材。巴马汀、假巴马汀均属于季铵类生物碱成分，两者的分子结构式如下所示，巴马汀(又名黄藤素)及其无机酸盐、有机酸盐或衍生物等，有多种药理活性和临床应用价值，如镇痛、降糖、调脂、抗高血压、抗炎、抗菌、抗病毒等，在医药领域应用广泛，需求量极大，但因现行的各种巴马汀高纯品的制作工艺均存在不足，这导致了巴马汀成药面临了缺少原料，供不应求的尴尬状况；假巴马汀因为缺少分离纯化方面的研究，致使其纯品产率低下，以致市面上有售的假巴马汀化学对照品极其稀少、价格高昂。现有技术中没有关于假巴马汀纯化制备的研究报道，而关于巴马汀的纯化制备方法主要为从植物中提取分离纯化或采用化学、生物技术纯化制备，但两种方式各存在不足之处。如申请号为CN103393780A的中国专利申请“一种高纯度黄连总生物碱的提取方法”，其使用酸溶碱沉再盐析的方法仅从植物中提取了总生物碱，但并未进行单体的纯化，未知杂质较多，不利于进一步生产；如申请号为CN102247440A的中国专利申请“一种从黄藤中提取黄藤素粗碱的方法”，其使用硫酸浸泡、减压提取、碱沉盐析的方法只得到纯度较低的巴马汀粗品，且巴马汀的含量偏低，杂质偏多，无法直接使用；如申请号为CN104610252A的中国专利申请“盐酸巴马汀的提取制备方法及其在制备预防和治疗结肠癌药物中的应用”，其提取制备的盐酸巴马汀产品纯度也仅大于85％；如申请号为CN101058575A的中国专利申请“盐酸巴马汀的提取精制方法及其应用”，其虽然能得到含量达99％的盐酸巴马汀，但其必须进行反复多次的酸处理与碱处理，步骤繁琐，耗能大，不适合大规模生产；如申请号为CN102285982的中国专利申请“从中药黄连中分离纯化单体化合物的方法”，其使用高速逆流色谱纯化得到纯度98％以上的巴马汀，但是所采用的方法对技术、设备要求较高，不适合工业化的生产。另外，使用化学合成、生物技术制备巴马汀的方法普遍使用多种有机溶剂和合成原料，在合成过程中产生化学杂质和残留，存在较大的潜在风险。如申请号为CN103980271A的中国专利申请“黄藤素及其类似物的制备方法”、申请号为CN103408544A的中国专利申请“一种黄藤素的制备方法”、申请号为CN102040604的中国专利申请“一种黄藤素的合成方法”、申请号为CN101804054A的中国专利申请“合成巴马汀的用途、制剂及制备”、申请号为CN102875545A的中国专利申请“巴马汀的新制备方法”、申请号为CN104561179A的中国专利申请“一种微生物次级代谢产物盐酸巴马汀及其应用”等，这些专利中所采用的方法普遍使用多种有机溶剂和合成原料，制作成本较高，在合成过程中产生化学杂质和残留，存在较大的潜在风险。由于中华青牛胆中成分复杂，提取中采用不同的提取溶剂和提取方式所提取的提取物性质具有较大差异。根据现有技术中的文献报道，关于中华青牛胆化学成分的提取工艺，如：任艳丽，唐前瑞，张桢.中华青牛胆的化学成分能研究[J]天然产物研究与开发，2008,20:278-279，282，文献中使用95％乙醇回流提取，再用乙酸乙酯萃取后用硅胶柱层色谱分离，但是并未从中得到巴马汀、假巴马汀；韩丹.青风藤提取制备工艺与宽筋藤质量控制方法研究[D].北京：北京中医药大学，2014，使用盐酸-70％乙醇回流提取结合中性氧化铝柱层析进行了生物碱的富集，但并未达到单体的分离纯化。巴马汀、假巴马汀均属于季铵类生物碱，应易溶于酸性溶剂，现文献报道关于从药材中分离纯化得到巴马汀类生物碱的提取方法，也多使用酸性溶剂提取。如：田金凤.玄参和黄连的化学成分分离及其生物活性研究[D].重庆：西南大学，2013，使用盐酸酸化的70％乙醇浸渍提取配合高速逆流色谱分离，产品中发现巴马汀单体；程贝.黄藤中黄藤素提取纯化工艺研究[D].四川：成都中医药大学，2008，使用稀硫酸为提取溶媒，以浸渍法提取，结合大孔树脂对生物碱部位进行富集，再使用吸附色谱精制得到黄藤素。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种化合物，所述化合物是从中华青牛胆中提取分离到的，命名为中华青牛胆碱，所述从中华青牛胆中提取分离中华青牛胆碱的制备方法，能同时从中华青牛胆中提取分离纯化巴马汀、假巴马汀高纯品，且纯度皆高达90％～95％。所述制备方法减少了原料杂质对提取物性质的影响，分离产物性质更稳定，提取分离纯化稳定性更好，同时提高了中华青牛胆药材资源的综合利用，有很大的实际意义、市场效益与学术价值。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种化合物，所述化合物的结构式为：。所述化合物是从中华青牛胆中提取分离到的，命名为中华青牛胆碱，中华青牛胆碱为新天然化合物，专利技术人进一步纯化得到其含量达90％-95％的高纯品，且运用色谱、光谱与核磁等技术。作为本专利技术所述化合物的优选实施方式，所述化合物可制备成药学上可接受的盐，包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、氢氟酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、苦味酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐；优选为盐酸盐。另外，本专利技术提供一种从中华青牛胆中提取分离中华青牛胆碱的制备方法，所述方法包括以下步骤：(1)粉碎中华青牛胆药材原料；(2)制备中华青牛胆提取物：取已粉碎好的中华青牛胆，加酸性乙醇回流提取三次，每次加入的酸性乙醇的体积为中华青牛胆体积的5～15倍量，每次加热回流2～5小时；过滤并合并酸性乙醇提取液，回收、浓缩至小体积，加入NaOH溶液调节pH至中性，继续浓缩至稠膏状，减压干燥，得中华青牛胆提取物；(3)分离纯化中华青牛胆碱：采用有机溶剂将中华青牛胆提取物完全溶解，然后采用溶液干法拌样法，将中华青牛胆提取物均匀拌入拌样用层析硅胶中，干燥，加载于分离用层析硅胶柱床顶端，依次用低极性有机溶剂、低极性有机溶剂与高极性有机溶剂的混合有机溶剂、高极性有机溶剂洗脱，收集洗脱液，通过薄层色谱试验，将含中华青牛胆碱量较高且杂质少的馏分合并，浓缩，干燥，进行重结晶处理，过滤结晶且洗去残余杂质，经测定，得到本专利技术所述纯度高达90％～95％的中华青牛胆碱纯品。作为本专利技术所述从中华青牛胆中提取分离中华青牛胆碱的制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中中华青牛胆为防己科青牛胆属植物中华青牛胆的Tinosporasinensis(Lour.)Merr.的干燥根茎。作为本专利技术所述从中华青牛胆中提取分离中华青牛胆碱的制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中粉碎中华青牛胆药材原料至粒径为50～200目。作为本专利技术所述从中华青牛胆中提取分离中华青牛胆碱的制备方法的优选实施方式，所述步骤(2)中的酸性乙醇的pH为2～本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种化合物，其特征在于，所述化合物的结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种化合物，其特征在于，所述化合物的结构式为：2.一种如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)粉碎中华青牛胆药材原料；(2)制备中华青牛胆提取物：取已粉碎好的中华青牛胆，加酸性乙醇回流提取三次，每次加入的酸性乙醇的体积为中华青牛胆体积的5～15倍量，每次加热回流2～5小时；过滤并合并酸性乙醇提取液，回收、浓缩至小体积，加入NaOH溶液调节pH至中性，继续浓缩至稠膏状，减压干燥，得中华青牛胆提取物；(3)分离纯化：采用有机溶剂将中华青牛胆提取物完全溶解，然后采用溶液干法拌样法，将中华青牛胆提取物均匀拌入拌样用层析硅胶中，干燥，加载于分离用层析硅胶柱床顶端，依次用低极性有机溶剂、低极性有机溶剂与高极性有机溶剂的混合有机溶剂、高极性有机溶剂洗脱，收集洗脱液，通过薄层色谱试验，将含中华青牛胆碱量较高且杂质少的馏分合并，浓缩，干燥，进行重结晶处理，过滤结晶且洗去残余杂质，经测定，得到本发明所述纯度高达90％～95％的化合物。3.如权利要求2所述从化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中中华青牛胆为中华青牛胆的干燥根茎；所述步骤(1)中粉碎中华青牛胆药材原料至粒径为80～200目；所述步骤(2)中的酸性乙醇的pH为2～4，乙醇的质量百分含量为40％～90％；所述步骤(2)中的酸性乙醇中的酸性溶液为无机酸或有机酸，无机酸包括盐酸、硫酸、硝酸、磷酸，有机酸包括甲酸、乙酸、丙酸、苯甲酸、水杨酸、酒石酸；所述步骤(3)中溶解中华青牛胆提取物的有机溶剂包括乙酸乙酯、甲醇、无水乙醇。4.如权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中分离用层析硅胶柱床的制作方法为：取已置于105℃恒温干燥器中加热活化0.5～1小时的柱层析硅胶与干洁玻璃层析柱，使用低极性有机溶剂湿法上柱，并用低极性有机溶剂反复冲压至平整、致密、紧实，得分离用层析硅胶柱床；所述的步骤(3)中所使用的柱层析硅胶的粒径为80～200目所述步骤(3)中的低极性有机溶剂包括石油醚、氯仿、二氯甲烷或苯，高极性有机溶剂为甲醇或无水乙醇，混合有机溶剂为低极性有机溶剂与高极性有机溶剂的混合溶剂。5.如权利要求2或4所述化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中洗脱时采用梯度洗脱的方式，梯度洗脱剂的体积百分比为低极性有机溶剂：高极性有机溶剂＝100:0～0：100。6.如权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中所使用的层析硅胶的质量为中华青牛胆提取物质量的1～1.5倍，分离用层析硅胶加入量为中华青牛胆提取物质量的5～15倍。7.如权利要求2所述化...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁扬洲，冯少斌，张清民，
申请(专利权)人：广东罗浮山国药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44