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一种促进组织修复的新多肽和美洲大蠊总多肽提取物及应用制造技术

技术编号:15420901 阅读:14 留言:0更新日期:2017-05-25 13:23
本发明专利技术涉及中药及天然药物领域,具体涉及一种促进组织修复的新多肽和美洲大蠊总多肽提取物及应用。所述的促进组织修复的新多肽,命名为Periplapeptide A,其结构如式I所示。所述促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物由美洲大蠊虫体经醇提、除脂、反相材料富集得到,其中总多肽质量百分含量>50%,并含有Periplapeptide A。本发明专利技术的新多肽和含有该成分的美洲大蠊总多肽提取物在较低浓度下即可促进小鼠胚胎成纤维细胞的增殖和人永生化表皮细胞的迁移,毒副作用低,具有良好的药用前景,可用于制备治疗创伤、烧伤、溃疡的药物或改善皮肤美感的化妆品和日化用品。H-Ala-Ala-Pro-Tyr-Ala-His-Val-Ala-Ala-Pro-Tyr-Ala-His-Phe-OH式I。

【技术实现步骤摘要】
一种促进组织修复的新多肽和美洲大蠊总多肽提取物及应用
本专利技术涉及中药及天然药物领域,具体涉及一种促进组织修复的新多肽和美洲大蠊总多肽提取物及应用。
技术介绍
组织创伤后的愈合过程是各种修复细胞增殖、分化、迁移和凋亡的过程。炎症、溃疡、烧伤、创伤、手术以及先天性畸形等多种急慢性损伤可引起大面积皮肤缺损、难愈性溃疡和疤痕,并引发许多局部与全身系统的反应,其危害十分严重。多肽药物在促进创面愈合、预防疤痕及治疗慢性溃疡方面具有独特优势。其中表皮生长因子(hEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等多肽具有明显的修复创伤、护肤、抗皱和防衰老作用,但它们的制备成本高、稳定性较差,限制了其应用。美洲大蠊(PeriplanetaamericanaL.)为节肢动物门昆虫纲蜚蠊目蜚蠊科(Blattidae)大蠊属(Peripalneta)昆虫,俗称蟑螂,在我国广泛分布。作为一种传统中药,美洲大蠊具有悠久的入药历史,最早记录于《神农本草经》,称为蜚廉,用于治疗疮痈肿毒、小儿疳积等症。现代药理学研究表明,美洲大蠊具有明显的促进组织修复再生、抗肿瘤及抗肝炎作用(中国中药杂志,2007,32:2326-2331)。目前,以美洲大蠊为主要原料制成的上市药物有康复新液、心脉隆胶囊、肝龙胶囊等,尤其是康复新液在治疗烧伤、烫伤和消化道溃疡等方面具有良好疗效,但其有效成分尚不清楚。已有文献报道美洲大蠊乙醇提取物具有促进粘膜修复(浙江中西医结合杂志,2012,9:689-691)和促进细胞迁移作用(中药与临床,2013,1:34-36),但未明确其有效组分或有效成分;中国专利技术专利200710067707.4介绍了用反相材料制备美洲大蠊抗肿瘤活性部位的方法,但未明确化学成分类型且不涉及促进组织修复的作用;中国专利技术专利ZL201210137422.4公开了一种蟑螂多肽类物质的制备方法及其抗疱疹病毒医药用途,中国专利技术专利ZL201210137410.1介绍了一种蟑螂多肽的制备及其抗革兰氏阳性及阴性菌医药用途,但上述专利不仅未阐明多肽部位的具体化学组成,也未涉及总多肽及多肽单体在促进组织修复方面的应用。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足和缺点,本专利技术的首要目的在于提供一种促进组织修复的新多肽。本专利技术的另一目的在于提供一种促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物,该总多肽含有上述新多肽成分。本专利技术的另一目的在于提供上述促进组织修复的新多肽和美洲大蠊总多肽提取物的制备方法。本专利技术的再一目的在于提供上述新多肽和美洲大蠊总多肽提取物在促进组织修复方面的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现:一种促进组织修复的新多肽,命名为PeriplapeptideA,其全序列一级结构如式I所示:H-Ala-Ala-Pro-Tyr-Ala-His-Val-Ala-Ala-Pro-Tyr-Ala-His-Phe-OH式I;一种促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物,该总多肽提取物含有上述新多肽PeriplapeptideA,且提取物中总多肽的质量百分含量>50%;所述的促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物的制备方法,包含以下步骤:用含水乙醇提取粉碎或未粉碎的美洲大蠊虫体,提取物浓缩,加入10倍体积热水(70℃),保温静置分层,弃去上层油液,水溶液浓缩后经反相C-18柱色谱,采用液相色谱-质谱(HPLC-MS)方法分析跟踪检测,收集含多肽化合物的流份,合并流份,减压浓缩或真空干燥,得到促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物;所述的促进组织修复的新多肽的制备方法,包含以下步骤:将上述促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物进一步通过反相硅胶柱层析、SephadexG-50柱层析和反相制备型HPLC分离纯化,得到促进组织修复的新多肽PeriplapeptideA;所述的促进组织修复的新多肽PeriplapeptideA或美洲大蠊总多肽提取物在制备促进组织修复或改善皮肤美感作用的产品中的应用;所述的产品优选为药物、化妆品或日化用品;进一步优选的,所述的促进组织修复的新多肽或美洲大蠊总多肽提取物在制备治疗创伤、烧伤、溃疡的药物或改善皮肤美感的化妆品和日化用品中的应用;所述的药物、化妆品或日化用品中含有有效剂量的PeriplapeptideA或美洲大蠊总多肽提取物,余量为辅料或其它可配伍的药物;所述的辅料是指常规的赋形剂,如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂和粘合剂等;所述的其它可配伍的药物,是指其它天然药物或化学药品;所述的药品、化妆品或日化用品可以采用片剂、胶囊剂、注射剂、脂质体纳米粒、控释剂、凝胶膏剂、软膏剂、外用搽剂、贴剂(例如面膜)、霜剂(例如面霜)、洗涤剂(例如香波、香皂、泡沫浴或浴盐)、乳液、凝胶、爽肤水等;本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果:(1)本专利技术首次从美洲大蠊中分离和鉴定了具有促进组织修复作用的新多肽化合物PeriplapeptideA,全序列一级结构如式I所示。(2)本专利技术的美洲大蠊总多肽提取物包含上述新多肽PeriplapeptideA,且总多肽含量大于50%。(3)本专利技术的新多肽和含有该化合物的美洲大蠊总多肽提取物在较低浓度(0.39~3.13μg/mL)下即可促进小鼠胚胎成纤维细胞的增殖和人永生化表皮细胞的迁移。(4)本专利技术的新多肽PeriplapeptideA和含有该化合物的美洲大蠊总多肽提取物在体内的毒性很低,在口服400mg/kg剂量下未观察到明显的毒副作用。(5)本专利技术的新多肽PeriplapeptideA和含有该化合物的美洲大蠊总多肽提取物稳定性好,可口服,不易被胃酸等水解,可用于组织修复和治疗消化道溃疡。(6)本专利技术的新多肽和含有该化合物的美洲大蠊总多肽提取物具有美白,去除皱纹、疤痕和色斑作用,可明显改善受试者的皮肤美感。附图说明图1是多肽PeriplapeptideA的1HNMR谱图。图2是多肽PeriplapeptideA的13CNMR谱图。图3是多肽PeriplapeptideA的氨基酸测序谱图。图4是美洲大蠊总多肽提取物对Balb/c3T3细胞增殖影响的结果分析图。图5是多肽PeriplapeptideA对Balb/c3T3细胞增殖影响的结果分析图。图6是美洲大蠊总多肽提取物对Hacat细胞迁移影响的结果分析图。图7是多肽PeriplapeptideA对Hacat细胞迁移影响的结果分析图。图8是美洲大蠊总多肽提取物和PeriplapeptideA对Hacat细胞迁移影响的统计结果分析图。图9是美洲大蠊总多肽提取物的HPLC-MS色谱图。具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述,但本专利技术的实施方式不限于此。以下实施方式采用的液相色谱-质谱(HPLC-MS)分析的条件如下:实验仪器为Agilent6210LC/MSDTOF液质联用仪,质量范围:100-3000,采集模式:正离子模式,GasTemp:300℃,DringGas:11L/min,Nebulizer:35psig,Vcap:2000V,Fragmentor:120V,Skimmer:65V。分析柱为YMCC8色谱柱(4.6×250mm,5μm),色谱条件:流动相A(体积分数0.1%的甲酸水),流动相B(乙腈),0min(A:B=95:5)至本文档来自技高网
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一种促进组织修复的新多肽和美洲大蠊总多肽提取物及应用

【技术保护点】
一种促进组织修复的新多肽,其特征在于:具有式I所示结构,命名为Periplapeptide A;H‑Ala‑Ala‑Pro‑Tyr‑Ala‑His‑Val‑Ala‑Ala‑Pro‑Tyr‑Ala‑His‑Phe‑OH式I。

【技术特征摘要】
1.一种促进组织修复的新多肽,其特征在于:具有式I所示结构,命名为PeriplapeptideA;H-Ala-Ala-Pro-Tyr-Ala-His-Val-Ala-Ala-Pro-Tyr-Ala-His-Phe-OH式I。2.一种促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物,其特征在于:含有权利要求1中所述的PeriplapeptideA,且其中总多肽的质量百分含量>50%。3.权利要求2所述的促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物的制备方法,其特征在于包含以下步骤:用含水乙醇提取粉碎或未粉碎的美洲大蠊虫体,提取物浓缩,加入10倍体积热水,保温静置分层,弃去上层油液,水溶液浓缩后经反相C-18柱色谱,采用液相色谱-质谱方法分析跟踪检测,收集含多肽化合物的流份,合并流份,减压浓缩或真空干燥,得到促进组织修复的美洲大蠊总多肽提取物。4.权利要求1所述的促进组织修复的新多肽的制备方法,其特征在于包含以下步骤:将权利要求3制备得到的美洲大蠊总多肽提取物进一步通过反相硅胶柱层析、SephadexG-50柱层析和反相制备型HPLC分离纯化,得到促进组织修复的新多肽PeriplapeptideA。5.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:叶文才王磊刘忠范春林蒋文贤高贤达
申请(专利权)人:暨南大学
类型:发明
国别省市:广东,44

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