五没食子酰葡萄糖化学对照品的制备方法技术

本发明专利技术涉及五没食子酰葡萄糖化学对照品的制备方法。芒果核仁经乙醇水溶液加热回流提取，再经聚酰胺柱层析分离和反相硅胶柱色谱精制三个步骤，即可获得纯度达98％以上的五没食子酰葡萄糖化学对照品。本发明专利技术工艺步骤简单，采用的乙醇溶剂安全无毒，而且五没食子酰葡萄糖化学对照品得率高，制备量大。

【技术实现步骤摘要】
五没食子酰葡萄糖化学对照品的制备方法一、
本专利技术涉及一种从芒果核仁制备五没食子酰葡萄糖化学对照品的方法。属中药现代化领域。主要包括芒果核仁经乙醇水溶液加热回流提取、聚酰胺柱层析分离、反相硅胶柱色谱精制三个步骤，从而得到五没食子酰葡萄糖化学对照品。五没食子酰葡萄糖化合物其结构式如下：二、
技术介绍
五没食子酰葡萄糖广泛存在于广泛存在于在芒果核仁、白芍、赤芍、五倍子、牡丹皮、黄芩、芦荟、决明子、地锦草、荔枝核、菊花、红花、杜仲和大黄等多种药用植物中，具有抗肿瘤、抗炎、降血糖、抗氧化、抗突变、抗惊厥、抗过敏、抗病毒、抑菌以及抑制肾结石形成等多种药理活性(PharmaceuticalResearch，2009，26(9)：2066-2080)，是中药质量控制的重要指标，但由于缺少对照品，对五没食子酰葡萄糖的质量控制只限于论文发表，在实际中很少应用，所以提供一种制备工艺简单且能大量制备五没食子酰葡萄糖化学对照品的方法具有重要意义。李霄等以白芍为研究对象，从中制备五没食子酰葡萄糖对照品(专利CN10312510B)，但由于五没食子酰葡萄糖在白芍中的含量很低，仅为0.18％(北京中医药大学学报，2009，32(2)：122-124)，所以五没食子酰葡萄糖对照品的得率很低，而且分离时经过两次大孔树脂富集、解吸附，再通过两次凝胶柱层析分离，工艺较为繁琐。芒果为漆树科芒果属热带常绿大乔木，其分布广泛，世界有70多个国家生产芒果，年产量近2.0×107t，其中我国年产量1.0×106t。芒果鲜食或加工后产生大量的果核，果核中的核仁约占芒果总重的20％左右，但芒果核仁常被废弃，未得到有效利用。芒果核仁具有补肾、祛肾寒的功效，用于肾虚、肾寒、腰腿痛、疝气和睾丸炎等症。近年来研究表明，芒果核仁具有抑菌止泻、抗氧化、抗炎等药理作用。芒果核仁是一种有显著药理作用和临床疗效及广阔开发前景的中药材，但芒果核仁常被作为废弃物，未能得到有效利用。五没食子酰葡萄糖为芒果核仁主要化学成分，其在芒果核仁中含量高达3.55-6.0％(品种不同，含量存在差异)，因此从芒果核仁中制备五没食子酰葡萄糖对照品，不仅得率高，而且可以变废为宝。故本专利技术旨在提供一种从芒果核仁中制备五没食子酰葡萄糖化学对照品的制备工艺。本专利技术工艺步骤简单，采用的乙醇溶剂安全无毒，而且没食子酰葡萄糖化学对照品得率高，制备量大。三、
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种从芒果核仁中制备五没食子酰葡萄糖化学对照品的制备工艺。本专利技术工艺步骤简单，采用的乙醇溶剂安全无毒，而且没食子酰葡萄糖化学对照品得率高，制备量大。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：芒果核仁经乙醇水溶液加热回流提取，再经聚酰胺柱层析分离和反相硅胶柱色谱精制三个步骤，即可获得纯度达98％以上的五没食子酰葡萄糖化学对照品。其具体步骤如下：(1)乙醇水溶液提取：将芒果核仁粉碎成粗粉，按照质量体积比kg/L加入10-50倍量的20～95％的乙醇水溶液加热回流提取4～6次，每次1～2h，合并提取液，回收溶剂，得浸膏，浸膏60～80℃真空恒温干燥24h。(2)聚酰胺柱层析分离：干燥后的浸膏以聚酰胺柱层析分离，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50～70％乙醇水溶液依次洗脱，聚酰胺薄层层析检识(展开剂为50∶50的甲醇水溶液，显色剂为0.5％的三氯化铁水溶液)，收集50％～70％乙醇水溶液部位。减压回收溶剂，即得五没食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅胶柱色谱精制：粗品以反相硅胶(C8或C18)柱色谱精制时，依次用水、10％乙醇水溶液、20～50％乙醇水溶液洗脱，聚酰胺薄层层析检识，收集20％～50％乙醇水溶液部位，减压回收溶剂，60～80℃恒温真空干燥24h，即得五没食子酰葡萄糖化学对照品。经高效液相检测，其纯度大于98％以上。以本专利技术从芒果核仁中分离制备五没食子酰葡萄糖化学对照品，具有如下优势和进步：1.芒果核仁常作为废弃物，本专利技术从芒果核仁中制备五没食子酰葡萄糖化学对照品，可以变废为宝。2.本专利技术工艺简单，芒果核仁经乙醇水溶液加热回流提取，再经聚酰胺柱层析分离和反相硅胶柱色谱精制三个步骤，即可获得纯度达98％以上的五没食子酰葡萄糖化学对照品。3.本专利技术所用提取和分离溶剂均为乙醇，安全无毒，可回收，不造成环境污染。4.本专利技术五没食子酰葡萄糖化学对照品得率较高，达到2.0％左右。5.本专利技术制备量大，一次提取和分离，可制备出十克级的对照品。四、附图说明图1为五没食子酰葡萄糖的HPLC分析图谱(273nm)五、具体实施方式现结合实施例和附图对本专利技术做进一步详细说明。实施例仅限于说明本专利技术，而非对本专利技术的限制。实施例1(1)乙醇水溶液提取：将芒果核仁粉碎成粗粉，按照质量体积比kg/L加入50倍量的40％的乙醇水溶液加热回流提取5次，每次1.5h，合并提取液，回收溶剂，得浸膏，浸膏80℃真空恒温干燥24h。(2)聚酰胺柱层析分离：干燥后的浸膏以聚酰胺柱层析分离，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液依次洗脱，聚酰胺薄层层析检识(展开剂为50∶50的甲醇水溶液，显色剂为0.5％的三氯化铁水溶液)，收集50％乙醇水溶液部位。减压回收溶剂，即得五没食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅胶柱色谱精制：粗品以反相硅胶(C8)柱色谱精制时，依次用水、10％乙醇水溶液、20％乙醇水溶液洗脱，聚酰胺薄层层析检识，收集20％乙醇水溶液部位，减压回收溶剂，80℃恒温真空干燥24h，即得五没食子酰葡萄糖化学对照品。其得率为2.05％，经高效液相检测，其纯度大于98％以上。实施例2(1)乙醇水溶液提取：将芒果核仁粉碎成粗粉，按照质量体积比kg/L加入40倍量的50％的乙醇加热回流提取4次，每次1.5h，合并提取液，回收溶剂，得浸膏，浸膏70℃真空恒温干燥24h。(2)聚酰胺柱层析分离：干燥后的浸膏以聚酰胺柱层析分离，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、70％乙醇水溶液依次洗脱，聚酰胺薄层层析检识，收集70％乙醇水溶液部位。减压回收溶剂，即得五没食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅胶柱色谱精制：粗品以反相硅胶(C8)柱色谱精制时，依次用水、10％乙醇水溶液、40％乙醇水溶液洗脱，聚酰胺薄层层析检识，收集40％乙醇水溶液部位，减压回收溶剂，70℃恒温真空干燥24h，即得五没食子酰葡萄糖化学对照品。其得率为2.13％，经高效液相检测，其纯度大于98％以上。实施例3(1)乙醇溶液提取：将芒果核仁粉碎成粗粉，按照质量体积比kg/L加入15倍量的75％的乙醇加热回流提取5次，每次2.0h，合并提取液，回收溶剂，得浸膏，浸膏70℃真空恒温干燥24h。(2)聚酰胺柱层析分离：干燥后的浸膏以聚酰胺柱层析分离，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、60％乙醇水溶液依次洗脱，聚酰胺薄层层析检识，收集60％乙醇水溶液部位。减压回收溶剂，即得五没食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅胶柱色谱精制：粗品以反相硅胶(C18)柱色谱精制时，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液洗脱，聚酰胺薄层层析检识，收集30％乙醇水溶液部位，减压回收溶剂，75℃恒温真空干燥24h，即得五没食子酰葡萄糖化学对照品。其得率为1.98％，经高效液相检测，其纯度大于98％以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备五没食子酰葡萄糖化学对照品的方法，其特征在于按以下步骤进行：(1)乙醇水溶液提取：将芒果核仁粉碎成粗粉，按照质量体积比kg/L加入10～50倍量的20～95％的乙醇水溶液加热回流提取4～6次，每次1～2h，合并提取液，回收溶剂，得浸膏，浸膏60～80℃真空恒温干燥24h。(2)聚酰胺柱层析分离：干燥后的浸膏以聚酰胺柱层析分离，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50～70％乙醇水溶液依次洗脱，聚酰胺薄层层析检识(展开剂为50∶50的甲醇水溶液，显色剂为0.5％的三氯化铁水溶液)，收集50％～70％乙醇水溶液部位。减压回收溶剂，即得五没食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅胶柱色谱精制：粗品以反相硅胶(C

【技术特征摘要】
1.一种制备五没食子酰葡萄糖化学对照品的方法，其特征在于按以下步骤进行：(1)乙醇水溶液提取：将芒果核仁粉碎成粗粉，按照质量体积比kg/L加入10～50倍量的20～95％的乙醇水溶液加热回流提取4～6次，每次1～2h，合并提取液，回收溶剂，得浸膏，浸膏60～80℃真空恒温干燥24h。(2)聚酰胺柱层析分离：干燥后的浸膏以聚酰胺柱层析分离，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50～70％乙醇水溶液依次洗脱，聚酰胺薄层层析检识(展开剂为50∶50的甲醇水溶液，显色剂为0.5％的三氯化铁水溶液)，收集50％～70％乙醇水溶液部位。减压回收溶剂，即得五没食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅胶柱色谱精制：粗品以反相硅胶(C8或C18)柱色谱精制时，依次用水、10％乙醇水溶液、20～50％乙醇水溶液洗脱，聚酰胺薄层层析检识，收集20％～50％乙醇水溶液部位，减压回收溶剂，60～80℃恒温真空干燥24h，即得五没食子酰葡萄糖化学对照品。经高效液相检测，其纯度大于98％...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁叶飞，
申请(专利权)人：泸州飞翔医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51