替诺福韦前药的制备和纯化方法技术

本发明专利技术涉及替诺福韦前药的制备和纯化方法。具体是9‑[(R)‑2‑[[(S)‑[[[1‑(异丙氧基羰基)‑1‑甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤的制备和纯化方法。本方法以包含两种异构体的混合物(中间体1)为起始原料，结晶去除部分杂质得到中间体2，再使用拆分剂对中间体2进行拆分得到中间体3，中间体3经过重结晶，进一步提高纯度得到中间体4，最后游离去除拆分剂得到9‑[(R)‑2‑[[(S)‑[[[1‑(异丙氧基羰基)‑1‑甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤。本发明专利技术避免了HPLC制备柱分离纯化操作，适合工业化生产，且产率高，纯度好。

【技术实现步骤摘要】
替诺福韦前药的制备和纯化方法
本专利技术涉及药物化学合成领域，尤其涉及一种9-[(R)-2-[[(S)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤的制备和纯化方法。
技术介绍
9-[(R)-2-[[(S)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤(Ia)，结构如下所示。9-[(R)-2-[[(S)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤(Ia)是替诺福韦(PMPA)的前药，具有抗人免疫缺陷病毒(HIV)和乙型肝炎病毒(HBV)活性。替诺福韦(PMPA)是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂，可有效对抗多种病毒,用于治疗病毒感染性疾病。由于替诺福韦在生理pH条件下为双负离子的膦酸基团，故替诺福韦不易透过细胞膜吸收，生物利用度很低，并且还存在剂量依赖性肾毒性，限制了其治疗作用，因此必须通过酯化、成盐等手段制成膦酸酯前药才能用于临床。例如，富马酸替诺福韦酯(Tenofovirdisoproxilfumarate)是吉里德科学公司(GileadScience)研发的第一代口服有效的替诺福韦前药，用于治疗艾滋病感染和乙型肝炎。由于富马酸替诺福韦酯对由血清酶介导的水解反应高度敏感，不能有效增加作用部位药物浓度，同时在代谢过程释放两当量的具有潜在毒性的甲醛，在临床治疗过程中发现乳酸性酸中毒，严重的肝肿大，以及脂肪代谢障碍等副作用。为了提高替诺福韦前药在血浆中的稳定性，降低其代谢产物-替诺福韦在血浆中的浓度从而降低药物毒性，许多制药公司正在进行研究和开发新一代替诺福韦前药，并已取得了一些成果，有的新型前药已处在I/II临床研究阶段，例如，WO0208241披露了一类用天然氨基酸(单取代)合成的替诺福韦磷酰胺酯前药(例如，GS-7340)，GS-7340与替诺福韦酯和替诺福韦相比，GS-7340在PBMCs中产生的活性成分替诺福韦总浓度为替诺福韦酯和替诺福韦的10倍和30倍。然而，GS-7340在血浆中还有一定程度的降解，在血浆中可检测到1-2％的代谢产物-替诺福韦，从而不可避免地存在像替诺福韦酯所产生的毒副作用，导致药物使用的安全性存在问题。因此，进一步研究开发具有高疗效低毒性的替诺福韦前药具有重要意义。本公司意外地发现了一种与现有技术相比药效更高而副作用大幅降低的化合物Ia(专利PCT/CN2013/079123)，与GS-7340相比，Ia在血浆中足够稳定，其代谢产物-替诺福韦在血浆中完全检测不到，而其在PBMCs中的浓度反而大大提高了。化合物Ia与GS7340一样，在细胞内都会释放出活性成分PMPA。其辅助基团设计巧妙，结构上和GS7340只有一个甲基的区别，辅助基团在细胞内的脱落机制和方式与GS7340基本相同。可以预见，化合物Ia由于吸收和分布上优势，将比TDF等前药更为有效地发挥其活性成分PMPA的药效，作为最有潜力的新一代PMPA前药造福于广大患者。在专利PCT/CN2013/079123中报道了化合物Ia的制备方法，如下所示。9-(R)-[2-[(苯氧基氧膦基)甲氧基]丙基]腺嘌呤(起始原料A)和2-氨基异丁酸异丙酯(起始原料B)经过缩合得到中间体1(含有Ia和Ib)，再经过HPLC制备分离得到化合物Ia。专利PCT/CN2013/079123报道的制备方法仅适合毫克级规模的制备，不适宜于工业化生产。为将该药物快速推向市场，造福于广大患者，急需开发一种适合工业化生产的制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决上述技术问题，提供一种适合工业化生产的9-[(R)-2-[[(S)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤，即替诺福韦前药的制备和纯化方法。本专利技术的制备和纯化方法是通过下述方案实现的：(1)以包含式Ia化合物和式Ib化合物的混合物中间体1为起始原料，结晶去除部分杂质得到中间体2；(2)使用拆分剂X对中间体2进行拆分得到中间体3；(3)中间体3经过重结晶，进一步提高纯度得到中间体4；(4)游离去除拆分剂得到目标化合物，其中，式Ia化合物和式Ib化合物的结构如下所示：进一步的，本专利技术的制备和纯化方法包括下列步骤：(1)将包含式Ia和式Ib化合物的中间体1溶解于有机溶剂A中，过滤，将滤液浓缩干得到中间体2；(2)将中间体2用有机溶剂B溶解，加入拆分剂X，搅拌析晶，过滤得到中间体3；(3)将中间体3用有机溶剂C溶解，重结晶，过滤得到中间体4；(4)游离去除拆分剂得到目标化合物。其中，包含式Ia化合物和式Ib化合物的中间体1可以是化学合成领域普通技术人员所掌握的常规方法制得的，优选的，可以参照PCT/CN2013/079123所公开的方法制备，作为本专利技术的一种应用之一，上述技术方案可以作为一种拆分包含式Ia和式Ib化合物混合物的方法，进一步的，可以作为从上述两种对映异构体的混合物中分离并纯化得到式Ia化合物的方法。进一步优选的，本专利技术制备和纯化式(Ia)化合物的方法包括下列步骤：a.9-(R)-[2-[(苯氧基氧膦基)甲氧基]丙基]腺嘌呤(起始原料A)和2-氨基异丁酸异丙酯(起始原料B)为起始原料，经过缩合得到含有式Ia化合物和式Ib化合物的中间体1；b.将中间体1溶解于有机溶剂A中，部分异构体杂质式Ib化合物从溶液中析出，过滤去除析出的异构体杂质式Ib化合物，将滤液浓缩干得到包含式Ia化合物和式Ib化合物的中间体2；c.将中间体2用有机溶剂B溶解，加入拆分剂X，搅拌析晶，过滤得到含有式Ia、式Ib化合物和拆分剂的中间体3；d.将中间体3用有机溶剂C溶解，重结晶，过滤得到含有式Ia、式Ib化合物和拆分剂的中间体4；e.游离去除拆分剂得到9-[(R)-2-[[(S)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤。本专利技术优选的合成路线如下所示。优选的，步骤a所得中间体1中式Ia化合物与式Ib化合物的比例为0.4～1.1:1。步骤b所得中间体2中式Ia化合物与式Ib化合物的比例为2～5:1。步骤c中所述拆分剂X选自D-樟脑-10-磺酸，D-扁桃酸，D-酒石酸，D-二对甲基苯甲酰酒石酸无水物，D-二对甲基苯甲酰酒石酸一水合物，D-二苯甲酰酒石酸一水合物，D-二苯甲酰酒石酸无水物或D-二乙酰酒石酸，优选D-二苯甲酰酒石酸无水物。步骤c所得中间体3中式Ia化合物与式Ib化合物的比例为19～30:1。步骤d所得中间体4中式Ia化合物与式Ib化合物的比例为49:1～199:1。优选的，所述有机溶剂A、有机溶剂B和有机溶剂C各自独立地选自乙酸乙酯/甲基叔丁基醚，乙酸乙酯/异丙醚，乙酸乙酯/石油醚，乙酸乙酯/环己烷，乙酸乙酯/正己烷，乙酸乙酯/环己烷，乙酸乙酯/正庚烷，二氯甲烷/甲基叔丁基醚，二氯甲烷/异丙醚，二氯甲烷/石油醚，二氯甲烷/环己烷，二氯甲烷/正己烷，二氯甲烷/环己烷，，二氯甲烷/正庚烷，丙酮/甲基叔丁基醚，丙酮/异丙醚，丙酮/石油醚，丙酮/环己烷，丙酮/正己烷，丙酮/环己烷，丙酮/正庚烷，乙醇/水，甲醇/水，异丙醇/水，丙酮/水，乙腈/水，四氢呋喃/水或二氧六环/水；优选乙酸乙酯/甲基叔丁基醚，本文档来自技高网...

【技术保护点】
式(Ia)所示9‑[(R)‑2‑[[(S)‑[[[1‑(异丙氧基羰基)‑1‑甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤的制备和纯化方法，包括：1)以包含式Ia化合物和式Ib化合物的混合物中间体1为起始原料，结晶去除部分杂质得到中间体2；2)使用拆分剂X对中间体2进行拆分得到中间体3；3)中间体3经过重结晶，进一步提高纯度得到中间体4；4)游离去除拆分剂得到目标化合物，

【技术特征摘要】
1.式(Ia)所示9-[(R)-2-[[(S)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤的制备和纯化方法，包括：1)以包含式Ia化合物和式Ib化合物的混合物中间体1为起始原料，结晶去除部分杂质得到中间体2；2)使用拆分剂X对中间体2进行拆分得到中间体3；3)中间体3经过重结晶，进一步提高纯度得到中间体4；4)游离去除拆分剂得到目标化合物，2.根据权利要求1所述的制备和纯化方法，包括以下步骤：1)将包含式Ia化合物和式Ib化合物的混合物中间体1溶解于有机溶剂A中，结晶，过滤，将滤液浓缩干得到中间体2；2)将中间体2用有机溶剂B溶解，加入拆分剂X，搅拌析晶，过滤得到中间体3；3)将中间体3用有机溶剂C溶解，重结晶，过滤得到中间体4；4)游离去除拆分剂得到目标化合物。3.根据权利要求1-2任意一项所述的制备和纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：a.以9-(R)-[2-[(苯氧基氧膦基)甲氧基]丙基]腺嘌呤为起始原料A和2-氨基异丁酸异丙酯为起始原料B，经过缩合得到含有式Ia化合物和式Ib化合物的中间体1；b.将中间体1溶解于有机溶剂A中，部分异构体杂质式Ib化合物从溶液中析出，过滤去除析出的异构体杂质式Ib化合物，将滤液浓缩干得到包含式Ia化合物和式Ib化合物的中间体2；c.将中间体2用有机溶剂B溶解，加入拆分剂X，搅拌析晶，过滤得到中间体3；d.将中间体3用有机溶剂C溶解，重结晶，过滤得到含有式Ia化合物、式Ib化合物和拆分剂的中间体4；e.游离去除拆分剂得到9-[(R)-2-[[(S)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧...

【专利技术属性】
技术研发人员：余俊，赵明礼，陈明，
申请(专利权)人：江苏豪森药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32