The present invention provides a method for observation, and composition, scanning electron microscope and transmission electron microscope method under the suppression of vacuum evaporation by electron microscopy observation of biological samples in the survival of the state can use the electronic microscope, and can observe the activities. Methods to observe the samples by electron microscopy of the invention comprises the following steps: in the application of the sample surface containing from two amphiphilic compounds, grease and ionic liquids in at least 1 of the composition for forming a thin film evaporation, thus using thin film covering the sample process; and in the display of electronic microscope image samples contained in the vacuum chamber the cover of the film sample process device.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用电子显微镜观察生物试样的方法和蒸发抑制用组合物
本专利技术涉及对于扫描电子显微镜、透射电子显微镜等,用于以原本状态观察生物试样的利用电子显微镜的观察方法及用于其的在真空下的蒸发抑制用组合物、扫描电子显微镜和透射电子显微镜。
技术介绍
为了使用扫描电子显微镜和透射电子显微镜进行试样观察,要预先将试样置于真空下,因此,有必要赋予试样以耐真空性和为了获得图像而必要的导电性。扫描电子显微镜的试样的制备可如下地进行:通过预先对试样进行真空干燥而除去水分后,为了赋予导电性并提高二次电子的产生效率,利用蒸镀、溅射等方法对导电材料(铂、碳、金、钯、锇等)的试样表面进行包覆。对于像金属、半导体等这样具有导电性、有耐真空性的材料而言这样的前处理不是必要,但对于没有导电性的材料而言通过导电性材料的导电膜覆盖是必要的。另外,耐真空性等差的材料,即为真空干燥、电子显微镜观察时在真空中由于电子束照射而变形的材料的情况下,通过导电性材料的导电膜覆盖也是必要的。由于生物/活体试样含有大量的水分,需要预先真空干燥的情况较多。因此,有表面的形状显著变形的情况,不容易以本身的状态用电子显微镜观察存活状态。凝胶状物质、食品等湿润试样的含水状态可以使用低真空SEM、冷冻SEM、环境控制型SEM(ESEM)等在常温下观察。根据这些方法,不限于湿润试样,可以在未处理的状态下观察试样。但是,为了实施以高倍率的观察,有必要抽成高真空,试样的耐真空性或导电性也是必要的。因此,在进行生物/活体试样的观察时,不容易得到存活状态下的高倍率的成像。近年来,提出了使用离子液体的电子显微镜观察方法。专利文献1和非专 ...
【技术保护点】
一种利用电子显微镜观察生物试样的方法,其包括以下工序:在生物试样的体表应用蒸发抑制用组合物的工序,所述蒸发抑制用组合物含有选自两亲性化合物、油脂类及离子液体中的至少1种;向应用了蒸发抑制用组合物的生物试样照射电子射线或等离子体,从而在生物试样的体表形成作为薄膜的赋予真空下的水/气体阻隔性能的聚合膜,利用所述聚合膜覆盖生物试样,抑制从生物试样体内的蒸发,从而维持生物试样本身的形态的工序;以及将收容于真空下的试样室的用所述聚合膜覆盖的生物试样的电子显微镜图像显示于显示装置的工序。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.09.09 JP 2011-197685;2012.02.29 JP 2012-044381.一种利用电子显微镜观察生物试样的方法,其包括以下工序:在生物试样的体表应用蒸发抑制用组合物的工序,所述蒸发抑制用组合物含有选自两亲性化合物、油脂类及离子液体中的至少1种;向应用了蒸发抑制用组合物的生物试样照射电子射线或等离子体,从而在生物试样的体表形成作为薄膜的赋予真空下的水/气体阻隔性能的聚合膜,利用所述聚合膜覆盖生物试样,抑制从生物试样体内的蒸发,从而维持生物试样本身的形态的工序;以及将收容于真空下的试样室的用所述聚合膜覆盖的生物试样的电子显微镜图像显示于显示装置的工序。2.如权利要求1所述的利用电子显微镜观察生物试样的方法,其中,通过在电子显微镜的试样室内向试样照射试样观察用电子射线,从而使聚合反应进行,在试样表面形成作为薄膜的聚合膜。3.如权利要求1所述的利用电子显微镜观察生物试样的方法,其中,通过在利用电子显微镜观察试样之前,预先向试样照射与电子显微镜的试样观察用电子射线相区别的电子射线或等离子体,从而使聚合反应进行,在试样表面形成作为薄膜的聚合膜。4.如权利要求1~3中任一项所述的利用电子显微镜观察生物试样的方法,其中,蒸发抑制用组合物含有两亲性化合物以及选自金属化合物及糖中的至少1种。5.如...
【专利技术属性】
技术研发人员:针山孝彦,高久康春,铃木浩司,村中祥悟,太田勋,下村政嗣,石井大佑,
申请(专利权)人:独立行政法人科学技术振兴机构,
类型:发明
国别省市:日本,JP
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