包含双膦酸盐剂的细胞性免疫用疫苗药物组合物制造技术

本发明专利技术的目的在于，提供能够普遍用于对各种抗原进行细胞性免疫诱导的、发挥高的细胞性免疫诱导效果的疫苗药物组合物。本发明专利技术为一种疫苗药物组合物，其为用于细胞性免疫诱导的疫苗药物组合物，其包含抗原和作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂。

Cellular immune vaccine drug composition comprising bisphosphonates

It is an object of the present invention to provide a vaccine drug composition that can be widely used for inducing cellular immunity to various antigens and exerts a high cellular immunity induction effect. The present invention is a vaccine pharmaceutical composition, a vaccine drug composition for cellular immunity induction comprising antigen and a first cellular immune induction promoter as a bisphosphonate.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含双膦酸盐剂的细胞性免疫用疫苗药物组合物
本专利技术涉及用于细胞性免疫诱导的疫苗药物组合物。
技术介绍
一般被广泛使用的疫苗为了诱导用于感染症预防的免疫而将微生物或病毒等病原体或其一部分进行给药。除此之外，还有：以使细胞性免疫机制识别癌细胞特异性抗原、诱导利用免疫体系对癌细胞的特异性攻击为目的的癌疫苗，作为癌治疗手段之一而被使用。利用疫苗给药的免疫中，一般利用皮下或皮内注射、肌肉内注射等注射。特别是用于感染症预防的免疫的情况下，通常，微生物或病毒由于其尺寸而阻止通过皮肤向体内的侵入，因此，疫苗必须以侵入的方式向体内给药。作为利用注射的免疫中使用的佐剂或免疫活化剂，氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝等铝盐、MF59、AS03等包含角鲨烯的乳剂等被实用化，除此之外，还广泛研究了鞭毛成分、核酸、细胞因子、阳离子聚合物、多肽等。然而，注射中，疼痛、恐怖心理、注射痕迹和紧随其的瘢痕化、重复进行给药时，从住院成为患者生活的负担等患者的QOL的观点出发存在问题，特别是给药次数多的癌疫苗的情况下，这些问题变显著。进一步，有如下问题：仅允许医疗从业者、免疫效果高的皮内注射的给药手法难、有医疗从业者的针刺感染事故的风险、产生注射针等需要特殊废弃的医疗废弃物等，因此，注射未必说是最佳的给药途径。另外，利用注射的免疫中，迄今为止使用的佐剂或免疫活化剂的大部分是为了预防感染症而使抗体产生的物质。作为诱导细胞性免疫的物质(细胞性免疫诱导促进剂)，研究了GM-CSF、IL-2、IL-12、IFN-γ等Th1细胞因子、利用抗原的缓释性而提高效果的油脂系佐剂即弗式佐剂、Montanide等，但在为受限的种类的基础上，无法达到实用化，安全性与效果的平衡性方面也存在问题。作为除了注射之外的疫苗的给药途径，例如尝试了经皮给药(参照专利文献1和非专利文献1)、颊侧给药、鼻腔给药、舌下给药等(参照非专利文献2、专利文献2和3)。特别是，皮肤上存在大量的作为抗原呈递细胞的朗格汉斯细胞，因此，作为解决涉及注射的各种问题的一个手段，研究了经皮给药或经粘膜给药。作为利用经皮给药或经粘膜给药的免疫中研究的佐剂或免疫活化剂，可以举出：氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝等铝盐、霍乱毒素、大肠杆菌非耐热性毒素等毒素类等。然而，经皮给药或经粘膜给药中，迄今为止使用的佐剂或免疫活化剂的大部分是使体液免疫诱导的，作为细胞性免疫诱导促进剂，为霍乱毒素、大肠杆菌易热性毒素等毒素类、核酸类等有少量报道的程度。另外，迄今为止，利用抗原的经皮给药的细胞性免疫诱导中能够使用的有效的免疫活化剂基本没有被报道，经皮给药中，与注射相比，大多情况下，无法得到充分的细胞性免疫诱导效果。另一方面，近年来可知，作为骨质疏松症治疗药的双膦酸盐剂有如下作用：刺激树突状细胞或γδT细胞、使免疫应答活化，作为免疫活化剂的新的用途受到关注。然而，γδT细胞在末梢血中仅存在1～5％，单纯地仅给予双膦酸盐剂时，无法期待充分的治疗效果。因此，进行了如下免疫细胞疗法：从患者末梢血分离γδT细胞，在invitro(生物体外)进行刺激，与其他免疫活性细胞进行共培养后，再次回到患者(参照专利文献4、5和6)。另外，还报道了如下例子：在数天前注射双膦酸盐剂，刺激树突状细胞等，之后给予作为疫苗的病毒抗原，从而诱导充分的抗体产生(专参照利文献7)。现有技术文献专利文献专利文献1：美国专利申请公开第2008/0193487号说明书专利文献2：日本特表2002-531415号公报专利文献3：美国专利申请公开第2008/0112974号说明书专利文献4：国际公开第2006/006638号小册子专利文献5：国际公开第2007/029689号小册子专利文献6：日本特开2010-259373号公报专利文献7：国际公开第2012/054807号小册子非专利文献非专利文献1：HosoiAkihiroetal.，CancerResearch，68，3941-3949(2008)非专利文献2：ZhengrongCuietal.，PharmaceuticalResearch，Vol.19，No.7，947-953(2002)
技术实现思路
专利技术要解决的问题本专利技术的目的在于，提供能够普遍用于对各种抗原进行细胞性免疫诱导的、发挥高的细胞性免疫诱导效果的疫苗药物组合物。用于解决问题的方案本专利技术人等着眼于，作为骨质疏松症治疗药的双膦酸盐剂在体外(invitro)刺激树突状细胞或γδT细胞，可以诱导有效的细胞性免疫。γδT细胞具有通过抗原刺激而分泌IFN-γ、TNF-α等h1细胞因子而诱导细胞性免疫的作用。然而，γδT细胞在末梢血中仅存在1～5％，可以认为仅单纯地给药双膦酸盐剂时，无法诱导充分的细胞性免疫。另一方面，在粘膜上皮层和真皮内存在大量的γδT细胞，对外敌的侵入立即进行反应，承担自然免疫那样的作用。本专利技术人等着眼于该观点，发现：通过将作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂与抗原一起，通过体表面上的给药(例如、经皮给药或经粘膜给药)直接给药至生物体，从而刺激树突状细胞或γδT细胞，可以有效果地诱导抗原特异性的细胞性免疫。另外，本专利技术人等发现：通过组合使用作为辅助肽的第二细胞性免疫诱导促进剂，从而可以进一步促进细胞性免疫。另外，本专利技术人等发现：通过组合使用抑制由双膦酸盐剂所导致的炎症的抗氧化剂和/或抗炎症剂，从而可以进一步促进细胞性免疫。需要说明的是，体外(invitro)中得到的见解未必预测体内(invivo)中引起的生物体反应。即，本专利技术为一种疫苗药物组合物，其为用于细胞性免疫诱导的疫苗药物组合物，其包含抗原和作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂。本专利技术的疫苗药物组合物优选还包含作为辅助肽的第二细胞性免疫诱导促进剂。上述作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂优选为选自由依替膦酸盐(etidronate)、氯膦酸盐(clodronate)、替鲁膦酸盐(tiludronate)、帕米膦酸盐(pamidronate)、阿仑膦酸盐(alendronate)、伊班膦酸盐(ibandronate)、奈立膦酸盐(neridronate)、唑来膦酸盐(zoledronate)、利塞膦酸盐(risedronate)和米诺膦酸盐(minodronate)组成的组中的至少一种。本专利技术的疫苗药物组合物优选还包含抗氧化剂和/或抗炎症剂。本专利技术的疫苗药物组合物优选对体表面上给药。以下，对本专利技术进行详述。本专利技术的疫苗药物组合物是为了细胞性免疫诱导而使用的。定量地测定细胞性免疫诱导效果的方法没有特别限定，开发了各种方法，例如可以通过使用免疫评价用模型动物的免疫诱导实验和ELISPOT方法(IFN-γ)来测定。作为用于ELISPOT方法的样品，例如可以举出：免疫评价用模型动物的脾脏。本专利技术的疫苗药物组合物包含抗原和作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂。通过包含上述抗原和上述作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂，从而本专利技术的疫苗药物组合物可以有效地诱导抗原特异性的细胞性免疫。本说明书中使用时，术语“抗原”是指，能够诱导免疫应答的所有物质。上述抗原没有特别限定，例如可以举出：蛋白质、肽等。要求抗原的皮肤透过性的经皮给药中，优选使用分子量小的抗原，可以使用例如包含约8～12个氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种疫苗药物组合物，其特征在于，其为用于细胞性免疫诱导的疫苗药物组合物，其包含抗原和作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.09.03 JP 2014-1791231.一种疫苗药物组合物，其特征在于，其为用于细胞性免疫诱导的疫苗药物组合物，其包含抗原和作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂。2.根据权利要求1所述的疫苗药物组合物，其还包含作为辅助肽的第二细胞性免疫诱导促进剂。3.根据权利要求1或2所述的疫苗药物组合物，其中，作为双膦酸盐剂的第一细胞性免疫诱导促进剂为选自由依替膦酸盐、氯膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、阿仑膦酸盐、伊班膦酸盐、奈立膦酸盐、唑来膦酸盐、利塞膦酸盐和米诺膦酸盐组成的组中的至少一种。4.根据权利要求3所述的疫苗药物组合物，其还包含抗氧化剂和/或抗炎症剂。5.根据权利要求4所述的疫苗药物...

【专利技术属性】
技术研发人员：宍户卓矢，浅利大介，堀光彦，
申请(专利权)人：日东电工株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP