ENST00000418539.1及制剂或诊断剂或药物或试剂盒和应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，是一种长链非编码RNA ENST00000418539.1及制剂或诊断剂或药物或试剂盒及检测其的方法及其应用；该长链非编码RNA ENST00000418539.1的序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术利用长链非编码表达谱芯片技术，通过差异分析，筛选到一条在稳定型心绞痛患者血液中显著高表达的长链非编码RNA ENST00000418539.1，进一步丰富了稳定型心绞痛发病机制的研究。

ENST00000418539.1 and preparations or diagnostic agents or drugs or kits and Applications

The present invention relates to the technical field of gene engineering, is a long chain of non RNA and ENST00000418539.1 encoding preparation or diagnostic agent or drug or kit and the detection method and its application; the sequence of long chain non RNA encoding ENST00000418539.1 as shown in SEQ ID NO:1. The invention uses a long chain of non microarray encoding, through difference analysis, screened a long chain in the blood of patients with angina pectoris in stable type significantly high expression of non RNA encoding ENST00000418539.1, enrich the study of the pathogenesis of stable angina pectoris.

【技术实现步骤摘要】
ENST00000418539.1及制剂或诊断剂或药物或试剂盒和应用
本专利技术涉及基因工程
，是一种长链非编码RNAENST00000418539.1及制剂或诊断剂或药物或试剂盒及检测其的方法及其应用，即ENST00000418539.1及制剂或诊断剂或药物或试剂盒和应用。
技术介绍
稳定型心绞痛(Stableangina,SA)是一种威胁人类健康的心血管疾病，尽管其预后良好，但仍有部分患者在确诊后几个月至几年内，发生急性心肌梗死和中风等心血管事件，甚或死亡，严重威胁人们的生命及生活质量。虽然该疾病有包括药物治疗在内的众多治疗手段，每年占据巨大的医疗资源，但尽管医疗手段的进步和投入的加大，SA的发病率和病死率仍居高不下。SA的早期诊断对于预防心绞痛发展为临床心血管事件具有重要价值，可以提高心绞痛患者的生存率并能够改善长期预后。因此，寻找能够早期诊断SA患者并有较高敏感性及特异性的新的生物标志物显得尤为必要。长链非编码RNA(longnon-codingRNAs，lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，一般不编码蛋白，由RNA聚合酶II转录并经可变剪切形成，转录水平低于蛋白质编码基因，曾一度被认为是基因组转录的“噪音”。已证实，长链非编码RNA在表观遗传学、转录调控、转录后调控等多种层面调控基因表达，在多种生物学进程中发挥重要作用，包括脂肪代谢、动脉粥样硬化形成、胚胎发育及肿瘤的发生等。
技术实现思路
本专利技术提供了一种长链非编码RNAENST00000418539.1的制剂或诊断剂或药物或试剂盒，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决稳定型心绞痛的早期诊断对于预防心绞痛发展为临床心血管事件具有重要价值，可以提高心绞痛患者的生存率并能够改善长期预后，寻找能够早期诊断稳定型心绞痛患者并有较高敏感性及特异性的新的生物标志物显得尤为必要的问题，本专利技术发现其表达或功能异常与人类心血管疾病的发生和发展密切相关，长链非编码RNA有望成为心血管疾病诊断、预测预后的标志物，同时也为心血管病的治疗提供了新的靶点。本专利技术的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种在稳定型心绞痛患者血液中高表达的长链非编码RNAENST00000418539.1，该长链非编码RNAENST00000418539.1的序列如SEQIDNO:1所示。下面是对上述专利技术技术方案之一的进一步优化或/和改进：上述该长链非编码RNAENST00000418539.1为ENST00000418539.1:1的全长或片段。本专利技术的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种体外检测血液中长链非编码RNAENST00000418539.1的制剂或诊断剂或药物或试剂盒，该制剂或诊断剂或药物或试剂盒包括特异性引物对、标准DNA模板、PCR反应液，其中，特异性引物对包括上游引物和下游引物，上游引物的核苷酸序列为SEQIDNo:2，下游引物的核苷酸序列为SEQIDNo:3。下面是对上述专利技术技术方案之二的进一步优化或/和改进：上述该试剂盒为荧光定量PCR检测试剂盒。上述特异性引物对用于SYBRGreen、Taqman探针、分子信标、双杂交探针、复合探针的检测。上述PCR反应液为荧光定量PCR反应液。上述荧光定量PCR反应液包括dNTP、Mg2+、Taq酶。上述还包括荧光染料。本专利技术的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种检测根据技术方案之一所述的长链非编码RNAENST00000418539.1的方法，按下述步骤进行：第一步，提取血液总RNA；第二步，制备cDNA；第三步，定量扩增长链非编码RNAENST00000418539.1。本专利技术的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种根据技术方案之一所述的长链非编码RNAENST00000418539.1在制备用于检测稳定型心绞痛的试剂盒或用作检测稳定型心绞痛药物的新靶点的应用。本专利技术利用长链非编码表达谱芯片技术，通过差异分析，筛选到一条在稳定型心绞痛患者血液中显著高表达的长链非编码RNAENST00000418539.1，进一步丰富稳定型心绞痛发病机制的研究，同时，本专利技术所述的体外检测稳定型心绞痛相关基因即长链非编码RNAENST00000418539.1的试剂以及本专利技术所述的体外检测稳定型心绞痛相关基因即长链非编码RNAENST00000418539.1的试剂盒能够用于本专利技术所述的长链非编码RNAENST00000418539.1的表达水平的检测，通过本专利技术所述的长链非编码RNAENST00000418539.1的表达水平的检测结果获知稳定型心绞痛的筛查结果，为稳定型心绞痛的诊断和治疗提供了新方向。附图说明附图1为本专利技术中长链非编码RNA表达谱芯片检测ENST00000418539.1在健康对照组与稳定型心绞痛组中的检测信号值。附图2为本专利技术中针对长链非编码RNAENST00000418539.1的序列设计的一对特异性引物PCR扩增后行琼脂糖凝胶电泳测试引物的效果。附图3为本专利技术中qRT-PCR检测RNAENST00000418539.1在健康对照组与稳定型心绞痛组中的相对表达量。具体实施方式本专利技术不受下述实施例的限制，可根据本专利技术的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。在本专利技术中，为了便于描述，各部件的相对位置关系的描述均是根据说明书附图1的布图方式来进行描述的，如：上、下、左、右等的位置关系是依据说明书附图的布图方向来确定的。本专利技术利用长链非编码表达谱芯片技术，通过差异分析，筛选到一条在稳定型心绞痛患者血液中显著高表达的长链非编码RNAENST00000418539.1，其转录区域位于2号染色体，起始位置为47,558,199至47,571,656，全长13,458bp。与健康人的血液含量相比，长链非编码RNAENST00000418539.1在稳定型心绞痛患者血液中显著高表达，并在样本的荧光定量实验中进一步证实长链非编码RNAENST00000418539.1在稳定型心绞痛患者血液中显著高于健康人。这一新型的长链非编码RNAENST00000418539.1将进一步丰富稳定型心绞痛发病机制的研究，也为稳定型心绞痛的早期诊断及预后监测提供了新的血液分子标志物和治疗靶点。专利技术人提供的稳定型心绞痛患者和健康人的血液标本各5个，共10例。通过ABI公司的Trizol试剂(货号15596-026)所需步骤提取总RNA后，采用北京博奥生物工程有限公司的芯片产品(AgilenthumanlncRNA+mRNAArrayV4.0)进行检测，筛选出一条在稳定型心绞痛患者血液中显著高表达的长链非编码RNAENST00000418539.1，其核酸序列如SEQIDNo.1所示。后期经过对样本进行荧光定量PCR验证，发现10个样本中稳定型心绞痛患者显著高于健康人。长链非编码RNAENST00000418539.1作为稳定型心绞痛的新靶点，为稳定型心绞痛的临床治疗和药物开发提供理论基础。实施例1，一种在稳定型心绞痛患者血液中高表达的长链非编码RNAENST00000418539.1，该长链非编码RNAENST00000418539.1的序列如SEQIDNO:1所示。该长链非编码RNAENST00000418539本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在稳定型心绞痛患者血液中高表达的长链非编码RNA ENST00000418539.1，其特征在于长链非编码RNA ENST00000418539.1的序列如SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.一种在稳定型心绞痛患者血液中高表达的长链非编码RNAENST00000418539.1，其特征在于长链非编码RNAENST00000418539.1的序列如SEQIDNO:1所示。2.根据权利要求1所述的在稳定型心绞痛患者血液中高表达的长链非编码RNAENST00000418539.1，其特征在于该长链非编码RNAENST00000418539.1为ENST00000418539.1:1的全长或片段。3.一种体外检测血液中根据权利要求1或2所述的长链非编码RNAENST00000418539.1的制剂或诊断剂或药物或试剂盒，其特征在于该制剂或诊断剂或药物或试剂盒包括特异性引物对、标准DNA模板、PCR反应液，其中，特异性引物对包括上游引物和下游引物，上游引物的核苷酸序列为SEQIDNo:2，下游引物的核苷酸序列为SEQIDNo:3。4.根据权利要求3所述的长链非编码RNAENST00000418539.1的制剂或诊断剂或药物或试剂盒，其特征在于该试剂盒为荧光定量PCR检测试剂盒。5.根据权利要求3或4所述的长链非编码RNAENST00000418539.1的制剂或诊断...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨毅宁，翟慧，李晓梅，马依彤，刘芬，陈邦党，罗俊一，赵强，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：新疆,65