本发明专利技术涉及医药技术领域，具体为一种从二色桌片参中分离的抗癌化合物Ｉｎｔｅｒｃｅｄｅｎｓｉｄｅ Ａ，分子式Ｃ↓［５５］Ｏ↓［２２］Ｈ↓［８３］ＳＯ↓［３］Ｎａ。经多种现代光谱分析，特别是应用多种先进的二维核磁共振谱的综合解析，确定了该化合物的化学结构及立体构型。体外抗肿瘤试验表明，该化合物对Ｐ－３８８小鼠淋巴瘤和ＨＬ－６０人白血病肿瘤细胞株有明显的抑制作用。动物体内试验，对小鼠Ｓ１８０肉瘤和Ｌｅｗｉｓ肺癌均有显著的抑制作用。本发明专利技术可为研制新的抗癌药物提供先导化合物，对开发利用中国的海洋药用生物资源具有重要价值。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药
，是指一种从海洋动物二色桌片参中分离到的新的抗肿瘤化合物Intercedenside A。由于该化合物首次从二色桌片参中提取分离到，具有新的化学结构，故命名为Intercedenside A。Intercedenside A白色无定形粉末，熔点184～6℃，分子式C55O22H83SO3Na；电喷雾离子质谱(ESI-MS)1222(M++Na+H)，1119(1222-SO3Na)，943(1222-SO3Na-3-甲氧基葡萄糖)，789(943-xyl-Na)，643(789-Qui)，511(643-xyl)。红外光谱3438(OH)，2932(CH3，CH2)，1743(C＝O)，1649(共轭双键)，1465和1378(CH3，CH2)，1244(酯键)，1070(甙键)。1H和13C核磁共振数据见表1。表1 Intercedenside A的1H和13C核磁共振数据甙元部分 糖部分CarbonδcδH(J in Hz) Carbon δc δH (J in Hz)1 36.2 1.43(2H，br) Xyl11105.1 4.71(H，d，7.2)2 27.1 1.90(1H，d，10.8)，2.08(1H，d，6)283.5 3.99(1H，mult)3 89.23.24(1H，d，9.6)375.4 4.27(1H，mult)4 39.6475.8 5.1(1H，mult)5 47.8 1.0(1H，mult) 564.2 3.71(1H，mult)，4.71(1H，d，10.2)6 23.3 2.0(2H，mult)Qui 1105.4 5.04(1H，d，6.6)7 120.65.64(1H，6s) 276.2 3.95(1H，mult)8 145.9 375.1 4.22(1H，mult)9 47.4 3.44(1H，d，13.8)486.0 3.57(1H，dd，8.4，7.8)10 35.6571.8 4.10(1H，mult)11 22.6 1.47(1H，mult)，1.76(1H，mult) 617.9 1.69(3H，s)12 30.8 2.02(1H，mult)，2.15(1H，mult) Xyl21105.1 4.82(1H，d，7.8)13 58.5273.8 4.00(1H，mult)14 48.2387.0 4.19(1H，mult)15 43.8 1.75(1H，mult)，2.46(1H，dd，7.8，13.6) 468.9 4.13(1H，mult)16 72.8 5.99(1H，dd，7.2，13.6) 566.5 3.68(1H，mult)，4.28(1H，mult)17 57.6 3.11(1H，d，7.8)3-OMeGlu 1105.5 5.35(1H，d，7.2)18 179.3 274.9 3.99(1H，mult)19 24.0 1.213(3H，s) 387.9 3.66(1H，mult)20 84.0470.5 4.08(1H，mult)21 29.2 1.70(3H，s)578.0 3.97(1H，mult)22 132.25.78(1H，d，12)661.9 4.24，4.45(1H，d，10.2)23 120.56.11(1H，t，12)OCH360.8 3.84(3H，s)24 121.36.47(1H，d，11.4)25 137.026 26.2 1.72(3H，s)27 17.7 1.68(3H，s)30 17.7 1.10(3H，s)31 28.7 1.26(3H，s)32 32.7 1.09(3H，s)CH3COO 169.8CH3COO 21.4 1.96(3H，s)Xyl木糖，Qui喹纳糖，Glc葡萄糖，J值Hz 通过测定该化合物的二维氢氢相关谱(DQCOSY)，碳氢相关谱(HMQC)，接力谱(TOCSY)，碳氢远程相关谱(HMBC)以及NOE相关谱(NOESY)，确 本专利技术还提供了从二色桌片参提取分离Intercedenside A的方法，其步骤如下(1)提取将二色桌片参新鲜样品洗净、切碎，用5倍量95％乙醇浸泡提取7天，滤出提取液，再用85％乙醇浸泡提取2次，每次7天。合并3次提取液，减压回收乙醇，得流浸膏。将流浸膏溶于水中，通过大孔树脂柱，依次用水、50％乙醇和95％乙醇洗脱。50％乙醇洗脱液减压回收乙醇，得总皂甙提取物。(2)分离上述总皂甙提取物应用胶硅柱层析，以不同比例的二氯甲烷∶甲醇∶水混合溶剂洗脱，薄层层析检测，收集含Intercedenside A的流份，再经ODSC18反相柱层析，以甲醇∶水梯度洗脱，薄层层析检测，得Intercedenside A纯品。本专利技术对Intercedenside A进行了体外和体内的抗肿瘤试验，表明其具有明显的抑制肿瘤的效果。(1)小鼠急性毒性试验小鼠灌胃途径单次给药，半数致死量(LD50)为626.45mg/kg，其95％可信任区间为567.67～691.31mg/kg。(2)体外抗肿瘤试验材料和方法DMEM购自Gibco公司(Life Technologies，Grand Island，NY，USA)；磺酰罗单明B(sulforodamine B，SRB)，四氮唑盐(MTT)购自Sigma公司；三氯醋酸(TCA)和Tris base unbuffer均为国产分析纯。细胞株为P-388小鼠淋巴瘤和HL-60人白血病，用SRB法进行测定。SRB法根据细胞生长速率，将处于对数生长期的肿瘤细胞以90μl/孔接种于96孔培养板，贴壁生长24小时再加药10μl/孔。每个浓度设三复孔。并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞调零孔。肿瘤细胞在37℃、5％CO2条件下培养72小时，然后倾去培养液，用10％冷TCA固定细胞，4℃放置1小时后用蒸馏水洗涤5次，空气干燥。最后加入150μl/孔的Tris溶液，酶标仪520nm波长下测定OD值结果Intercedenside A对为P-388细胞株的IC50值为0.7±0.2μM，对HL-60的IC50值为0.1±0.1μM。(3)体内抗肿瘤试验材料和方法阳性对照品为注射用环磷酰胺(CTX)(上海华联制药集团出品)，小鼠S180肉瘤和小鼠Lewis肺癌均为上海医药工业研究院药理室传代维持。实验用昆明种小鼠由上海医药工业研究院实验动物组提供(合格证号沪动合证字第107号)，体重18～20克，雌雄皆可。试验组及阳性对照组，阴性对照组每组动物10只。剂量设置参照半数致死量(LD50)的1/5、1/10、1/20分别作为治疗试验剂量。灌胃给药120mg/Kg、60mg/Kg、30mg/Kg，每天1次，连续给药10天。阴性对照组给予与试验组等体积的生理盐水。阳性对照组给予环磷酰胺30mg/Kg，腹腔给药，每天1次，连续7天。于无菌条件下取生长旺盛的瘤源，制备成1～2×107/ml的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从二色桌片参中分离的抑制肿瘤的化合物Ｉｎｔｅｒｃｅｄｅｎｓｉｄｅ Ａ，其特征在于具有如下化学结构：＊＊＊。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：易杨华，邹峥嵘，吴厚铭，李玲，吴久鸿，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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