本发明专利技术构建了一种利用聚腺嘌呤‑亚甲基蓝检测Cu
Method for the detection of copper ion poly electrochemical sensor based on methylene blue
The present invention is constructed using a poly methylene blue detection Cu
【技术实现步骤摘要】
基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝电化学传感器检测铜离子的方法
本专利技术涉及一种基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝的电化学传感器检测铜离子的方法，属于分析化学领域。
技术介绍
Cu（Ⅱ）是人体生命健康所必需的过渡元素，与某些蛋白质在一起，可产生大量对生命至关重要的酶。铜离子也是所有已知的生命形式的微量营养元素，它具有多种功能（Viguier，R.F.H.；Hulme，A.N.，Asensitizedeuropiumcomplexgeneratedbymicromolarconcentrationsofcopper(I):Towardthedetectionofcopper(I)inbiology.J.Am.Chem.Soc.2006，128，11370–11371.），参与骨的形成、细胞呼吸和结缔组织发展等。然而，过量的铜离子会对人体的肝脏和神经系统造成伤害，使细胞的自动调节功能受到损伤，造成严重的神经变性疾病，如门克斯病，威尔逊病和阿尔茨海默氏病等（Bush，A.I.Metalsandneuroscience.Curr.Opin.Chem.Biol.2000，4，184–191；Kaler，S.G.；Holmes，C.S.；Goldstein，NeonataldiagnosisandtreatmentofMenkesDisease.N.Engl.J.Med.2008，358，605–614；Ala，A.；Walker，A.P.；Ashkan，K.，Wilson'sdisease.M.L.Lancet2007，369，397–408）。美国环境保护署（EPA）规定了在饮用水中铜的最大允许浓度为1.3ppm（约20μM）(Liu，J.W.；Lu，Y.J.，ADNAzymecatalyticbeaconsensorforparamagneticCu2+ionsinaqueoussolutionwithhighsensitivityandselectivity.Am.Chem.Soc.2007，129，9838–9839.）。尽管如此，由于农业和工业的广泛使用，铜污染及其对人类潜在的毒性作用依然是一个挑战。目前，YaoWu等（YaoWu；RebeccaY.Lai，Electrochemicalgold(III)sensorwithhighsensitivityandtunabledynamicrange.AnalyticalChemistry.2016，40（8），2227-2233）证明了Au（Ⅲ）能与腺嘌呤A形成A-Au（Ⅲ）-A结构，首次制备了利用DNA进行识别检测Au（Ⅲ）的简便快速的电化学传感器，同时指出腺嘌呤A还可与Cu（Ⅱ）等过渡金属通过氮原子结合在一起。当前检测铜离子的常规技术一般都是基于电感耦合等离子体（ICP）的方法，包括质谱（MS）（PavlaJungova，JarmilaNavratilova，Substrate-assistedlaserdesorptioninductively-coupledplasmamassspectrometryfordeterminationofcopperinmyeloidleukemiacells.J.Anal.At.Spectrom.2010，25，662–668.；S.D.Richardson，Massspectrometryinenvironmentalsciences.Chem.Rev.2001，101–211.），原子吸收光谱（Chan，M.S.；Huang，S.D.，DirectdeterminationofcadmiumandcopperinseawaterusingatransverselyheatedgraphitefurnaceatomicabsorptionspectrometerwithZeeman-effectbackgroundcorrector.Talanta2000，51，373–380.；Lin，T.W.；Huang，S.D.，Directandsimultaneousdeterminationofcopper，chromium，aluminum，andmanganeseinurinewithamultielementgraphitefurnaceatomicabsorptionspectrometer.Anal.Chem.2001，73，4319–4325.；Pourreza，N.；Hoveizavi.，R.，SimultaneouspreconcentrationofCu，FeandPbasmethylthymolbluecomplexesonnaphthaleneadsorbentandflameatomicabsorptiondetermination.Anal.Chim.Acta2005，549，124–128.）和原子发射光谱法等(Becker，J.S.；Matusch，A.；Liu，Y.；Liang，P.；Guo，L.，Nanometertitaniumdioxideimmobilizedonsilicagelassorbentforpreconcentrationofmetalionspriortotheirdeterminationbyinductivelycoupledplasmaatomicemissionspectrometry.Talanta2005，68，25–30.）。此外，也可采用荧光技术检测铜离子（NakornNiamnont；NattapornKimpitak；GamolwanTumcharern；PaitoonRashatasakhon，HighlysensitivesalicylicfluorophoreforvisualdetectionofpicomoleamountsofCu2+.RSCAdv.2013，3(3)，25215-25220.；BalamuruganRathinam；Chih-ChiehChien；Bo-ChengChen；Jui-HsiangLiu，FluorogenicandchromogenicdetectionofCu2+andFe3+speciesinaqueousmediabyrhodamine–triazoleconjugate.Tetrahedron.2013，69(1)，235-241.）。这些技术通常需要繁琐的过程，使得难以快速检测铜离子。因此，利用可靠的技术来对铜离子进行快速检测是非常有必要的。
技术实现思路
本专利技术在于提供一种基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝的电化学传感器检测铜离子的方法，该方法以电化学工作站为平台，能够简便、快速地检测铜离子浓度。本专利技术采取的技术方案如下：一种基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝的电化学传感器检测铜离子的方法，按照以下步骤进行：（1）金电极（GE,d=2mm）处理：依次用0.3μm和0.05μm的Al2O3抛光粉打磨金电极，用MilliQ纯水、无水乙醇和MilliQ纯水依次超声清洗2min后，在0.5MH2SO4溶液中用循环伏安法，扫描范围为0.2-1.6V，以扫速0.1V/s、0.5V/s分别扫描20圈，直至得到稳定的循环伏安曲线；（2）根本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种基于聚腺嘌呤‑亚甲基蓝电化学传感器检测铜离子的方法，其特征在于：（1）金电极处理，电极直径d=2 mm：依次用0.3 μm和0.05 μm的Al
【技术特征摘要】
1.一种基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝电化学传感器检测铜离子的方法，其特征在于：（1）金电极处理，电极直径d=2mm：依次用0.3μm和0.05μm的Al2O3抛光粉打磨金电极，用MilliQ纯水、无水乙醇和MilliQ纯水依次超声清洗2min后，在0.5MH2SO4溶液中用循环伏安法，扫描范围为0.2-1.6V，以扫速0.1V/s、0.5V/s分别扫描20圈，直至得到稳定的循环伏安曲线；（2）用缓冲液配制1.2μM的DNA（A12）溶液；缓冲液含5mMPBS、0.05MNaCl、pH7.4；（3）将5.0μL步骤（2）中的1.2μMDNA（A12）的溶液滴加在上述步骤（1）处理好的金电极上，在4℃下倒置反应2h，自组装成功后，电极用二次蒸馏水冲洗干净，N2吹干；（4）将步骤（3）中的电极浸泡在100.0μL的2.0mM巯基己醇（MCH）溶液中封闭电极表面2h，以除去电极表面上的DNA非特异性吸附；（5）将上述步骤（4）制备的MCH/A12/GE电极用二次蒸馏水浸泡4min，N2吹干后倒置，用于下一步检测；（6）取20.0μLMilliQ纯水为空白组或不同浓度的20.0...
【专利技术属性】
技术研发人员：许雪琴，王梦燕，王敬，洪敏强，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35
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