The present invention provides a purification method of osteogenic growth peptide includes: coarse pure: osteogenic growth peptide crude aqueous sample to reversed-phase polymer column gradient elution with the mobile phase. The eluent was collected and concentrated under reduced pressure to obtain concentrated solution; and salt: the concentrated liquid sample to weak anion exchange column, eluting with acetic acid and acetic acid type collection of osteogenic growth peptide solution, concentration and freeze drying to obtain the decompression of osteogenic growth peptide. The method of the invention has low cost and high purity of osteogenic growth peptide, and is suitable for industrial purification of osteogenic growth peptide.
【技术实现步骤摘要】
一种成骨生长肽的低成本纯化方法
本专利技术属于多肽纯化
,具体地,本专利技术涉及一种成骨生长肽的纯化方法。
技术介绍
成骨生长肽(OsteogenicGrowthPeptide,OGP)是一种能促进骨细胞生长的14-氨基酸多肽,序列为Ala-Leu-Lys-Arg-Glu-Arg-Gly-Thr-Leu-Tyr-Gly-Phe-Gly-Gly,它通过作用于成骨细胞系的ROS、MC3T3、E1和NH3T3成纤维细胞,促进成骨细胞的活性,提高骨量,在骨质疏松症和骨折的预防及治疗方面有广阔的应用前景。OGP在大鼠骨质疏松模型的实验研究结果表明,OGP的作用机理是通过成骨的增加来提高骨量峰值,减缓骨丢失,从而达到治疗骨质疏松的效果。与目前临床上使用的通过抑制破骨细胞活性来达到提高骨量的鲑鱼降钙素相比,其作用机制完全不同,具有显著的优势。OGP作为治疗骨质疏松症的药物时HPLC纯度≥99%,然而通过合成得到的OGP粗品中含有很多杂质,需要进一步提纯后才可以作为药用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服现有成骨生长肽纯化方法存在的缺点,提供一种成本低、纯度高,适合产业化的成骨生长肽纯化方法。更具体来说,本专利技术通过如下技术方案实现的。本专利技术提供了一种一种成骨生长肽的纯化方法,包括:(1)粗纯:将成骨生长肽粗品水溶液上样至反相聚合物柱,用酸性流动相进行梯度洗脱,收集洗脱液并减压浓缩得到浓缩液;(2)转盐:将步骤(1)得到的浓缩液上样至弱阴离子交换柱,用醋酸洗脱,收集醋酸型成骨生长肽溶液,减压浓缩与冷冻干燥得到成骨生长肽。前述的纯化方法,所述成骨生 ...
【技术保护点】
一种成骨生长肽的纯化方法,其特征在于,包括:(1)粗纯:将成骨生长肽粗品水溶液上样至反相聚合物柱,用酸性流动相进行梯度洗脱,收集洗脱液并减压浓缩得到浓缩液;(2)转盐:将步骤(1)得到的浓缩液上样至弱阴离子交换柱,用醋酸洗脱,收集醋酸型成骨生长肽溶液,减压浓缩与冷冻干燥得到成骨生长肽。
【技术特征摘要】
1.一种成骨生长肽的纯化方法,其特征在于,包括:(1)粗纯:将成骨生长肽粗品水溶液上样至反相聚合物柱,用酸性流动相进行梯度洗脱,收集洗脱液并减压浓缩得到浓缩液;(2)转盐:将步骤(1)得到的浓缩液上样至弱阴离子交换柱,用醋酸洗脱,收集醋酸型成骨生长肽溶液,减压浓缩与冷冻干燥得到成骨生长肽。2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述成骨生长肽粗品水溶液通过将成骨生长肽粗品溶解于水,超声分散,用滤膜过滤并收集滤液来制备;优选地,成骨生长肽粗品与水的比率是(0.3g~5g):(5ml~100ml)。3.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述反相聚合物柱是填料为F型SBCMCIGEI反相色谱填料的反相聚合物柱;优选地,所述F型SBCMCIGEI反相色谱填料的粒径是30~50μm。4.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述弱阴离子交换柱是填料为DEAE高流速琼脂糖微球的弱阴离子交换柱;优选地,所述DEAE高流速琼脂糖微球的粒径是50~160μm。5.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述酸性流动相由流动相...
【专利技术属性】
技术研发人员:苏晨灿,王慧,郭添,韩广,张忠旗,王万科,王惠嘉,赵金礼,杨小琳,
申请(专利权)人:陕西慧康生物科技有限责任公司,
类型:发明
国别省市:陕西,61
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