细胞标记探针及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种细胞标记探针及其制备方法，该细胞标记探针包括纳米粒子或量子点以及包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的抗坏血酸棕榈酸酯。通过上述方式，本发明专利技术能够具备较好的成像性能以及良好的生物相容性，且其构建也比较简单方便。

Cell marker probe and preparation method thereof

The invention discloses a cell labeling probe and preparation method thereof, the cells labeled probe including nanoparticles or quantum dots and modified the ascorbyl palmitate package or nanoparticles or quantum dots. By the method mentioned above, the invention has good imaging performance and good biocompatibility, and the construction of the invention is relatively simple and convenient.

【技术实现步骤摘要】
细胞标记探针及其制备方法
本专利技术涉及探针
，特别是涉及一种细胞标记探针及其制备方法。
技术介绍
细胞治疗是通过将自体或异体功能细胞在体外进行培养，而后回输到病人体内，借助细胞自身治疗和免疫功能达到疾病治疗目的，作为一种有效的临床疾病治疗方案备受关注。然而，回输到体内的细胞，其聚集部位难以判别，对注射部位的准确性难以做出诊断，从而影响其治疗功能发挥。因此在临床实施中，急需非侵入性成像技术对回输细胞监测。磁共振成像技术，光学成像技术，以及光声成像技术，在活体标记与示踪治疗细胞方面具有较大应用潜能，当结合高灵敏度造影剂探针能够极大地增强成像灵敏度，获得细胞准确的生物学信息。利用纳米探针对细胞进行标记，则可以很好地获得细胞成像并进行示踪分析。现有细胞标记用探针材料制备技术一般是通过阳离子脂质体或阳离子聚合物包裹或修饰纳米粒子形成复合粒子，通过阳离子与细胞膜表面的磷脂双分子层相互作用，促使细胞内吞，完成标记。但是这种强静电相互作用往往致使细胞膜破损，造成细胞损伤。因此以阳离子脂质体以及阳离子聚合物，构建纳米探针表现出较大的生物毒性。阴离子型纳米探针则具备较高生物安全性，但构建复杂，往往难以形成较好的细胞标记效果。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题是提供一种细胞标记探针及其制备方法，能够具备较好的成像性能以及良好的生物相容性，且其构建也比较简单方便。为解决上述技术问题，本专利技术采用的一个技术方案是：提供一种细胞标记探针，所述探针包括纳米粒子或量子点以及包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的抗坏血酸棕榈酸酯。其中，所述探针还包括荧光染料。其中，所述纳米粒子为氧化铁纳米粒子。其中，所述纳米粒子为四氧化三铁纳米粒子，所述荧光染料为IR780染料。为解决上述技术问题，本专利技术采用的另一个技术方案是：提供一种细胞标记探针的制备方法，所述方法包括：提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯，并使之混合均匀；向混合均匀后的混合物中加入挥发性有机溶剂和水，并使之震荡均匀；将震荡均匀后的混合物中的所述挥发性有机溶剂挥发完全，进而获得所述抗坏血酸棕榈酸酯包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的所述细胞标记探针。其中，所述提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯，并使之混合均匀的步骤，包括：提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯以及荧光染料，并使之混合均匀。其中，所述纳米粒子为四氧化三铁纳米粒子，所述挥发性有机溶剂为四氢呋喃。其中，所述四氧化三铁纳米粒子为0.001-0.5重量份，所述抗坏血酸棕榈酸酯为0.001-10重量份，所述四氢呋喃为1-10重量份，所述水为5-100重量份。其中，所述提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯，并使之混合均匀的步骤，包括：提供四氧化三铁纳米粒子、抗坏血酸棕榈酸酯以及IR780染料，并使之混合均匀，其中，所述IR780染料为0.001-1重量份。其中，所述提供四氧化三铁纳米粒子的步骤，包括：提供浓度为2-10毫克每毫升、分散在三氯甲烷、正己烷或二氯甲烷中的四氧化三铁纳米胶体溶液；将所述四氧化三铁纳米胶体溶液中的三氯甲烷、正己烷或二氯甲烷挥发完全，进而获得所述四氧化三铁纳米粒子。其中，所述向混合均匀后的混合物中加入挥发性有机溶剂和水，并使之震荡均匀的步骤，包括：向混合均匀后的混合物中加入1-10重量份的四氢呋喃，在25-30摄氏度下，进行超声处理，并将超声处理后的混合物加入到5-100重量份水中，震荡均匀；所述四氢呋喃是通过减压旋转蒸发方法挥发完全的。本专利技术的有益效果是：区别于现有技术的情况，本专利技术细胞标记探针包括纳米粒子或量子点以及包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的抗坏血酸棕榈酸酯，由于该细胞标记探针是一类阴离子型探针，因此具有良好的生物相容性，且具备较好的成像性能。该探针的制备方法包括提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯，并使之混合均匀；向混合均匀后的混合物中加入挥发性有机溶剂和水，并使之震荡均匀；将震荡均匀后的混合物中的所述挥发性有机溶剂挥发完全，进而获得该探针，相比较现有的阴离子型纳米探针的制备工艺，该探针的制备工艺简单方便，操作步骤少，材料价格也不昂贵。附图说明图1是样品1、样品2以及水的磁共振成像检测结果示意图；图2是样品2和水的光声成像检测结果示意图；图3是样品1的细胞磁共振成像检测结果示意图；图4是样品1的细胞毒性检测结果示意图；图5是本专利技术细胞标记探针的制备方法一实施方式的流程图；图6是样品1的动态光散射检测图片示意图；图7是样品3的动态光散射检测图片示意图。具体实施方式下面结合附图和实施方式对本专利技术进行详细说明。本专利技术提供一种细胞标记探针，该探针包括纳米粒子或量子点以及包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的抗坏血酸棕榈酸酯。纳米粒子是指粒度在1-100nm之间的粒子(纳米粒子又称超细微粒)，属于胶体粒子大小的范畴。它们处于原子簇和宏观物体之间的过度区，处于微观体系和宏观体系之间，是由数目不多的原子或分子组成的集团，因此它们既非典型的微观系统亦非典型的宏观系统。纳米材料在医学和生物工程也有许多应用。已成功开发以纳米磁性材料为药物载体的靶向药物，称为“生物导弹”。即在磁性Fe3O4纳米微粒包敷的蛋白质表面携带药物，注射进入人体血管，通过磁场导航输送到病变部位释放药物，可减少肝、脾、肾等所受由于药物产生的副作用。利用纳米传感器可获取各种生化反应的信息和电化学信息。还可以利用纳米粒子研制成纳米机器人，注入人身的血液，对人体进行全身健康检查，疏通脑血管中血栓，清除心脏动脉脂肪沉积物，甚至还能吞噬病毒，杀死癌细胞等，可以预言，随着制备纳米材料技术的发展和功能开发，会有越来越多的新型纳米材料在众多的高科技领域中得到广泛的应用。量子点(quantumdot)是准零维的纳米材料，由少量的原子所构成。粗略地说，量子点三个维度的尺寸都在100nm以下，外观恰似一极小的点状物。量子点一般为球形或类球形，是由半导体材料(通常由IIB～ⅥA或IIIA～VA元素组成)制成的、稳定直径在2-20nm的纳米粒子，在光学生物标记等领域具有广泛的应用情景。抗坏血酸棕榈酸酯为棕榈酸与L-抗坏血酸等天然成分酯化而成，其分子式为C22H38O7，是一种高效的氧清除剂和增效剂，被世界卫生组织(WHO)食品添加剂委员会评定为具有营养性、无毒、高效、使用安全的食品添加剂，是我国唯一可用于婴幼儿食品的抗氧化剂，本品用于食品可起到抗氧化、食品(油脂)护色、营养强化等功效。因此，采用抗坏血酸棕榈酸酯包裹或修饰纳米粒子或量子点，构建而成的探针具有良好的生物相容性，该探针标记细胞之后可以用于细胞治疗，不会对细胞造成损伤。其中，该探针还包括荧光染料。荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。标记上荧光染料，还可以进一步进行荧光检测。其中，该纳米粒子为氧化铁纳米粒子。氧化铁纳米粒子是一种多功能材料。当氧化铁颗粒尺寸小到纳米级(1～100nm)时，其表面原子数、比表面积和表面能等均随着粒径的减小而急剧增加，从而表现出小尺寸效应、量子尺寸效应、表面效应和宏观量子隧道效应等特点，具有良好的光学性质、磁性、催化性能等。进一步，该纳米粒子为四氧化三铁纳米粒子，该荧光染料为IR780染料。当然，该纳米粒子还可以是四氧化三铁纳米粒子之外的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞标记探针，其特征在于，所述探针包括纳米粒子或量子点以及包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的抗坏血酸棕榈酸酯。

【技术特征摘要】
1.一种细胞标记探针，其特征在于，所述探针包括纳米粒子或量子点以及包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的抗坏血酸棕榈酸酯。2.根据权利要求1所述的探针，其特征在于，所述探针还包括荧光染料。3.根据权利要求2所述的探针，其特征在于，所述纳米粒子为氧化铁纳米粒子。4.根据权利要求3所述的探针，其特征在于，所述纳米粒子为四氧化三铁纳米粒子，所述荧光染料为IR780染料。5.一种细胞标记探针的制备方法，其特征在于，所述方法包括：提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯，并使之混合均匀；向混合均匀后的混合物中加入挥发性有机溶剂和水，并使之震荡均匀；将震荡均匀后的混合物中的所述挥发性有机溶剂挥发完全，进而获得所述抗坏血酸棕榈酸酯包裹或修饰所述纳米粒子或量子点的所述细胞标记探针。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯，并使之混合均匀的步骤，包括：提供纳米粒子或量子点、抗坏血酸棕榈酸酯以及荧光染料，并使之混合均匀。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述纳米粒子为四氧化三铁纳米粒子，所述挥发性有机溶剂为四氢呋喃。8.根据权利要求7所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：王志勇，谭燕，赵瑞兰，赵静，刘雨晴，刘鸿，陈冕，盛宗海，郑海荣，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44