The present invention discloses the application of fluorescent carbon dots in the nucleolus imaging or RNA labeling or display of living cells. The fluorescent carbon point adopts a red light emitting fluorescent carbon point with up and down conversion function, in particular to a fluorescent carbon point disclosed in the CN104263366A. In some embodiments, the nucleolus imaging of living cells can be accomplished by the use of fluorescent carbon dots by culturing cells, formulating dye solutions, staining and imaging. The invention can realize the imaging of living cells or markers of nucleoli in living cells or RNA display, and the selectivity of nucleolus high, high resolution imaging, and has the advantages of simple and rapid and low cost, the characteristics of low toxicity, has very high practical value.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种荧光碳点,特别涉及一种具有上下转化功能的红光发射荧光碳点在细胞核仁成像或者标记或显示活细胞内RNA中的应用,属于生物
技术介绍
核仁是细胞核中的一个重要的结构。核仁是细胞核内的生产核糖体的机器,所有真核生物的核糖体RNA(rRNA)的转录都是在核仁中完成的,其过程是由rDNA转录成rRNA,rRNA再与来自细胞质的蛋白质结合,进而加工、改造成核糖体的前体,然后输出到细胞质。在细胞周期过程中,核仁是一个高度动态的结构,在有丝分裂期间表现出周期性的消失与重建。真核细胞的核仁具有重要功能,它是rRNA合成、加工和核糖体亚单位的装配场所。因此对核仁结构、动态和功能的研究一直受到各相关领域研究者的高度重视。活细胞核仁成像技术的发展有助于我们实时地研究细胞的生命活动,获取更具价值的细胞信息。用于核仁成像的荧光物质必须满足一定的条件。首先,由于核仁位于细胞核内,荧光物质必须穿过核孔。因此,荧光物质必须具有小的粒径。另外,荧光物质对核仁的染色要有选择性,可以与核仁产生特异性相互作用(富集或者荧光增强效应),从而实现对核仁选择性成像。目前,人们也发现了一些可以用于细胞核仁成像的荧光物质,但大部分为有机荧光染料。这些荧光染料存在斯托克斯位移小、荧光稳定性差等缺点,而且很多染料只能用于死细胞的核仁成像。也有人用三唑类配体修饰的CdS量子点实现了对细胞核仁的成像,但是其潜在的生物毒性限制了它的应用。因此,需要寻找新的荧光物质来对活细胞的核仁成像。荧光碳量子点(简称碳点)是具有荧光性能的新型碳纳米材料。由于其稳定性强、毒性小、水溶性好、成本低和原材料丰 ...
【技术保护点】
一种荧光碳点在活细胞核仁成像中的应用,所述荧光碳点采用具有上下转化功能的红光发射荧光碳点。
【技术特征摘要】
1.一种荧光碳点在活细胞核仁成像中的应用,所述荧光碳点采用具有上下转化功能的红光发射荧光碳点。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,应用方法包括:将细胞接种于细胞培养液中进行培养,之后加入所述荧光碳点,并使所述荧光碳点于形成的原细胞-碳点混合液中均匀分散,再在适合孵育细胞的环境中孵育而将细胞核仁染色,然后分离出细胞,经清洗后,再置入能使细胞保持活性的环境中进行成像,成像所用激发光波长为500~600nm。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,应用方法包括:1)细胞培养:将细胞接种于细胞培养液中,在37℃、5v/v%CO2、饱和湿度的环境中培养12~48h;2)提供浓度为100-1000μg/ml的荧光碳点分散液;3)细胞染色:向步骤1)最终所获原细胞培养液中加入所述荧光碳点分散液,均匀混合形成原细胞-碳点混合液,在37℃、5v/v%CO2、饱和湿度的环境中孵育30min以上,从而将细胞核仁染色;4)细胞成像:自步骤3)最终所获混合液中分离出细胞,用磷酸盐缓冲溶液充分洗涤后,加入新鲜的细胞培养液,并在37℃、5v/v%CO2、饱和湿度的环境中进行拍摄成像,成像所用激发光波长为500~600nm。4.根据权利要求2-3中任一项所述的应用,其特征在于:所述细胞培养液包含相应的培养基、10v/v%胎牛血清、1wt%青霉素和1wt%链霉素;和/或,所述荧光碳点分散液中采用的溶剂为二甲亚砜水溶液,其中二甲亚砜浓度为0.2~20v/v%;和/或,所述荧光碳点于所述原细胞-碳点混合液中的终浓度为10~100μg/ml。5.根据权利要求1-3中任一项所述的应用,其特征在于:在波长为360~600nm或750~1100nm的激发光照射...
【专利技术属性】
技术研发人员:林恒伟,张凌,孙山,
申请(专利权)人:中国科学院宁波材料技术与工程研究所,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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