一种用于测定凝血功能的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及医学诊断技术领域，具体而言，涉及一种用于测定凝血功能的试剂盒，所述试剂盒包含酒石酸钠。当采用凝固法测定血浆的凝血功能时，血浆中C反应蛋白的存在，会影响检测结果值，从而导致检测结果出现误差。加入酒石酸钠后，可屏蔽血浆中C反应蛋白对检测结果的影响，提升光学法检测凝血功能的准确度，从而更好地反映临床病人的凝血功能。

Reagent kit for measuring blood coagulation function

The invention relates to the technical field of medical diagnosis, in particular to a kit for determining the coagulation function. When coagulation method was used to measure the plasma coagulation function, the presence of C reactive protein in the plasma would affect the results of the test, which led to the error of the test results. The effect of C reactive protein in plasma on the detection results can be improved by the addition of sodium tartrate, and the accuracy of blood coagulation detection can be improved by optical method.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学诊断
，具体而言，涉及一种一种用于测定凝血功能的试剂盒。
技术介绍
C反应蛋白(C-ReactiveProtein，CRP)影响凝血过程，可与血浆中的钙离子(凝血因子IV)反应，影响光学法凝血功能检测，它能促进凝血机制，加速纤维蛋白单体聚合，缩短凝血时间。研究发现，CRP含量越高，纤维蛋白凝块强度就越大。在凝血功能检查中，凝固法是检测PT、APTT、FIB、TT、内源凝血因子(FVIII、XI、XII)以及外源凝血因子(FII、V、VII、X)的最多用方法，它是基本测试原理是光学法的散射光检测(用660nm光电二极管检测散射光量的变化)，还并用了百分比式的测定原理。当试剂加入标本后，凝血开始启动，随之光学出现变化，仪器把这种光学的变化描绘成凝固曲线：把开始出现凝集的起始点作为0％、把完全凝固的终点作为100％、把50％变化点处作为凝固时间(报告点)，当测定含有干扰物(黄疸、溶血、高脂血症等)或低纤维蛋白原血症的特殊样本时，其作为起始点的0％的基线会随之上移或下移，相当于扣除本底干扰。以APTT为例，血浆样本经过一定时间的温育后，加入反应试剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量透射光或散射光量的改变来测定凝血过程，即纤维蛋白原转化为不溶性的纤维蛋白过程中的浊度变化，从透射光或散射光量的测定可得凝固曲线，再通过百分比原理求得凝血时间。凝血值(即可溶性纤维蛋白原转化为不溶性纤维蛋白所需时间)是通过光量的变化来体现的，在此过程中，凝血时间与凝血因子有关，与CRP无关，但是，当血浆中含有CRP时，由于CRP参与凝血过程，它会与钙离子形成复合物并沉淀，引起光量的变化。在采用光学法测定凝血功能时，检测设备会将该变化归固于由凝血因子造成，从而导致凝血结果不准确。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于测定凝血功能的试剂盒，该试剂盒基于酒石酸盐对C反应蛋白屏蔽剂的作用原理，可有效排除掉C反应蛋白在测定凝血功能时对凝血值的干扰，使测定结果更加准确。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种用于测定凝血功能的试剂盒，所述试剂盒包含酒石酸钠。优选的，所述试剂盒为用于测定凝血酶时间、凝血酶原时间或活化部分凝血活酶时间的体外诊断试剂盒。C反应蛋白(C-ReactiveProtein，CRP)是一种急性时相蛋白，单条多肽链上含187个氨基酸，氨基端残基为吡咯烷酮羧酸，羧基端为脯氨酸。CRP会结合在死亡细胞或微生物外膜上的磷酸胆碱(phosphocholine)，以活化补体系统。当体内有急性炎症、细菌感染、组织的损伤时，CRP在数小时内出现，而疾病治愈后又很快就消失。CRP是急性时相反应蛋白，正常情况下含量极小，但在急性创伤和感染时，CRP的浓度急剧升高。由于现有的凝血功能检测多基于光学法检测，而CRP可与血浆中的钙离子(凝血因子IV)反应，影响光学法凝血功能检测，因此屏蔽CRP对提升凝血功能检测的准确性有很大帮助。现有的凝血功能检测反应体系可选自用于测定凝血酶时间(thrombintime，TT)、凝血酶原时间(prothrombintime，PT)或活化部分凝血活酶时间(activatedpartialthromboplastintime，APTT)的反应体系，这些反应体系属于现有技术，对本领域技术人员是熟悉的。更优选的，选自光学法检测凝血功能的检测反应体系。本专利技术基于酒石酸盐作为C反应蛋白屏蔽剂的应用。酒石酸钠为最优选的。此外还可以选择酒石酸盐，优选为酒石酸金属离子盐，更优选的为酒石酸的碱金属盐或酒石酸镁；所述碱金属盐可选自酒石酸钾、酒石酸钠、酒石酸钾钠复合盐等。血浆中的C反应蛋白，会与血浆中存在的凝血因子或部分凝血凝血因子反应，加入酒石酸盐，可以避免某些凝血因子与C反应蛋白之间的反应。优选的，如上所述的试剂盒，所述试剂盒中还包含钙盐。优选的，如上所述的试剂盒，所述钙盐为氯化钙；还可以选自硫酸钙等可电离出二价钙离子的钙盐。优选的，如上所述的试剂盒，所述试剂盒为活化部分凝血活酶时间的体外诊断试剂盒；所述试剂盒中还包括磷脂和活化剂；优选的，所述磷脂及活化剂组成第一试剂，所述钙盐及酒石酸钠组成第二试剂。优选的，如上所述的试剂盒，所述活化剂选自白陶土、鞣花酸、硅藻土中的任一种，更优选为鞣花酸。优选的，如上所述的试剂盒，所述磷脂为合成磷脂；优选的，所述合成磷脂包括质量比为(25～35)：70的磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱，可选地，还包括磷脂酰乙醇胺或磷脂酰甘油中的一种。优选的，如上所述的试剂盒，在所述第一试剂中，所述磷脂的浓度为50～600μg/mL，优选为100～200μg/mL；磷脂的浓度还可以选自120～180μg/mL；140～160μg/mL；所述活化剂的浓度按磷脂与活化剂的浓度比1000：1～50：1加入，优选为100：1～50：1。优选的，如上所述的试剂盒，所述第一试剂中还包括缓冲液、稳定剂以及调节剂中的一种或多种；优选的，所述缓冲液选自三羟甲基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸和3-(N-吗啉)丙磺酸中的一种或多种；更优选的，所述缓冲液的浓度为20～100mM；pH为6～8。优选的，为了避免APTT测定试剂中的磷脂氧化，同时也为了制备稳定性较好的APTT测定试剂，包括避免试剂中微生物和细菌的繁衍，试剂盒中还需要添加稳定剂，所述稳定剂选自氯化钠、苯酚以及甘氨酸中的一种或多种；所述氯化钠的浓度为20～150mM；所述苯酚的浓度为0.5～3mg/L；所述甘氨酸的浓度为质量体积百分比1～3％；优选的，所述调节剂为二价金属离子的盐类和/或胍化合物；更优选的，所述二价金属离子的盐类选自硫酸铜、硫酸镍、硫酸镁和氯化镁中的一种或多种；最优选的为氯化镁；所述氯化镁的浓度为0.1～2mM；更优选的，所述胍化合物选自氨基胍盐酸盐，浓度为50～200mM，更优选为80～150mM。优选的，如上所述的试剂盒，在所述第二试剂中，所述钙盐的浓度为10mM～50mM，更优选为20～30mM；所述酒石酸钠的浓度为15～150mM，更优选为30mM～70mM。优选的，如上所述的试剂盒，在所述第二试剂中还包括丁基羟基茴香醚、苯酚和缓冲液中的一种或多种；优选的，所述丁基羟基茴香醚的浓度为质量体积百分比0.01～0.1％；优选的，所述苯酚的浓度为0.5～3mg/L；优选的，所述缓冲液选自三羟甲基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸和3-(N-吗啉)丙磺酸中的一种或多种；更优选的，所述缓冲液的浓度为20～100mM；pH为6～8。此外，本专利技术还提供了一种凝血诊断试剂，包括酒石酸钠；所述诊断试剂作为添加剂添加于光学法检测凝血功能的检测反应体系中。优选的，如上所述的凝血诊断试剂，所述酒石酸钠在所述光学法检测凝血功能的检测反应体系中的终浓度为3mM～50mM。优选的，如上所述的凝血诊断试剂，所述酒石酸钠在所述光学法检测凝血功能的检测反应体系中的终浓度为10mM～25mM。优选的，如上所述的凝血诊断试剂，所述诊断试剂中还包括钙离子。更优选的，所述钙离子以氯化钙的形式加入。优选的，如上所述的凝血诊断试剂，所述钙离子在所述光学法检测凝血功能的检测反应体系中的终浓度为3mM～20mM。优选的，如上本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于测定凝血功能的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含酒石酸钠。

【技术特征摘要】
1.一种用于测定凝血功能的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含酒石酸钠。2.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包含钙盐。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述钙盐为氯化钙。4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为活化部分凝血活酶时间的体外诊断试剂盒；所述试剂盒中还包括磷脂和活化剂；优选的，所述磷脂及活化剂组成第一试剂，所述钙盐及酒石酸钠组成第二试剂。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述活化剂选自白陶土、鞣花酸、硅藻土中的任一种，优选为鞣花酸。6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述磷脂为合成磷脂；优选的，所述合成磷脂包括质量比为(25～35)：70的磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱，可选地，还包括磷脂酰乙醇胺或磷脂酰甘油中的一种。7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，在所述第一试剂中，所述磷脂的浓度为50～600μg/mL，优选为100～200μg/mL；所述活化剂的浓度按磷脂与活化剂的浓度比1000：1～50：1加入，优选为100：1～50：1。8.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述第一试剂中还包括缓冲液、稳定剂以及调节剂中的一种或多种；优选的，所述缓冲液选自三羟甲基氨基甲烷、...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡小伟，
申请(专利权)人：青岛古高生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37