三萜类化合物在制备治疗帕金森药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种三萜类化合物的应用和治疗帕金森药物。本发明专利技术用于阻断自噬骨架蛋白Beclin1与自噬抑制因子Bcl‑2之间的相互结合，以诱发神经细胞自噬；以及用于制备治疗帕金森药物；所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。本发明专利技术治疗帕金森药物包括药物可接受的辅料，还包括有效剂量的山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。本发明专利技术三萜类化合物即山楂酸和委陵菜酸能直接阻断自噬骨架蛋白Beclin1与自噬抑制因子Bcl‑2之间的相互结合，从而在神经细胞中具有促进自噬的作用。并对帕金森病细胞的神经保护作用。因此，将山楂酸和委陵菜酸能够直接用于制备治疗帕金森药物，以赋予该治疗帕金森药物良好的药效。

Application of three terpenoids and treatment of Parkinson drugs

The present invention provides one kind of three terpene compound and its application in treating Parkinson medicine. The invention is used for blocking the autophagy skeleton protein Beclin1 and autophagy inhibition factor interaction between Bcl-2, to induce nerve cell autophagy; as well as for the preparation of drugs for treatment of Parkinson; the mixture of three terpenoids as hawthorn acid, Potentilla acid in either or both. Parkinson drugs including drug acceptable adjuvant treatment of the invention, the mixture also includes effective dose of hawthorn acid, Potentilla acid in either or both. The invention of three terpenoids that Maslinic Acid and Potentilla acid can directly blocking autophagy cytoskeletal protein Beclin1 and autophagy inhibition factor interaction between Bcl-2, which can promote the role of autophagy in nerve cells. Neuroprotective effects of Parkinson's disease cells. Therefore, hawthorn acid and tormentic acid can be directly used for the preparation of the drug treatment of Parkinson, to give the effect of drug treatment of Parkinson good.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于诱发自噬化合物
，具体的涉及一种能够诱发神经细胞自噬的三萜类化合物的应用和含有该三萜类化合物的治疗帕金森药物及其制备方法。
技术介绍
帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)又称震颤麻痹(shakingpalsy，paralysisagitans)，是一种常见于中老年的神经变性疾病。全球累计600万人群罹患帕金森病，随着全球老龄化程度加剧，帕金森病患病人数在逐年增加。帕金森病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元的变性死亡导致纹状体DA含量显著性减少以及神经元内大量路易小体聚集而致病。帕金森病病因目前仍不清楚，是遗传因素、环境因素、年龄老化、氧化应激等多种因素共同作用的结果。帕金森病药物治疗主要在于提高脑内多巴胺的含量以及降低乙酰胆碱的活力，多数患者的症状可因而得到缓解，但不能阻止病变的自然进展。因此，亟需研发能够提高疗效与安全性，以及效果持久的新药用于帕金森病的治疗。细胞自噬(Autophagy)是近年来提出的与帕金森病发病密切相关的分子机制，自噬诱导剂被作为神经保护类药物广泛应用于抗帕金森病药物研发。自噬是真核细胞中进化上高度保守的、用于降解和回收利用细胞内生物大分子和受损细胞器的过程。自噬的完成依赖于正常的溶酶体功能，溶酶体通过与自噬体(双膜囊泡结构，包裹自噬的目标降解产物)融合，清除降解细胞内受损伤的细胞结构、衰老的细胞器，以及不再需要的生物大分子。正常的自噬过程对细胞内环境的稳定及细胞生命活动的顺利进行十分重要。帕金森病产生的基础是大量突变和错误折叠的蛋白质在神经元细胞内聚集，帕金森病的特征性标志物是细胞内的路易小体，路易小体的主要组成部分是纤维状的α-突触核蛋白(α-synuclein)。细胞内α-synuclein主要通过泛素-蛋白酶体系和自噬溶酶体通路清除。α-synuclein的过表达会抑制自噬，间接促进了异常蛋白的累积、线粒体功能障碍、活性氧水平的增加以及帕金森病的发展。自噬可以清除错误折叠的蛋白质，减少蛋白质在神经元内聚集，能够有效预防帕金森病等神经退行性病变的发生。自噬过程由一系列自噬相关蛋白(Atg蛋白)介导完成，这些蛋白在自噬体形成的不同阶段发挥作用。自噬分子机制的核心成分是Beclin1-VPS34复合体，这是一个多蛋白的组合。蛋白Beclin1是复合体中的骨架蛋白，许多自噬调控因子通过动态地结合于Beclin1上，发挥各自对自噬过程的调节作用。VPS34是哺乳动物III型磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),它特异性地磷酸酯化肌糖环三位的磷脂酸肌醇并将其转过为磷脂酸肌醇3磷酸酯(PI3Ps)。VPS34胞质激酶活性的激活是自噬启动机制中的关键步骤，因为自噬过程的标志成员-用来包裹胞浆内容物的双膜自噬体-的形成需要大量由VPS34产生的PI3Ps。Beclin1与VPS34紧密结合，该结合作用对于VPS34活性至关重要。Beclin1作为自噬调节因子提供相互作用的平台，因此它在自噬调控中扮演着独特而重要的角色，是调控信号汇聚的关键点。Beclin1包含多个独立的功能区，其卷曲螺旋区(CoiledCoil)是募集众多自噬调节因子的蛋白作用平台。本领域研究人员公开了多种自噬促进剂，用于治疗或预防神经变性疾病。Bradner等人发现的双吲哚基马来酰亚胺核心的化合物，Rubinsztein等人发现雷帕霉素，Yuan等人公开了化合物包括洛哌丁胺、胺碘酮、尼古地平、匹莫齐特，李敏等人公开的异钩藤碱，这些促进剂都是通过刺激自噬活性用于治疗以细胞内蛋白聚集物形成为特征的病症。然而，研究发现，很多自噬诱导剂，尤其是经典的自噬诱导剂(mTOR抑制剂)，不能诱导动物大脑皮质中的自噬或者仅在神经元中诱导轻度自噬，从而导致其在神经退行性疾病不能发挥清除变性蛋白的能力，无法起到帕金森病治疗作用。同时，很多非mTOR抑制剂靶点不明确。因此，对于治疗可以受益于自噬作用的神经退行性病变帕金森病的在神经元中不依赖于mTOR、特异性诱导自噬的强效药剂存在着需求。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的上述不足，提供一种靶点明确且不同于经典mTOR抑制剂的三萜类化合物的应用，旨在解决现有自噬诱导剂靶点不明确的问题。本专利技术的另一目的在于提供一种治疗帕金森病的自噬诱导剂，解决现有自噬诱导剂由于不能诱导动物大脑皮质中的自噬或者仅在神经元中诱导轻度自噬而导致药效不佳的技术问题。为了实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：三萜化合物用于阻断自噬骨架蛋白Beclin1与自噬抑制因子Bcl-2之间的相互结合，以诱发神经细胞自噬，所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。以及，三萜化合物在制备治疗帕金森药物中的应用，所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。以及，一种治疗帕金森药物，包括药物可接受的辅料，还包括有效剂量的三萜类化合物，且所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。以及，一种治疗帕金森药物的制备方法，包括采用本专利技术治疗帕金森药物中的所述药物可接受的辅料与所述有效剂量的三萜类化合物照药学人员能够理解的方法和制剂上能够接受的工艺处理的步骤。本专利技术与现有技术相比，本专利技术三萜类化合物的应用中，山楂酸和委陵菜酸能直接阻断自噬骨架蛋白Beclin1与自噬抑制因子Bcl-2之间的相互结合，从而在神经细胞中具有促进自噬的作用，其作用靶点明确，且不同于经典mTOR抑制剂作用原理，有效克服了现有自噬诱导剂靶点不明确缺陷。同时，山楂酸和委陵菜酸具有对帕金森病细胞的神经保护作用。因此，将山楂酸和委陵菜酸能够直接用于制备治疗帕金森药物，以赋予该治疗帕金森药物良好的药效。上述本专利技术治疗帕金森药物以山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物为药物活性成分，能直接阻断自噬骨架蛋白Beclin1与自噬抑制因子Bcl-2之间的相互结合，从而在神经细胞中具有促进自噬的作用，并对帕金森病细胞的神经保护作用，使得本专利技术治疗帕金森药物对治疗帕金森有良好的药效。上述本专利技术治疗帕金森药物制备方法能够根据剂型的要求而灵活选用辅料，而且该有效药物成分山楂酸、委陵菜酸能够与辅料照药学人员能够理解的方法和制剂上能够接受的工艺处理成药，其制备工艺稳定，有效保证了药物的活性稳定性，而且还降低了生产成本。附图说明图1为实施例1采用ITC检测Beclin1与Bcl-2之间的相互作用关系图；其中图1(a)为无山楂酸加入时Beclin1滴定到Bcl-2中两者相互作用引起的热转化关系图(纵坐标为负值表明放热)；图1(b)为山楂酸加入时,Beclin1滴定到Bcl-2中两者相互作用引起的热转化关系图(纵坐标为正值表明吸热)；图2为实施例1采用ITC检测Beclin1与Bcl-2之间的相互作用关系图；其中图2(a)为无委陵菜酸加入时Beclin1滴定到Bcl-2中两者相互作用引起的热转化关系图(纵坐标为负值表明放热)；图2(b)为委陵菜酸加入时,Beclin1滴定到Bcl-2中两者相互作用引起的热转化关系图(纵坐标为正值表明吸热)；图3为实施例2采用Pull-down试验检测Beclin1与Bcl-2之间的相互作用后的SDS-PAGE分离图；其中，图3(a)为无和有山楂本文档来自技高网...

【技术保护点】
三萜化合物用于阻断自噬骨架蛋白Beclin1与自噬抑制因子Bcl‑2之间的相互结合，以诱发神经细胞自噬，所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。

【技术特征摘要】
1.三萜化合物用于阻断自噬骨架蛋白Beclin1与自噬抑制因子Bcl-2之间的相互结合，以诱发神经细胞自噬，所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。2.三萜化合物在制备治疗帕金森药物中的应用，所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。3.一种治疗帕金森药物，包括药物可接受的辅料，其特征在于：还包括有效剂量的三萜类化合物，且所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸中的任一种或两者的混合物。4.根据权利要求3所述的治疗帕金森药物，其特征在于：所述三萜类化合物为山楂酸与委陵菜酸的混合物时，所述山楂酸与委陵菜酸的质量比为(1-2)：(1-3)。5.根据权利要求3所述的治疗帕金森药物，其特征在于：所述三萜类化合物为山楂酸、委陵菜酸的混合物，且所述山楂酸与委陵菜酸的质量比为1：2。6.根据权利要求3-5任一所述的治疗帕金森药物，其特征在于：所述治疗帕金森药物为溶液剂、丸剂、片剂、胶囊剂、散剂、糊剂和气溶胶中的任一剂型。7.根据权利要求3-5任一所述的治疗帕金森药物...

【专利技术属性】
技术研发人员：李小花，董晓莉，赵清，张焕，
申请(专利权)人：香港理工大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44